Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

grande homologia com o domínio EF-hand da NADH desidrogenase interna de N.
crassa, uma proteína de 64 kDa (MELO et al., 1999).
Já na face interna da membrana mitocondrial interna estão localizadas duas
NAD(P)H: ubiquinona oxidoredutases que oxidam NADH e NADPH da matriz
competindo com o complexo I. A NADH - DHin que oxida NADH, independe da
presença de Ca 2+ e a NADPH - DHin que oxida NADPH de forma dependente de
Ca 2+ e é sensível ao inibidor DPI (MELO et al., 1996). As evidências da presença de
diferentes enzimas NAD(P)H desidrogenases, alojadas no lado interno da membrana
mitocondrial interna, surgiram com os estudos em partículas submitocondriais
invertidas, (inside-out - SMP). O potencial elétrico de membrana gerado pela adição
de deamino-NADH foi colapsado pela adição de rotenona. A adição subseqüente de
NADPH gerou um pequeno potencial de membrana que foi colapsado pela adição
de DPI, mostrando que a NADPH desidrogenase Ca 2+ dependente é sensível ao DPI
(RASMUSSON & M∅LLER, 1991). Na presença de rotenona, condição em que o
complexo I está inibido, e DPI, condição em que a NADPH interna está inibida, a
adição de NADH gera um rápido consumo de oxigênio e um potencial elétrico de
membrana que são inibidos por antimicina A e colapsados, respectivamente
(M∅LLER, 2001).
Estudos realizados com a cadeia respiratória de plantas, a qual divide
semelhanças com a cadeia respiratória de fungos, mostraram que as NADH
desidrogenases alternativas são sensíveis à flavona e insensíveis à rotenona
(RAVANEL et al., 1981; TUDELLA et al., 2003; UYEMURA et al., 2004; JUÁREZ et
al., 2004).
1.2.2 Oxidase Alternativa
A AOX é uma proteína de 34 kDa localizada na superfície interna da
membrana mitocondrial (DUCET & GAUVRIT, 1977) e foi inicialmente purificada de
Arum maculatum, Arum italicum e Sauromatum guttatum (ELTHON & McINTOSH,
1986, 1987).
A oxidase alternativa cataliza a oxidação do ubiquinol e a redução do oxigênio
a água, sem bombeamento de prótons e conseqüentemente sem a geração do