Doença de Petri da Videira - UTL Repository - Universidade Técnica ...

2.2 DETECÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DOS AGENTES CAUSAIS
Doença de Petri
O isolamento e a identificação de espécies de Phaeoacremonium spp. e Pa.
chlamydospora não são fáceis. Normalmente recorre-se a métodos clássicos de
isolamento em cultura pura e à subsequente descrição de características morfológicas e
culturais, com auxílio de chaves dicotómicas. É, no entanto, um processo difícil e moroso,
pois o fungo tem um crescimento lento, havendo a possibilidade de contaminações por
parte de outros fungos que se sobrepõem a estes. O diagnóstico da doença pode
demorar até 4 semanas, mostrando a necessidade da existência de um método rápido e
sensível, para identificação destes fungos.
Em 1998, a sequenciação de parte da região ITS do DNA ribossomal de isolados de
videira, identificados como Phaeoacremonium spp., confirmou que alguns divergiam
claramente dos restantes (Dupont et al., 1998). Com base nestes e noutros dados de
sequenciação (ITS1, 5.8S, ITS2, β-tubulina), a par do estudo de características
morfológicas e culturais, Crous & Gams (2000) descreveram pela primeira vez o género
Phaeomoniella e a nova combinação Pa. chlamydospora, que permitiu o enquadramento
desses isolados divergentes nesta nova espécie. Também Tegli et al. (2000)
demonstraram, através de RAPD-PCR e RAMS-PCR, que os dois géneros eram distintos.
Paralelamente, estes autores, com base em sequências da região ITS, desenharam
iniciadores específicos que permitem distinguir a espécie Phaeoacremonium aleophilum
(através do par Pal1N/Pal2) de Phaeomoniella chlamydospora (pelo par Pch1/Pch2).
Posteriormente, Dupont et al. (2002) distinguiram cinco espécies de Phaeoacremonium,
Pm. aleophilum, Pm. inflatipes, Pm. parasiticum, Pm. rubrigenum e Pm. viticola usando
marcadores PCR-RFLP das regiões ITS e de parte do gene β-tubulina. Por sua vez Mostert
et al. (2005) desenvolveram uma metodologia polifásica para identificação de espécies
do género Phaeoacremonium com recurso a marcadores morfo-culturais e também a
sequências de parte do gene da β-tubulina. Com os resultados obtidos, construíram uma
base de dados para o género Phaeoacremonium, que se encontra disponível no website
do Centralbureau voor Schimmelcultures (CBS).
2.3 SINTOMAS DA DOENÇA
Os sintomas da doença de Petri podem variar de ano para ano dependendo da idade das
videiras e da intensidade de ataque. O tipo de sintomas depende de inúmeros factores,
dos quais se destacam, a severidade da doença, a composição da comunidade fúngica
presente em cada planta e as condições de stresse a que estas estão sujeitas, sobretudo
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