Ricordare il futuro - Universita' degli Studi "Magna Graecia"

UNITÀ DI MEDICINA LEGALE
Coordinatore dell'Unità: Pietrantonio Ricci (Professore Ordinario di Medicina Legale, SSD MED/43)
Componenti dell'Unità di ricerca: Giulio Di Mizio (ricercatore, professore aggregato di medicina legale,
SSD/Med 43) Collaborazioni: Ciro Di Nunzio, Overlab, Casera, Luciano Garofano, RIS CC, Parma
Estrazione del DNA da resti umani putrefatti e/o non completamente scheletrizzati. Dati iniziali
sulla procedura analitica adottata
L'estrazione del DNA da frammenti ossei può essere ottenuta con più sistemi che sono relativi al diverso
modo con cui i resti umani sono stati esposti agli agenti ambientali. Lo studio in corso prevede l'adozione
di una nuova metodica che prevede il taglio di un frammento di dialisi femorale della lunghezza di cm
4 o, l'allontanamento dei tessuti molli interni ed esterni, la rimozione degli interferenti chimici mediante
estrazione con solventi organici, la polverizzazione con il TissueLyser associato al Grinding Jar set e la
successiva demineralizzazione di 0, 5 gr di polvere di osso con una soluzione di EDTA 0,5 M pH 8, 0;
l'estrazione fenolo - cloroformio, la sospensione dell'estratto in acqua pentadistillata ed infine la
purificazione con il prodotto QIAamp DNA Mini Kit e la sospensione dell'estratto purificato in 60 Ul di
tampone TAE. La qualità del DNA estratto è determinata mediante corsa elettroforetica in gel di agarosio
al 2% P/V in presenza di bromuro d'etidio. La quantità di DNA contenuto negli estratti è determinata con
la tecnica REAL-TIME PCR, utilizzando il Kit Human Quantifiler. I profili individuali sono ottenuti con
amplificazione multiplex, utilizzando i kit identifiler e/o Power Plex 16 e successiva separazione in
elettroforesi capillare. La nostra tecnica è stata adottata con successo in 32 casi giudiziari. La metodica e
le osservazioni sono state oggetto di pubblicazioni scientifiche e di comunicazioni ai congressi della
società italiana di medicina legale e di emogenetica forense.