Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

5.3 EFEITO DA FLAVONA NA OXIDAÇÃO DO MALATO/GLUTAMATO EM
MITOCÔNDRIAS ISOLADAS DE A. angustifolia
Como foi constatado em mitocôndrias de tubérculos de batata (RAVANEL et
al., 1981) de Aspergillus fumigatus (TUDELLA et al., 2003) de Ustilago maydis
(JUÁREZ et al., 2004) e de Plamodium yoelii yoelii (UYEMURA et al., 2004), a
flavona causa inibição tanto sobre a NADH desidrogenase interna como sobre a
externa.
Para verificar se a flavona inibe também a NADH desidrogenase interna de
mitocôndrias de A. angustifolia, foram feitos experimentos com malato/glutamato,
que oxidados no interior da organela geram NADH que cede seus elétrons para o
complexo I e também para NADH desidrogenase interna. Considerando novamente
que a rotenona é um inibidor específico somente do complexo I, e não das NADH
desidrogenases alternativas, em um meio contendo malato/glutamato como
substrato e rotenona, uma possível inibição do consumo de O2 pela flavona será
especifica sobre a NADH desidrogenase interna (TUDELLA et al., 2003; JUÁREZ et
al., 2004; UYEMURA et al., 2004).
A Figura 8 mostra o efeito da flavona sobre o consumo de oxigênio de
mitocôndrias respirando em velocidade máxima devido a presença de FCCP,
utilizando malato/glutamato como substrato oxidável. No experimento da Figura 8A
foram adicionados 40 μmol.L -1 de rotenona ao meio de reação contendo a
suspensão mitocondrial. A adição de malato/glutamato causou um consumo de O2
de 42 nmol O2.min -1 .mg -1 de proteína mitocondrial. Nessas condições o complexo I
está totalmente inibido. A adição posterior de 500 μmol.L -1 de flavona causou uma
diminuição de aproximadamente 60% no consumo de oxigênio. A Figura 8C mostra
a respiração por malato/glutamato na ausência de rotenona. Nessa condição o
consumo de O2 foi de 96 nmol O2.min -1 .mg -1 . A adição subseqüente de rotenona
(inibindo o complexo I) causou uma diminuição do consumo de oxigênio para 47
nmol O2.min -1 .mg - 1 o qual foi reduzido para 22 nmol O2.min -1 .mg - 1 por uma adição
posterior de flavona. Pelo resultado das Figuras 8(A e C) conclui-se que a inibição
da NADH desidrogenase interna foi de aproximadamente 60%.