Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

Tabela 1. Efeito da flavona sobre a atividade da NADH desidrogenase em
mitocôndrias de A. angustifolia
Flavona NADH
(μmol.L -1 ) Desidrogenase
0 100
25 92,1 (±1,9)
50 84,1 (±2,6)
100 75,2 (±9,4)
O ensaio foi realizado conforme procedimentos descritos em Materiais e Métodos, no item 4.10 com
suspensão mitocondrial de 0.1 mg.mL -1 em volume final de 1 mL a 28°C. Os resultados estão
expressos em Atividade Enzimática em % relativa ao controle. Controle 100% corresponde a
atividade da enzima: NADH – Desidrogenase: 147,6 nmol de ferricianeto reduzido.min -1 .mg -1 de
proteína mitocondrial. Os valores da Tabela são representativos de 4 experimentos independentes,
com 3 repetições cada.
Na Tabela 2 estão apresentados os efeitos da flavona 100 μmol.L -1 sobre a
atividade da NADH - citocromo c redutase. Esses experimentos foram feitos na
ausência ou presença de rotenona, com o objetivo de confirmar os possíveis locais
de ação da flavona. Considerando que a rotenona é um potente inibidor específico
do complexo I (ERNSTER et al., 1963), seria esperado que essa inibição pela
flavona fosse especifica para as NADH desidrogenases internas e externas.
A atividade total obtida na determinação da NADH citocromo c redutase foi
de 51,3 (±2,3) nmol de citocromo c reduzido.min -1 .mg -1 de proteína mitocondrial
(controle=100%). Esta atividade corresponde a soma da atividade de todas as
NADH desidrogenas presentes: complexo I + interna + externa. Na ausência de
rotenona, a atividade das enzimas na presença da flavona foi de 42,4 (±1,1) nmol de