Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry
Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry
Evenredigheid van lichtabsorptie met de concentratie Lichtabsorptie: wet van Lambert-Beer De afname van de lichtintensiteit ergens in het cuvet is rechtevenredig met de intensiteit ter plaatse: -dI/dl = k*I en deze afname is rechtevenredig met de concentratie van de absorberende stof. -dI/dl = k*c*I. Als deze formule (dI/I = -k*c* dl) geïntegreerd wordt vanaf lichtweglengte 0 tot 1 cm en een lichtintensiteit vooraan in het cuvet van I0 en overgegaan wordt van elog naar 10log dan wordt de formule: I = I0 *10- ε*c*1 log(I/I0)= log (10- ε*c ) log I0 /I = logI0 - logI = ε*c = E E = ε*c is de wet van Lambert-Beer en deze wet geeft aan dat de logI0 - logI (lichtabsorptie) rechtevenredig is met het concentratie van de absorberende stof. Een spectrofotometer zet I via een –logI conversie op de display. De intensiteit neemt af volgens: I=I 0 *10 -ε*c*l Lichtabsorptie en de daaraan gekoppelde fluorescentie 1 NADH absorbeert licht bij 340 nm, NAD + niet Relation absorption - fluorescence Effect of light absorbance by NADH on the intensity of the light beam in a cuvette 0.8 0.6 0.4 0.2 distance in the cuvette (cm) 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0.00 0 Relative intensity 0.1 mM De fluorescentie is een fractie van het geabsorbeerde licht. De lichtabsorptie is weer een fractie van de lichtintensiteit ter plekke. PowerPoint paginanummer 6
Fluorescence (AU) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 Concentration dependency of fluorescence and absorbance 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0 0.25 Concentration (mM) De relatie fluorescentie-concentratie is: fluorescentie = factor *( 1-e (-k*c) ) = factor *( 1-10 (-ε*c) ) = factor *( 1-10 (-Abs) ) De relatie absorptie-concentratie is: absorptie = ε * c NADH fluorescentie In vivo fluorescentie Wat gebeurt er in de verschillende fases (1-6)? Tijd Glycolyse in gistcellen Afhankelijk van de beschikbaarheid van zuurstof wordt CO 2 of ethanol gevormd. De achterliggende fysiologische regulatie zal na afloop van het experiment aan de hand van de verkregen resultaten behandeld worden. 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 Absorbance PowerPoint paginanummer 7
- Page 15 and 16: De reactievergelijking is: MUG + H
- Page 17 and 18: Meten onder v MAX condities De Mich
- Page 19 and 20: Figuur 2.1 Quantum-mechanische voor
- Page 21 and 22: Het restant licht valt op de fotomu
- Page 23 and 24: Figuur 2.3 Een schematische voorste
- Page 25 and 26: tage van de intensiteit van de lich
- Page 27 and 28: Figuur 2.5 Links staat het absorpti
- Page 29 and 30: wordt het signaal dat afkomstig is
- Page 31 and 32: het sequencen van DNA de aminozuurv
- Page 33 and 34: Tabel 2.1 Effect van plaatsgerichte
- Page 35 and 36: • Meet de absorptie gedurende ong
- Page 37 and 38: Computer gegenereerde getallen (mL
- Page 39 and 40: Gebruik voor de berekening van de d
- Page 41 and 42: - Het werken met het Control panel:
- Page 43 and 44: OPDRACHTEN EN VRAGEN CG EXPERIMENT
- Page 45 and 46: Figuur 2.8 De overgangstoestand voo
- Page 47 and 48: Figuur 3.1 Kristallen van natriumur
- Page 49 and 50: Figuur 3.4 De electrode reacties va
- Page 51 and 52: Figuur 3.7 Structuur van acetylacet
- Page 53 and 54: een verhoging van de GOT activiteit
- Page 55 and 56: den worden. Dit is als volgt in te
- Page 57 and 58: HANDLEIDING VOOR HET GEBRUIK VAN HE
- Page 59 and 60: - Oplossing 2 Los 0.15 g agarose M
- Page 61 and 62: Basispracticum Biologische Chemie:
- Page 63 and 64: Immunoprecipitatie en proteomics St
- Page 65: De ijking van de fluorimeter met 10
- Page 69 and 70: Vrije energie berekeningen (ΔGº)
- Page 71 and 72: GOT is een gekoppelde meting Glutam
- Page 73 and 74: Anode (+) pool Low pH (+) Low pH (+
Fluorescence (AU)<br />
1<br />
0.9<br />
0.8<br />
0.7<br />
0.6<br />
0.5<br />
0.4<br />
0.3<br />
0.2<br />
0.1<br />
0<br />
Concentration dependency of fluorescence and absorbance<br />
0 0.05 0.1 0.15 0.2<br />
0<br />
0.25<br />
Concentration (mM)<br />
De relatie fluorescentie-concentratie is:<br />
fluorescentie = factor *( 1-e (-k*c) ) = factor *( 1-10 (-ε*c) ) = factor *( 1-10 (-Abs) )<br />
De relatie absorptie-concentratie is: absorptie = ε * c<br />
NADH fluorescentie<br />
In vivo fluorescentie<br />
Wat gebeurt er in de verschillende fases (1-6)?<br />
Tijd<br />
Glycolyse in gistcellen<br />
Afhankelijk van de beschikbaarheid van zuurstof wordt CO 2<br />
of ethanol gevormd.<br />
De achterliggende fysiologische regulatie zal na afloop van<br />
het experiment aan de hand van de verkregen resultaten<br />
behandeld worden.<br />
1.4<br />
1.2<br />
1<br />
0.8<br />
0.6<br />
0.4<br />
0.2<br />
Absorbance<br />
PowerPoint paginanummer 7
Change language