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antagonistas seletivos para cada um dos receptores, bem como investigar alterações quanto à expressão do receptor B1 e B2 para cininas na medula espinhal e diferentes estruturas do cérebro (hipotálamo, tálamo, hipocampo e cortex) através da técnica de Western Blot e da técnica de transcrição reversa seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR).
3. MATERIAL E MÉTODOS 3.1. Animais Foram utilizados camundongos fêmeos Swiss (pesando entre 20 e 28 g), criados no Biotério Central da Universidade Federal de Santa Catarina. Em alguns experimentos foram utilizados camundongos fêmeos com deleção gênica para o receptor p55 do TNFα (TNFα p55 -/- ), obtidos da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), e camundongos com deleção gênica para os receptores B1 e B2 para cininas (B1R -/- e B2R -/- , respectivamente), obtidos da Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Os animais selvagens de linhagens semelhantes aos animais com deleção gênica foram utilizados como controle (para o receptor B1 linhagem J129, para o receptor B2 linhagem C57/BL6 e para o receptor p55 do TNFα linhagem C57/BL6). Os animais foram mantidos em ambiente com temperatura e umidade controladas (22 ± 1°C, 60 a 80% de umidade), em ciclo 12 h claro/12 h escuro, com água e ração fornecidos ad libitum. Os animais permaneceram no laboratório durante um período de adaptação de pelo menos 1 h antes da realização dos testes farmacológicos, realizados geralmente entre 8 e 17 h, a temperatura de 22 ± 1 ºC. Os experimentos descritos foram conduzidos de acordo com as diretrizes atuais de cuidados com os animais de laboratório e com as diretrizes éticas para investigações de dor experimental em animais conscientes (ZIMMERMANN, 1983). O Comitê de Ética da Universidade Federal de Santa Catarina aprovou todos os procedimentos experimentais (número de protocolo 262/CEUA e 23080.035334/2003- 16/UFSC). O número de animais e a intensidade do estímulo nocivo utilizado foram os mínimos necessários para demonstrar os efeitos dos tratamentos com as drogas.
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7. ANEXOS
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