KORRIGERT UTGAVE / CORRECTED VERSION - Patentstyret

NO/EP 2276756
116
5
10
trinn B. Råproduktet ble renset på Gilson HPLC ved eluering med en 0-50% gradient
av acetonitril/vann med 0,05% TFA-buffer. Fraksjonene inneholdende produktet ble
kombinert, frosset og lyofilisert hvilket ga et hvitt skum (4,11 mg, 89%). m/z (ES) 423
(MH) + . δ: 7,56 (br d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,42 (d, 7,8 Hz, 2H), 7,39 (t, J = 7,8 Hz, 2H)
7,32-7,29 (m, 1H), 7,16 (d, J = 8,0 Hz, 1H) 6,67 (br s,1H). 4,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H),
3,76-3,69 (m, 4H) 3,16 (dd, J = 6,3, 13,8 Hz, 1H), 2,94 (dd, J = 8,9, 13,8 Hz, 1H), 2,08-
2,00 (m, 1H), 1,86-1,74 (m, 3H).
Ved anvendelse av de biologiske analysene beskrevet ovenfor, ble human β3
funksjonell aktivitet av Eksempel 3 bestemt til å være mellom 11 til 100 nM.
EKSEMPEL 4
2-Amino-N-[4-{((2S,5R)-5-[(R)-hydroksy(fenyl)metyl]pyrrolidin-2-yl)metyl)fenyl] -
5,6-dihydro-4H-syklopenta [α] [1,3] tiazol-4-karboksamid
15
Trinn A: Tert-butyl-(2S,5R)-2-(4[({2-[(tert-butoksykarbonyl)amino]-5,6-dihydro-4Hsyklopenta
[α] [1,3] tiazol-4-yl}karbonyl)amino]benzyl}-5-[(R)-hydroksy-
(fenyl)metyl]pyrrolidin-1-karboksylat
20
25
30
Til en oppløsning av 220 mg (0,58 mmol) tert-butyl (2S, 5R)-2-(4-
aminobenzyl)-5-[(R)-hydroksy(fenyl)metyl] pyrrolidin-1-karboksylat (i-13a) og 164
mg (0,58 mmol) 2-[(tert-butoksykarbonyl)amino]-5,6-dihydro-4H-syklopenta [a] [1,3]
tiazol-4-karboksylsyre (i-8) i vannfri DMF (5 ml) ble det tilsatt EDC (165 mg, 0,86
mml), HOBt (132 mg, 0,86 mmol) og Hunig's Base (0,3 ml, 1,7 mmol) og den
resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur over natten. Hellt opp i vann
(50 ml) og ekstrahert med EtOAc (3 x 30 ml), kombinerte EtOAc-lag ble vasket med
vann (2 x 50 ml), mettet NaCl (25 ml), tørket over MgSO 4 , filtrert og evaporert.
Residuet ble renset ved MPLC (Biotage Horizon: FLASH 25+M) eluent: 100%
Heksaner (100 ml), gradient 0 til 35% EtOAc i Heksaner (750 ml), deretter 35%
EtOAc i Heksaner (600 ml). Diastereoisomerer ble separert ved kiral HPLC på AD-