21.09.2013 Views

Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry

Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry

Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

ß-glucuronidase als reporter enzym<br />

• Het E. coli ß-glucuronidase gen als reporter om<br />

gen expressie aan te tonen<br />

• De ß-glucuronidase activiteit in de verschillende<br />

planten is een maatstaf voor gen-expressie<br />

• De reactie die door GUS wordt gekatalyseerd<br />

V 0 is de initiële snelheid<br />

Fluorescent<br />

[ S]<br />

•V<br />

V0<br />

=<br />

([ S]<br />

+ K<br />

MAX<br />

Door bij een vaste hoeveelheid enzym bij verschillende<br />

substraat concentratie de activiteit te meten krijg je een V 0<br />

tegen S plot.<br />

De ß-glucuronidase activiteit (vakjes / min) in een plantenextract bij drie<br />

verschillende hoeveelheden plantmateriaal onder VMAX-condities: S = 10 x KM [ S]<br />

•V<br />

[ 10K<br />

M ] •VMAX<br />

10•V<br />

MAX 0.<br />

91•V<br />

MAX V =<br />

= = MAX<br />

V0<br />

=<br />

0<br />

([ S]<br />

+ K ) ([ 10K<br />

M ] + K M ) 11<br />

M<br />

10, 5 en 15 µl bladextract<br />

M<br />

)<br />

PowerPoint paginanummer 4

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!