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4.8. CULTURA CELULAR
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Biologia e Fisiologia Celular
O marco inicial, que deu início ao estabelecimento da cultura celular, foi o trabalho de
Wilhelm Roux no ano de 1885. O zoólogo alemão conseguiu manter, por alguns dias, células
embrionárias de galinha em uma solução salina. Era a primeira vez que um cientista obtinha
sucesso na tentativa de manter vivas as células de um organismo em um meio externo a ele.
O termo cultura celular refere-se à manutenção de células eucarióticas ou procarióticas em
laboratório. No caso de organismos multicelulares, estas células são isoladas e mantidas em
condições rígidas de cultivo. Os ensaios experimentais realizados com culturas celulares são
chamados ensaios in vitro - em contraste com os ensaios realizados com organismos intactos,
que denominamos ensaios in vivo.
As culturas celulares obtidas diretamente de organismos vivos, e mantidas em laboratório
por um curto intervalo de tempo, são chamadas culturas primárias. Uma vez estabelecidas, as
culturas primárias são mantidas pelo tempo necessário para a realização dos ensaios in vitro. As
células também podem ser mantidas em culturas por meses ou anos. Neste caso, chamamos as
culturas de culturas secundárias ou linhagens celulares. Um atributo fundamental e obrigatório,
neste caso, é que tais células se dividam in vitro, desde que, é claro, sejam cultivadas em um
meio de cultura adequado. O estabelecimento de uma linhagem celular depende de uma série de
fatores, mas, fundamentalmente, tais células precisam estar constantemente entrando em um
processo de divisão celular, o que é mantido por meio de estímulos extracelulares, mas que
também deve ser uma característica intrínseca do próprio tipo celular.
As condições de manutenção de uma cultura celular dependem do tipo celular. Para cada
tipo celular existe um meio de cultura apropriado, além de pH, temperatura e grau de oxigenação
específicos. Com relação à composição dos meios de cultura, no geral, os meios de cultura para
células eucarióticas são constituídos de aminoácidos, açúcares, vitaminas, fatores de
crescimento, e antibióticos e antifúngicos para prevenir a contaminação com microorganismos.
Os estudos in vitro, realizados tanto nas culturas primárias quanto nas linhagens celulares,
são essenciais para a biologia celular e para as mais diversas áreas das ciências biológicas e da
saúde, tais como morfologia, farmacologia, imunologia, bioquímica, biofísica, genética,
parasitologia, hematologia, oncologia, patologia e biologia de desenvolvimento, entre outras. O
uso das linhagens celulares permite o desenvolvimento de estudos científicos com uma maior
consistência e reprodutibilidade dos resultados.
Uma das desvantagens de se trabalhar com culturas celulares é que após um determinado
período de manutenção destas células em cultura, e após sucessivas divisões celulares, as
características originais das células podem ser alteradas. Para prevenir que tais alterações
influenciem os estudos, o procedimento ideal é descartar a cultura após cerca de 50 ciclos de
renovação do meio de cultura (repique da cultura). Você deve estar se perguntando: e começar
tudo de novo? Isolar novas células dos organismos e começar tudo novamente? Não, não é
preciso todo esse trabalho novamente. Existem diversos bancos de células que comercializam os
mais variados tipos celulares. Além disso, é possível criopreservar a cultura original,
descongelando as amostras quando necessário.