Den dynamiske celle - Effimedicin
Den dynamiske celle - Effimedicin
Den dynamiske celle - Effimedicin
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
forskellige restriktionsenzymer, der alle genkender en specifik sekvens af 4-8 nukleotider i DNA.<br />
Gel-elektroforese: Deler DNA molekyler af forskellige størrelser.<br />
Da hvert nukleotid indeholder en negativt ladet ion.<br />
Hybridiseringsprincippet (molekylær genkendelse ved Watson-Crick baseparring) og dets anvendelse<br />
inden for gen- teknologien, f. eks. Southern og Northern blotting og in situ hybridisering. Microarray.<br />
Grundbegreberne ved DNA kloning: restriktionsenzymer, restriktionskort, DNA ligaser,<br />
kloningsvektorer, kloningsværter, cDNA syntese, gen- og cDNA-biblioteker.<br />
Sekventering og PCR (polymerase chain reaction) - metoden.<br />
Elektroforetisk gelskift assay, DNA footprinting.<br />
Genetisk transformation, anvendelse af rapportørgener ved studier af genekspression. Kendskab til<br />
principperne for "DNA engineering" til fremstilling af rekombinante proteiner (inklusiv in vitro<br />
mutagenese) og transgene organismer (f. eks. sygdomsmodeller).<br />
3. Livscyklus<br />
3.1 Centrale molekylære mekanismer i <strong>celle</strong>cyklus:<br />
Vækstfaktorers mitogene effekt gennem signalering via MAP kinaser. Cyclin-cdk, cyclin-cdk<br />
inhibitorer (CKI), checkpoint kontrol. Betydningen af protein fosforylering og nedbrydning for<br />
progressionen af <strong>celle</strong>cyklus. Betydningen af Rb og p53 i checkpoint kontrol.<br />
Aktiviteten af cyclin B-‐Cdk1 stiger kraftigt i profasen. Her medfører kinaseaktiviteten bl.a.<br />
1) Ændringer i mikrotubuli-‐dynamik herunder dannelse af tentrådsapparat, 2) kondensering<br />
af kromosomer ved aktivering af condensin-‐komplekset, 3) fragmentering af nukleolemma<br />
pga. phosphorylering af de nukleære laminer samt porekomplekser, 4) fragmentering af<br />
Golgi-‐apparatet ved phosphorylering af receptorer involveret i vesikel-‐docking.<br />
-Restriktions check point, G1-S, favorable betingelser for <strong>celle</strong>deling<br />
-DNA damage check points, G1, (især) S, og G2, monitorerer DNA skade<br />
-DNA damage og uduplikeret DNA, G2-M<br />
-Metafase checkpoint – mitotiske checkpoint: metafase-anafase, kromosom binding til mikrotubuli<br />
Det mitotiske check point sikrer at metafase stadiet kun fortsætter til anafase (søster kromatid<br />
separation) såfremt alle kromosomers kinetochorer er tilhæftet mikrotubuli.<br />
Ved det mitotiske check point befinder <strong>celle</strong>n sig i metafase svarende til at kromosomer er lejret
Change language