Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

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Figura 6. Traçados demonstrativos do consumo de O2 e potencial de
membrana (Δψ) de mitocôndrias isoladas de A. angustifolia
Meio de reação: sacarose 0,25 mol.L -1 , Hepes-KOH 10 mmol.L -1 (pH 7,2), KCl 2 mmol.L -1 , BSA
essencialmente livre de ácido graxos 0,2 g%, Pi 2 mmol.L -1 , malato/glutamato 10 mmol.L -1 (A) e
succinato 10 mmol.L -1 (B), EGTA 0,1 mmol.L-1 (A e B) e rotenona 40 μmol.L -1 (B) em um volume final
de 1,3 mL a 29°C. O consumo de oxigênio foi iniciado com adições de 0,5 mg.mL -1 de proteína
mitocondrial e outras adições foram ADP 160 nmol por mg de proteína como indicado nas Figuras. A
Figura é representativa de 5 experimentos independentes. O número entre parêntese corresponde as
velocidades de consumo de O2 expressas em nmol O2.min -1 .mg -1 de proteína mitocondrial.
Inserto foi adicionado 0,5 mg.mL -1 de proteína mitocondrial ao meio de reação padrão descrito no
item 4.7 do material e métodos, suplementado com Pi 2 mmol.L -1 , rotenona 40 μmol.L -1 , e safranina O
5 μmol.L -1 em um volume final de 2 mL a 28°C. A reação foi iniciada com a adição de succinato 10
mmol.L -1 . Outras adições foram ADP 80 nmol por mg de proteína e FCCP 5 μmol.L -1 , como indicado
nas Figuras. A Figura é representativa de 3 experimentos independentes.
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