(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel
(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel
(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
되지 않는다.그 예로는 티프테리아와 테타누스 톡신과 이들의 의학적으로 허용되는 톡소이드가 포함된다.다른<br />
가능한 수송단백질에는 CRM(cross-reacting material)이라 불리는 박테리아 톡신과 유사한 항원성을 가지는 단<br />
백질이 있다.본 발명의 수송단백질은 인간에게서 유래하지 않고 인간의 음식에 존재하지 않는 모든 단백질도 포<br />
함된다.<br />
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 고리-유사 구조를 형성하는 단백질은 PCMV를 만드는데 사용된다.이러한<br />
단백질에는 녹농균의 Hcp 단백질, 콜레라 톡신 B 서브유닛, 대장균의 이열성 엔테로톡신 및 쉬가-유사 톡신이<br />
있다.이러한 고리-유사 구조는 선형 다당류 사슬이 링 모양의 단백질 복합체를 관통하는 염주(beads on a<br />
string)형태를 형성할 수 있다.단백질이 크로스링크된 후에, 이러한 복합체는 매우 안정할 것으로 예측되었다.<br />
단백질의 구조적 데이터는 이러한 중앙 채널이 다당류 사슬이 쉽게 들어갈 수 있을 만큼 넓음을 보여준다.에를<br />
들어, Hcp1 헥사고리의 중앙 채널은 42 옹스트롬으로 5.5 옹스트롬의 다당류 사슬 몇개를 수용하기에 충분한 너<br />
비이다(Mougous et al., Science 3<strong>12</strong>(5779) 1526- 1530, (2006)).다른 한편, 단백질 고리는 다당류 주위를 둘<br />
러쌀 수도 있다(예를 들어, 특정 물리적 화학적 환경 하에서 자연적으로 링에 합쳐지는 모노머 수송단백질의 서<br />
브유닛으로부터).이러한 링 안에 합쳐져 들어갈 수 있는 모노머 단백질은 당업계에 공지되어 있으며, 뉴몰리신<br />
(Walker et al. Infect.. Immun. 55(5): 1184-1189 (<strong>19</strong>87); Kanclerski and Mollby, J. Clin. Microbiol.<br />
25(2):222-225 (<strong>19</strong>87)), 리스테리올리신 O(Kayal and Charbit. FEMS Microbiol. Rev. 30:514- 529 (2006);<br />
Mengaud et al. Infect. Immun. 55(<strong>12</strong>):3225-3227 (<strong>19</strong>87)), DNI, 안트락스 PA, Hcp1, 콜레라 톡신 B 서브유닛,<br />
쉬가 톡신 B 서브유닛, 편모 및 당업계에 알려진 많은 관련 단백질을 포함한다.<br />
또 다른 바람직한 구현예에 의하면, TLR(Toll-like receptor) 아고니스트가 수송단백질로 사용될 수 있다.TLR의<br />
활성화는 적합한 면역반응을 형성하는데 있어 중요하며, 친화력의 성숙, 아이소타입 스위치, 면역학적 기억에<br />
있어 핵심적 역할을 한다.콜레라균(Vibrio cholerae)의 편모(FLA)는 TLR 아고니스트이다.20 mg 이상의 FLA 단백<br />
질이 재조합 대장균으로부터 추출되었으며, 이는 IL-6 대식세포의 유도 분석에서 강력한 TLR 활성인자임이 밝혀<br />
졌다.뿐만 아니라, 잘 보존된 폐렴연쇄상구균의 단백질인 뉴몰리신 또한 TLR4를 활성화시키는 것으로 밝혀졌으<br />
며, 또한 방어항원이기도 하다.따라서, 이 단백질은 PCMV 수송단백질로 이용될 수 있다.<br />
더 나아가, 나이세리아 수막염균 등의 외막단백질(OMP)은 HIB 접합백신(Merck)의 수송단백질로 이용되며, 폐렴<br />
연쇄상구균의 총 박테리아 세포에서 추출한 단백질은 동물 감염 모델에서 적어도 부분적인 보호역할을 함아 밝<br />
혀졌다.본 발명의 바람직한 구현예에 있어서, 이러한 단백질 혼합물은 PCMV 수송단백질의 원천임이 밝혀졌다.<br />
바람직한 구현예에 따르면, PCMV 방법은적어도 2개의 라이신 잔기 또는 블록되지 않고 화학적 변형에 의해 크로<br />
스링크 할 수 있는 다른 잔기를 가지는 수송단백질이 사용된다. 또 다른 바람직한 구현예에 따르면, 수송단백<br />
질은 멀티머(예를 들어 적어도 5개의 서브유닛을 포함하는)이다. 바람직하게는, 멀티머는 호모멀티머이다.<br />
또 다른 구현예에 의하면, DNI는 사용전 해독이 필요없는 비독성 물질이므로 수송단백질로 사용된다. 나아가,<br />
DNI가 중요한 항원에 대한 면역반응 뿐 아니라탄저균에 대한 방어면역 반응도 유도하기 때문에 DNI의 사용은<br />
바람직하다. 또한 DNI는 내부에 설파이드 결합이 없다. 이러한 결합은 단백질을 변성시켜 에피토프를 파괴<br />
할 수도 있는 보로화수소 환원에 민감하다<br />
목적의 항원<br />
본 발명의 백신 조성물과 그 제조 및 투여 방법은 어떠한 중요 항원, 예를 들어 다당류, 폴리 알콜 또는 폴리<br />
아미노산에 대해서도 사용될 수 있다. 바람직하게는, 중요 항원은 백신의 제조 과정에서 일어나는 화학반응에<br />
의해 파괴되는 1차 그룹을 가지지 않는다. 예를 들어 보로화수소의 환원을 통해 항원의 다이설파이드 결합을<br />
파괴함으로써 항원을 변성시키는 경우가 그것이다. 예시적인 중요 항원으로 다당류같은 유기중합체(예를 들어<br />
적어도 18개의 잔기를 가지는 다당류), 인다당류(phosphopolysaccharide), N-아세틸 치환된 아미노 당을 가진<br />
다당류, 설펀화 슈가(sulfanylated sugar)를 가진 다당류, 그밖의 황산-변성(sulfate-modified)슈가, 인산-변<br />
성(phosphate-modified)슈가, 폴리 알콜, 폴리 아미노산, 테이콘산, 및 지질다당류의 O 측쇄이다. 예시적인<br />
중요 항원은 캡슐 유기 중합체를 포함하며, 여기엔 박테리아, 곰팡이, 기생충 및 바이러스 등의 미생물이 합성<br />
하는 것과 일반적인 방법으로 생물학적 원천에서 채취한 것이 있다. 예시적인 중요 항원은 미생물 캡슐 유기<br />
중합체를 포함하며, 여기에는 탄저균과 같은 바실러스 종(Wang and Lucas. Infect. Immun. 72(9): 5460-5463<br />
(2004)), 폐렴연쇄상구균(Bentley et al. PLoS Genet. 2(3):e31, Epub (2006); Kolkman et al. J.<br />
Biochemistry <strong>12</strong>3:937-945 (<strong>19</strong>98); and Kong et al. J. Med. Micorbiol. 54:351-356 (2005)), 쉬겔라(Zhao et<br />
- 27 -<br />
공개특허 10-2009-0066272