Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

A Figura 6B mostra o consumo de oxigênio em mitocôndrias oxidando
succinato, também na presença de fosfato. As velocidades dos estados 3 e 4 foram
de 24 nmol O2.min -1 .mg -1 e 12 nmol O2.min -1 .mg -1 , respectivamente. Adições
seqüenciais de ADP indicaram controles respiratórios similares.
A capacidade fosforilativa das mitocôndrias de A. angustifolia demonstrada
nos experimentos de consumo de oxigênio, Figura 6(A e B), foram confirmadas pelo
experimento mostrado no inserto da Figura 6. O inserto está mostrando a variação
do potencial elétrico (Δψ) em mitocôndrias por adições de ADP a partir da
energização da mitocôndria com succinato. Os resultados mostram a formação do
potencial elétrico quando succinato foi adicionado. Adições de 80 nmol de ADP
induziram diminuições transitórias de Δψ, indicando a capacidade fosforilativa da
preparação mitocondrial utilizada. A queda do Δψ após a adição do ADP mostra que
a síntese de ATP depende do potencial elétrico de membrana. Essa queda do Δψ é
acompanhada pelo aumento da velocidade respiratória (Figura 6A e B). Observa-se
no inserto que a adição subseqüente de FCCP provoca o colapso do potencial
elétrico de membrana.
Os valores de controle respiratório de ∼4,0 para mitocôndrias energizadas
com malato/glutamato (Figura 6A) e de ∼2,0 para a respiração com succinato (Figura
6B) são considerados bons controles respiratórios para mitocôndrias isoladas de
plantas e mostram que estão acopladas e funcionais. O isolamento de mitocôndrias
de plantas é dificultado devido a presença da parede celular e do conteúdo de
vacúolos. Mitocôndrias de plantas também apresentam menores valores de CCR
devido a presença da proteína desacopladora de plantas (PUMP).