Ricordare il futuro - Universita' degli Studi "Magna Graecia"

Inoltre, dati presenti in letteratura indicano una stabilizzazione della proteina MLH1 in seguito a danno
provocato da cisplatino o adriamicina, ma il meccanismo molecolare non è ancora noto. D’altro canto,
MLH1 e BRCA1 sono entrambi coinvolti nei meccanismi di riparo del DNA, per questo motivo stiamo
esplorando il possibile ruolo della proteina BRCA1 nella stabilizzazione della proteina MLH1 in seguito a
danno prodotto da adriamicina.
Recentemente abbiamo anche analizzato i profili di espressione proteica da siero, attraverso approcci di
proteomica e spettrometria di massa, in soggetti affetti da Poliposi Adenomatosa del colon (FAP). I nostri
risultati hanno evidenziato la presenza di alcune proteine sieriche capaci di differenziare stati evolutivi e/o
forme cliniche/anatomo-patologiche diverse in pazienti FAP.
Regolazione trascrizionale del gene che codifica per la subunità H della ferritina umana
Il nostro gruppo, inoltre, da alcuni anni si occupa dell’analisi strutturale e funzionale della regione
promotrice della trascrizione del gene della ferritina H. Il promotore del gene codificante per le subunità
H della ferritina umana consiste di circa 150 bp nel quale sono localizzati due elementi in cis. L'elemento
prossimale in posizione -62 è una CCAAT box invertita ed è riconosciuto dalla proteina trimerica NF-Y,
l'elemento distale in posizione -132 è riconosciuto dal fattore trascrizionale Sp1.
Abbiamo dimostrato che la subunità B di NF-Y lega il dominio centrale della molecola coattivatrice p300
sia in vivo che in vitro e che il binding fra NF-Y e p300 viene potenziato dalla proteina chinasi A (PKA)
cAMP dipendente, migliorando, di conseguenza, l’efficienza trascrizionale di geni NFY-dipendenti.
Inoltre, abbiamo dimostrato che p300 a sua volta, richiama sul promotore H c-Jun che agisce
incrementando la trascrizione ed EIA che la regola negativamente. Oltre ad E1A ed a c-Jun, abbiamo
verificato che il complesso NF-Y/p300 veicola sul promotore H anche l’acetilasi degli istoni pCAF. Il
modello sperimentale da noi proposto è che p300 funge da “àncora” molecolare reclutando sul promotore
attivatori o inibitori della trascrizione. Dati disponibili in letteratura dimostrano che la porzione N-
terminale del coattivatore p300 prende contatto con la proteina p53. Sulla base di queste informazioni,
abbiamo verificato che questa proteina è reclutata sul promotore dove è già posizionato il complesso
NFY/p300 ed abbiamo dimostrato, che p53 quando è overespressa o attivata da doxorubicina è in grado
di modulare negativamente la trascrizione del gene H.
La ridotta disponibilità di catena H conseguente alla riduzione della efficienza con cui il gene è trascritto
in seguito alla attivazione di p53 priva la cellula di uno dei principali meccanismi di difesa contro i danni
prodotti dal ferro in presenza dei radicali liberi dell’ossigeno. Il deficit di ferritina potrebbe svolgere un
ruolo fondamentale nel danno ischemico dei cardiomiociti, sia in caso di ischemia prolungata che in caso
di ischemia breve. Siamo particolarmente interessati a verificare il ruolo dovuto al deficit di ferritina in
caso di disfunzione contrattile prolungata (stunning).
Studi recenti hanno evidenziato elevati livelli di ferritina L nella progressione del melanoma, nessun dato
invece è riportato circa il ruolo della ferritina H. I primi dati sperimentali, da noi prodotti, dimostrano
elevati livelli di ferritina H in cellule metastatiche paragonate alle cellule di tessuto primario. Stiamo
sviluppando un sistema che blocca l’espressione della H ferritina in cellule metastatiche per verificare il
ruolo della ferritina nella progressione del melanoma.