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SUMÁRIO LISTA DE ABREVIAÇÕES -------------------------------------------------------------- LISTA DE FIGURAS ----------------------------------------------------------------------- LISTA DE TABELAS ---------------------------------------------------------------------- RESUMO -------------------------------------------------------------------------------------- ABSTRACT ---------------------------------------------------------------------------------- 1. INTRODUÇÃO ------------------------------------------------------------------------- 1.1. DOR ------------------------------------------------------------------------------- 1.2. DOR NEUROPÀTICA ------------------------------------------------------------ 1.2.1. Avulsão do plexo braquial ----------------------------------------------- 1.2.2. Mecanismos envolvidos na dor neuropática ------------------------ 1.2.2.1. TNFα e dor neuropática ------------------------------------------------- 1.2.2.2. Fatores neurotróficos e dor neuropática ---------------------------- 1.2.2.3. Cininas e dor neuropática ----------------------------------------------- 2. OBJETIVOS ---------------------------------------------------------------------------- 2.1. OBJETIVO GERAL --------------------------------------------------------------- 2.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ----------------------------------------------------- 3. MATERIAL E MÉTODOS ----------------------------------------------------------- 3.1. ANIMAIS --------------------------------------------------------------------------------- 3.2. PROCEDIMENTO CIRÚRGICO PARA A AVULSÃO DO PLEXO BRAQUIAL 3.3. ANÁLISE DO LIMIAR MECÂNICO ATRAVÉS DO FILAMENTO DE VON FREY ------------------------------------------------------------------------------- 3.4. ANÁLISE DO LIMIAR TÉRMICO ATRAVÉS DO TESTE DE RETIRADA DA CAUDA (TAIL-FLICK) ------------------------------------------------------------ 3.5. ANÁLISE DO LIMIAR TÉRMICO ATRAVÉS DO TESTE DE RETIRADA DA PARA (HARGREAVES) ---------------------------------------------------------- 3.6. ATIVIDADE LOCOMOTORA (CAMPO ABERTO) ------------------------------ 3.7. EFEITO SOBRE O DESEMPENHO MOTOR (ROTA-ROD) -------------------- 3.8. AVALIAÇÃO DO PESO DOS ANIMAIS SUBMETIDOS À APB---------------- 3.9. ANÁLISE DE ALGUNS MECANISMOS ENVOLVIDOS NA GÊNESE E NA MANUTENÇÃO DAS RESPOSTAS HIPERNOCICEPTIVAS INDUZIDAS PELA APB EM CAMUNDONGOS ----------------------------------------------- 32 3.9.1. Participação da citocina TNFα ----------------------------------------- 3.9.1.1. Limiar mecânico e térmico de animais TNFα p55-/- 32 submetidos à APB ------------------------------------------------------------------- 32 3.9.1.2. Efeito de estratégias anti-TNFα nas respostas i iv vi vii ix 01 01 05 14 17 18 19 22 26 26 26 28 28 29 30 30 31 31 31 32
hipernociceptivas induzidas pela APB ------------------------------------------ 33 3.9.2. Participação dos fatores neurotróficos ------------------------------- 33 3.9.2.1. Efeitos dos anticorpos anti-fatores-neurotróficos sobre a hipernocicepção mecânica induzida pela APB ------------------------------- 33 3.9.3. Participação dos receptores B1 e B2 para cininas ----------------- 34 3.9.3.1. Limiar mecânico e térmico de animais B1R-/- e B2R-/- submetidos à APB ------------------------------------------------------------------- 3.9.3.2. Efeitos do antagonista seletivo para o receptor B2 para cininas sobre a resposta hipernociceptiva induzida pela APB ----------- 3.9.3.3. Efeito de antagonistas seletivos para o receptor B1 sobre a hipernocicepção mecânica induzida pela APB ------------------------------- 3.10. VIAS DE ADMINISTRAÇÃO ----------------------------------------------------- 3.10.1. Administração local ------------------------------------------------------ 3.10.2. Administração intratecal (i.t.) ------------------------------------------ 3.10.3. Administração intracerebroventricularl (i.c.v.) --------------------- 3.11. ENSAIOS BIOQUÍMICOS -------------------------------------------------------- 3.11.1. Quantificação do RNA mensageiro para o receptor B1 das cininas ---------------------------------------------------------------------------------- 3.11.1.1. Ensaio de RT-PCR ------------------------------------------------------ 3.11.2. Expressão dos receptores B1 e B2 para cininas ------------------ 3.11.2.1. Preparação dos tecidos para o ensaio de Western Blot ------ 3.11.2.2. Ensaio de Western Blot ------------------------------------------------ 3.12. DROGAS E REAGENTES -------------------------------------------------------- 3.13. ANÁLISE ESTATÍSTICA --------------------------------------------------------- 4. RESULTADOS ------------------------------------------------------------------------- 4.1. RESPOSTAS HIPERNOCICEPTIVAS INDUZIDAS PELA APB EM CAMUNDONGOS SUÍÇOS ------------------------------------------------------- 4.2. RESPOSTA HIPERNOCICEPTIVA NAS PATAS DIANTEIRAS DE CAMUNDONGOS SUÍÇOS SUBMETIDOS À APB------------------------------ 4.3. PESO CORPORAL, ATIVIDADE LOCOMOTORA E COORDENAÇÃO MOTORA DE CAMUNDONGOS SUÍÇOS SUBMETIDOS À APB ------------- 4.4. ANÁLISE DOS DIFERENTES MECANISMOS ENVOLVIDOS NA GÊNESE E NA MANUTENÇÃO DAS RESPOSTAS HIPERNOCICEPTIVAS INDUZIDAS PELA APB EM CAMUNDONGOS --------------------------------- 47 4.4.1. Participação da citocina TNFα ----------------------------------------- 4.4.1.1. Limiar mecânico e térmico de animais TNFα p55-/- 47 submetidos à APB ------------------------------------------------------------------- 47 4.4.1.2. Efeito do anticorpo anti-TNFα e da talidomida na indução da resposta hipernociceptiva mecânica induzida pela APB em 34 34 35 36 36 36 36 37 37 37 38 38 39 39 40 42 42 44 45
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7. ANEXOS
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