(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

되지 않는다.그 예로는 티프테리아와 테타누스 톡신과 이들의 의학적으로 허용되는 톡소이드가 포함된다.다른
가능한 수송단백질에는 CRM(cross-reacting material)이라 불리는 박테리아 톡신과 유사한 항원성을 가지는 단
백질이 있다.본 발명의 수송단백질은 인간에게서 유래하지 않고 인간의 음식에 존재하지 않는 모든 단백질도 포
함된다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 고리-유사 구조를 형성하는 단백질은 PCMV를 만드는데 사용된다.이러한
단백질에는 녹농균의 Hcp 단백질, 콜레라 톡신 B 서브유닛, 대장균의 이열성 엔테로톡신 및 쉬가-유사 톡신이
있다.이러한 고리-유사 구조는 선형 다당류 사슬이 링 모양의 단백질 복합체를 관통하는 염주(beads on a
string)형태를 형성할 수 있다.단백질이 크로스링크된 후에, 이러한 복합체는 매우 안정할 것으로 예측되었다.
단백질의 구조적 데이터는 이러한 중앙 채널이 다당류 사슬이 쉽게 들어갈 수 있을 만큼 넓음을 보여준다.에를
들어, Hcp1 헥사고리의 중앙 채널은 42 옹스트롬으로 5.5 옹스트롬의 다당류 사슬 몇개를 수용하기에 충분한 너
비이다(Mougous et al., Science 312(5779) 1526- 1530, (2006)).다른 한편, 단백질 고리는 다당류 주위를 둘
러쌀 수도 있다(예를 들어, 특정 물리적 화학적 환경 하에서 자연적으로 링에 합쳐지는 모노머 수송단백질의 서
브유닛으로부터).이러한 링 안에 합쳐져 들어갈 수 있는 모노머 단백질은 당업계에 공지되어 있으며, 뉴몰리신
(Walker et al. Infect.. Immun. 55(5): 1184-1189 (1987); Kanclerski and Mollby, J. Clin. Microbiol.
25(2):222-225 (1987)), 리스테리올리신 O(Kayal and Charbit. FEMS Microbiol. Rev. 30:514- 529 (2006);
Mengaud et al. Infect. Immun. 55(12):3225-3227 (1987)), DNI, 안트락스 PA, Hcp1, 콜레라 톡신 B 서브유닛,
쉬가 톡신 B 서브유닛, 편모 및 당업계에 알려진 많은 관련 단백질을 포함한다.
또 다른 바람직한 구현예에 의하면, TLR(Toll-like receptor) 아고니스트가 수송단백질로 사용될 수 있다.TLR의
활성화는 적합한 면역반응을 형성하는데 있어 중요하며, 친화력의 성숙, 아이소타입 스위치, 면역학적 기억에
있어 핵심적 역할을 한다.콜레라균(Vibrio cholerae)의 편모(FLA)는 TLR 아고니스트이다.20 mg 이상의 FLA 단백
질이 재조합 대장균으로부터 추출되었으며, 이는 IL-6 대식세포의 유도 분석에서 강력한 TLR 활성인자임이 밝혀
졌다.뿐만 아니라, 잘 보존된 폐렴연쇄상구균의 단백질인 뉴몰리신 또한 TLR4를 활성화시키는 것으로 밝혀졌으
며, 또한 방어항원이기도 하다.따라서, 이 단백질은 PCMV 수송단백질로 이용될 수 있다.
더 나아가, 나이세리아 수막염균 등의 외막단백질(OMP)은 HIB 접합백신(Merck)의 수송단백질로 이용되며, 폐렴
연쇄상구균의 총 박테리아 세포에서 추출한 단백질은 동물 감염 모델에서 적어도 부분적인 보호역할을 함아 밝
혀졌다.본 발명의 바람직한 구현예에 있어서, 이러한 단백질 혼합물은 PCMV 수송단백질의 원천임이 밝혀졌다.
바람직한 구현예에 따르면, PCMV 방법은적어도 2개의 라이신 잔기 또는 블록되지 않고 화학적 변형에 의해 크로
스링크 할 수 있는 다른 잔기를 가지는 수송단백질이 사용된다. 또 다른 바람직한 구현예에 따르면, 수송단백
질은 멀티머(예를 들어 적어도 5개의 서브유닛을 포함하는)이다. 바람직하게는, 멀티머는 호모멀티머이다.
또 다른 구현예에 의하면, DNI는 사용전 해독이 필요없는 비독성 물질이므로 수송단백질로 사용된다. 나아가,
DNI가 중요한 항원에 대한 면역반응 뿐 아니라탄저균에 대한 방어면역 반응도 유도하기 때문에 DNI의 사용은
바람직하다. 또한 DNI는 내부에 설파이드 결합이 없다. 이러한 결합은 단백질을 변성시켜 에피토프를 파괴
할 수도 있는 보로화수소 환원에 민감하다
목적의 항원
본 발명의 백신 조성물과 그 제조 및 투여 방법은 어떠한 중요 항원, 예를 들어 다당류, 폴리 알콜 또는 폴리
아미노산에 대해서도 사용될 수 있다. 바람직하게는, 중요 항원은 백신의 제조 과정에서 일어나는 화학반응에
의해 파괴되는 1차 그룹을 가지지 않는다. 예를 들어 보로화수소의 환원을 통해 항원의 다이설파이드 결합을
파괴함으로써 항원을 변성시키는 경우가 그것이다. 예시적인 중요 항원으로 다당류같은 유기중합체(예를 들어
적어도 18개의 잔기를 가지는 다당류), 인다당류(phosphopolysaccharide), N-아세틸 치환된 아미노 당을 가진
다당류, 설펀화 슈가(sulfanylated sugar)를 가진 다당류, 그밖의 황산-변성(sulfate-modified)슈가, 인산-변
성(phosphate-modified)슈가, 폴리 알콜, 폴리 아미노산, 테이콘산, 및 지질다당류의 O 측쇄이다. 예시적인
중요 항원은 캡슐 유기 중합체를 포함하며, 여기엔 박테리아, 곰팡이, 기생충 및 바이러스 등의 미생물이 합성
하는 것과 일반적인 방법으로 생물학적 원천에서 채취한 것이 있다. 예시적인 중요 항원은 미생물 캡슐 유기
중합체를 포함하며, 여기에는 탄저균과 같은 바실러스 종(Wang and Lucas. Infect. Immun. 72(9): 5460-5463
(2004)), 폐렴연쇄상구균(Bentley et al. PLoS Genet. 2(3):e31, Epub (2006); Kolkman et al. J.
Biochemistry 123:937-945 (1998); and Kong et al. J. Med. Micorbiol. 54:351-356 (2005)), 쉬겔라(Zhao et
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공개특허 10-2009-0066272