Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry
Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry
Basispracticum Biologische Chemie - Biochemistry
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
ß-glucuronidase als reporter enzym<br />
• Het E. coli ß-glucuronidase gen als reporter om<br />
gen expressie aan te tonen<br />
• De ß-glucuronidase activiteit in de verschillende<br />
planten is een maatstaf voor gen-expressie<br />
• De reactie die door GUS wordt gekatalyseerd<br />
V 0 is de initiële snelheid<br />
Fluorescent<br />
[ S]<br />
•V<br />
V0<br />
=<br />
([ S]<br />
+ K<br />
MAX<br />
Door bij een vaste hoeveelheid enzym bij verschillende<br />
substraat concentratie de activiteit te meten krijg je een V 0<br />
tegen S plot.<br />
De ß-glucuronidase activiteit (vakjes / min) in een plantenextract bij drie<br />
verschillende hoeveelheden plantmateriaal onder VMAX-condities: S = 10 x KM [ S]<br />
•V<br />
[ 10K<br />
M ] •VMAX<br />
10•V<br />
MAX 0.<br />
91•V<br />
MAX V =<br />
= = MAX<br />
V0<br />
=<br />
0<br />
([ S]<br />
+ K ) ([ 10K<br />
M ] + K M ) 11<br />
M<br />
10, 5 en 15 µl bladextract<br />
M<br />
)<br />
PowerPoint paginanummer 4