KORRIGERT UTGAVE / CORRECTED VERSION - Patentstyret

NO/EP 2276756
170
konsentrert under vakuum. Residuet ble renset ved Gilson reversfase HPLC ved
eluering med en gradient av 10-90% acetonitril i vann med 0,05% TFA-buffer hvilket
ga produktet (105 mg, 81%). m/z (ES) 601 (M) + og 603 (M+2) + , også 623 (MNa) + og
625 (MNa+2) + .
5
Trinn B: 2-(2-Amino-1,3-tiazol-4-yl)-N-[2-brom-4-({(2S, 5R)-5-[(R)-hydroksy(fenyl)
metyl]pyrrolidin-2-yl}metyl]feny]acetamid
10
15
20
Til en oppløsning av 105 mg (0,175 mmol) tert-butyl (2S, 5R)-2-(4-{[(2-amino-
1,3-tiazol-4-yl)acetyl]amino}-3-brombenzyl)-5-[(R)-hydroksy(fenyl)metyl]pyrrolidin-
1-karboksylat (fra Trinn A) i 2,0 ml DCM ble det tilsatt 1,0 ml TFA og
reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 t. Azeotrop behandling med
toluen (2x) for overskytende syre. Residuet ble deretter tatt opp i acetonitril/vann/MeOH
(9:1:1) og renset på Gilson HPLC ved eluering med en 10-90%
gradient av acetonitril/vann med 0,05% TFA-buffer. Fraksjonene inneholdende
produktet ble kombinert, frosset og lyofilisert hvilket ga et hvitt skum (77 mg, 88%).
m/z (ES) 501(M) + og 503 (M+2) + , også 523 (MNa) + og 525 (MNa+2) + .
Ved anvendelse av de biologiske analysene beskrevet ovenfor ble human β3
funksjonell aktivitet av Eksempel 312 bestemt til å være mellom 11 og 100 nM.
25
EKSEMPEL 313
2-(2-Amino-1,3-tiazol-4-yl)-N-[2-brom-4-({(2R,
pyrrolidin-2-yl}metyl)fenyl]acetamid
5R)-5-[(R)-hydroksy(fenyl)metyl]
30
Trinn A: Tert-butyl (2R, 5R)-2-(4-{[(2-amino-1,3-tiazol-4-yl)acetyl]amino}-3-
brombenzyl)-5-[(R)-hydroksy(fenyl)metyl]pyrrolidin-1-karboksylat