Caroline Valente dissertação de mestrado - Universidade Federal ...

1.2.1 NAD(P)H Desidrogenases Alternativas
A atividade de NAD(P)H desidrogenase em mitocôndrias de plantas foi
primeiramente observada em 1961 por Bonner e Voss que demonstraram que estas
organelas, ao contrário de mitocôndrias de mamíferos, oxidavam o NAD(P)H
adicionado externamente (SOOLE & MENZ, 1995). Wiskich e Bonner (1963)
observaram que a rotenona e a piericidina A não causavam a completa inibição da
oxidação de NADH (SOOLE & MENZ, 1995). Diferentes sensibilidades ao inibidor
DPI (diphenylneiodonium) permitiram a observação de diferentes NAD(P)H
desidrogenases presentes na face interna da membrana mitocondrial interna de
organelas isoladas de Solanum tuberosum e Arum maculatum (ROBERTS at al.,
1995). Essas diferenças de sensibilidade mostraram a presença de no mínimo duas
desidrogenases localizadas na face externa da membrana mitocondrial interna,
específicas para diferentes substratos, NADH e NADPH e com diferentes
sensibilidades ao inibidor DPI. E, ainda, que essas desidrogenases externas também
doavam seus elétrons para a cadeia transportadora de elétrons (M∅LLER, 2001).
Duas homólogas NADH – DH alternativas não bombeadoras de prótons foram
identificadas em leveduras e em E. coli, nda1 e ndb1, respectivamente, e também
foram identificadas em folhas de batata. O estudo da expressão do gene nas
proteínas da cadeia respiratória de mitocôndrias isoladas de folhas de batata revelou
que há um aumento da expressão do gene nda1 durante o desenvolvimento da
folha, cuja maturação é completamente dependente da luz, sugerindo que a rota da
NDA1 está envolvida com a fotorespiração (SVENSSON & RASMUSSON, 2001).
Foi observado que, depois do estresse pelo frio, houve uma específica diminuição
da regulação da transcrição da proteína NDA1, resultando em uma diminuição da
capacidade respiratória e na oxidação do NADH adicionado externamente nas
mitocôndrias isoladas de folhas de batata. (SVENSSON et al., 2002).
Acredita-se que a dependência da presença de Ca 2+ para a oxidação de
NADH, externamente adicionado à preparação de mitocôndrias isoladas de
tubérculos de batata (S. tuberosum), se deva à presença de uma seqüência
especifica de aminoácidos na NADH desidrogenase externa, que constituem o
domínio EF-hand, produto do gene ndb1. Essa seqüência de aminoácidos possui