Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

Tabela 3. Efeito da albumina sobre os valores de controle respiratório de
mitocôndrias isoladas de A. angustifolia
Composição dos meios
(presença ou ausência de albumina)
Meio de Isolamento e de reação com
albumina
Meio de Isolamento com albumina e de
reação sem albumina
Meio de Isolamento sem albumina e de
reação com albumina
Meio de Isolamento e de reação sem
albumina
Valores de CCR
O meio de reação continha sacarose 0,25 mol.L -1 , Hepes 10 mmol.L -1 (pH 7,2), KCl 2 mmol.L -1 , Pi 2
mmol.L -1 , EGTA 0,1 mmol.L -1 e malato/glutamato 10 mmol.L -1 , em um volume final de 1,3 a 29°C.
Onde indicado, na presença de 0,2 g% de BSA essencialmente livre de ácidos graxos. O consumo de
oxigênio foi iniciado com 0,5 mg.mL -1 de proteína mitocondrial e ADP 160 nmol por mg de proteína foi
adicionado após 2 minutos. Os valores de CCR são representativos de 3 experimentos
independentes.
Na Tabela 4 está representada a atividade da PUMP de mitocôndrias de A.
angustifolia submetidas a diferentes condições de estresse por variações de
temperatura. Os efeitos da adição de albumina nos meios de isolamento e reação
sobre a atividade desta enzima também estão demonstrados. Observa-se que em
mitocôndrias submetidas ao estresse pelo frio e calor a PUMP apresentou sua
atividade estimulada, refletida nos valores menores de CCR em comparação as
mitocôndrias não estressadas. A adição de albumina aos meios de isolamento e/ou
de reação promoveu uma aumento nos valores de CCR, também nas situações de
estresse, confirmando os resultados anteriores (Tabela 3). Podemos verificar a
diminuição dos controles respiratórios nas mitocôndrias isoladas com BSA e meio de
reação que continha BSA de 4,5 do controle sem estresse para 3,9 no estresse pelo
frio por 24h a 4°C, 4,0 no estresse pelo frio por 48h a 4°C, 3,1 no estresse pelo calor
por 12h a 37°C e 2,5 no estresse pelo calor por 4h a 43°C. Essa redução do controle
respiratório também foi verificada nas mitocôndrias (+BSA) e meio (–BSA),
mitocôndrias (–BSA) e meio (+BSA) e principalmente nas mitocôndrias (-BSA) e
4,5
2,7
3,7
1,7