Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry

Het werkingsmechanisme van een enzym:
lactaat dehydrogenase
• Het meten van de activiteit met pyruvaat en oxamaat.
Oxamaat is een structuur analoog van pyruvaat maar kan
niet door NADH worden gereduceerd.
• Het laten instellen van het chemisch evenwicht van de
reductie van pyruvaat door NADH of de oxidatie van
lactaat door NAD + . Hierdoor zijn ΔG berekeningen
mogelijk.
• Het meten van de bindingsaffiniteit van NADH en het
effect van oxamaat.
• Het bestuderen van de structuur van het enzym met en
zonder gebonden 'substraten' (NADH en oxamaat).
Pyruvaat + NADH + H
LDH
+ NAD + + Lactaat
Absorbeert bij 340 nm
Overdracht van een H - en de opname van een H +
Pyruvaat
Oxamaat
H -
Absorbeert bij 280 nm
Absorbeert bij 280 nm
Lactaat
H +
PowerPoint paginanummer 8