SodininkyStĖ ir darŽininkyStĖ 28(2)

1999; Litwińczuk, 2002). Duomenų apie juodavaisės aronijos regeneraciją ir transformacijąin vitro rasti nepavyko.Darbo tikslas – parengti juodavaisės aronijos regeneracijos in vitro sistemą, pritaikytąaugalams transformuoti.Tyrimo objektas, metodai ir sąlygos. Tyrimai atlikti Lietuvos sodininkystės irdaržininkystės instituto Augalų biotechnologijos laboratorijoje.Juodavaisės aronijos regeneracijos in vitro tyrimams buvo naudoti eksplantai– mikroūgliai, padauginti mikrovegetyviniu būdu in vitro, ir jų lapai bei augalų,išaugintų iš sėklų in vitro, sėklaskiltės ir hipokotiliai. Mikroūgliai, nupjovus lapus irišpjovus pažastinius pumpurus, buvo pažeisti adata, lapuose skalpeliu padaryti keturipjūviai. Lapai abaksialine arba adaksialine, o sėklaskiltės – tik abaksialine puse,bei mikroūgliai ir hipokotiliai buvo padėti ant MS (Murashige and Skoog, 1962)maitinamosios terpės, papildytos 0,3 µM naftilacto rūgšties (NAR) ir 10, 20, 40, 80,160 µM tidiazurono (TDZ) (regeneracijos sąlygoms nustatyti), 250, 500, 750, 1 000,1 200 mg l -1 cefotaksimo (agrobakterijai eliminuoti) bei 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40,45, 50 mg l -1 kanamicino (transformantų atrankai atlikti). Terpių pH 5,80. Eksplantaikultivuoti 12 savaičių: tamsoje ir kintamo apšvietimo sąlygomis esant 16 valandųšviesos (50 μM m -2 s -1 tankio fotonų srautas) periodui augalų auginimo kameroje.Rezultatai. Didžiausias mikroūglius regeneravusių lapų kiekis (33,33 %) buvogautas tuo atveju, kai jie, padėti abaksialine puse ant MS terpės su 0,3 µM NAR ir10 µM TDZ, buvo kultivuojami 6 savaites tamsoje, po to 6 savaites, esant 16 val.šviesos periodui (lentelė). Lapai, pasodinti ant regeneracijos terpės adaksialine puse,neregeneravo.Lentelė. Eksplanto padėties ant terpės, apšvietimo ir tidiazurono (TDZ) įtakaūglių iš juodavaisinės aronijos lapų regeneracijai in vitroTable. Influence of explant orientation on medium, light and TDZ on the regeneration ofaronia leaves in vitroTDZ priedasAddition ofTDZ, µMEksplantų regeneracijaExplant regeneration, %16 valandų šviesos periodas6 savaites tamsoje +12 savaičių16 valandų šviesos periodas 6 savaites12 weeks, 16 hour day period 6 weeks in the dark + 6 weeks 16 hour day period0 0* 0* 0**10 0 33,33 020 0 4,17 4,1740 0 29,17 080 4,17 8,33 4,17160 12,5 8,33 0R05 / LSD 053,78 7,17 2,77* lapai ant terpės padėti abaksialine puse; ** lapai ant terpės padėti adaksialine puse* leafs put on medium abaxial side; ** leafs put on medium adaxial sidePažeistus mikroūglius kultivuojant minėtomis sąlygomis, regeneravusių eksplantųbuvo 100 proc. (1 pav.).48