SodininkyStĖ ir darŽininkyStĖ 28(2)

LIETUVOS SODININKYSTĖS IR DARŽININKYSTĖS INSTITUTO IRLIETUVOS ŽEMĖS ŪKIO UNIVERSITETO MOKSLO DARBAISODININKYSTĖ IR DARŽININKYSTĖ. 2009. 28(2).Citokininų ir antibiotikų įtaka juodavaisės aronijosskirtingų eksplantų regeneracijai in vitroDalia Gelvonauskienė, Jurgita Vinskienė, Tadeušas Šikšnianas,Vidmantas Bendokas, Inga Stepulaitienė, Gražina Stanienė,Vidmantas StanysLietuvos sodininkystės ir daržininkystės institutas, Kauno g. 30, LT-54333 Babtai,Kauno r., el. paštas d.gelvonauskiene@lsdi.ltLietuvos sodininkystės ir daržininkystės instituto Augalų biotechnologijos laboratorijojeparengta juodavaisės aronijos (Aronia melanocarpa (Michx.) Elliot) regeneracijos invitro sistema, pritaikyta aronijos transformacijai Agrobacterium tumefaciens ir biobalistiniumetodais. Nustatyta, kad juodavaisės aronijos regeneracijai in vitro indukuoti tikslinganaudoti eksplantus – mikroūglius arba hipokotilius, išsiskiriančius didelėmis morfogenezėsin vitro potencijomis. Optimalios juodavaisės aronijos regeneracijos in vitro sąlygos: MS terpė(pH 5,80) su 0,3 µM NAR ir 10 µM TDZ priedu, regeneracijos indukcija 6 savaites tamsoje,po to 6 savaites esant 16 valandų šviesos periodui per parą, apšvietimas 50 μM m -2 s -1 tankiofotonų srautu. Juodavaisės aronijos transformuotiems regenerantams identifikuoti selektyvausagento – kanamicino – mažiausia efektyvi koncentracija terpėje – 15 mg l -1 , o agrobakterijaieliminuoti tinkamiausia 250 arba 500 mg l -1 cefotaksimo koncentracija terpėje.Reikšminiai žodžiai: cefotaksimas, eksplantas, juodavaisė aronija, in vitro, kanamicinas,regeneracija, tidiazuronas.Įvadas. Siekiant sukurti naujos kokybės augalus, be hibridizacijos metodo,vis plačiau taikoma genų inžinerija. Tai moderni priemonė augalams, ypač dauginamiemsvegetatyviniu būdu, transformuoti. Literatūroje pateikta informacijos apiesodo augalų (obelų, kriaušių, vyšnių, trešnių, persikų, aktinidijų) transformaciją (Zhuir kt., 2001; Lee ir kt., 2003; Vardja, Vardja, 2004; Flachowsky, Hanke, 2006; Nogaty,2007). Atsižvelgiant į keliamus tikslus, kuriamos augalų regeneracijos, transformacijos,dauginimo, rizogenezės in vitro sistemos. Jos yra specifinės kiekvienai augalų rūšiaiir net veislei. Viena svarbiausių prielaidų transformuoti augalus yra transformuojamoaugalo regeneracijos in vitro sistemos sukūrimas. Augalų regeneraciją in vitrosąlygoja genotipas, eksplantas, jų kultivavimo sąlygos, terpės sudėtis, fitohormonų,antibiotikų koncentracijos ir kt. (Liu, Pijut, 2008). Lietuvos sodininkystės ir daržininkystėsinstitute genų inžinerijos metodais siekiama transformuoti juodavaisę aroniją,norint padidinti antocianinų kiekį ir jų stabilumą vaisiuose. Literatūroje aptinkamaduomenų apie juodavaisės aronijos mikrodauginimo in vitro sistemą (Staniene ir kt.,47