Cromatografia in fase liquida - Dipartimento di Chimica
Cromatografia in fase liquida - Dipartimento di Chimica Cromatografia in fase liquida - Dipartimento di Chimica
TEMPI DI LAVORO E CAPACITA’I tempi di lavoro dipendono dall'affinità delle sostanze da separareper la fase stazionaria e dalla velocità lineare (o dal flusso) della fasemobileNella pratica, per le colonne di più largo impiego (1÷4 mm ID) si operacon flussi di 0,5÷2 mL/min, in condizioni isocratiche (per laseparazione di pochi componenti) oppure in gradiente (per laseparazione di campioni complessi).La capacità di carico di una colonna per HPLC varia sensibilmentesecondo che sia di tipo analitico o preparativo.Nel primo caso si possono iniettare di solito da poche decine fino adalcune centinaia di nanogrammi di sostanza, mentre nel secondo siarriva fino a 500 mg.
CARATTERISTICHE GENERALI DELLE FASIE’ la coppia fase stazionaria/fase mobile a decidere del successodi una separazioneQualunque scelta dovrà dunque tenere conto di queste duevariabili oltre che delle caratteristiche geometriche dellacolonna.FASE STAZIONARIAIn HPLC si usano riempimenti a granulometria nettamente piùfine rispetto alla LPC. Ciò consente di migliorare le prestazioni ein particolare di agire sull'efficienza della separazione.
- Page 2 and 3: CLASSIFICAZIONE DELLETECNICHE HPLC
- Page 4 and 5: TEMPO E VOLUME DI RITENZIONEt’ R=
- Page 6 and 7: SELETTIVITÀLa selettività, defini
- Page 8 and 9: Condizioni per minimizzare H:La vel
- Page 12: I riempimenti sono di due tipi:•p
TEMPI DI LAVORO E CAPACITA’I tempi <strong>di</strong> lavoro <strong>di</strong>pendono dall'aff<strong>in</strong>ità delle sostanze da separareper la <strong>fase</strong> stazionaria e dalla velocità l<strong>in</strong>eare (o dal flusso) della <strong>fase</strong>mobileNella pratica, per le colonne <strong>di</strong> più largo impiego (1÷4 mm ID) si operacon flussi <strong>di</strong> 0,5÷2 mL/m<strong>in</strong>, <strong>in</strong> con<strong>di</strong>zioni isocratiche (per laseparazione <strong>di</strong> pochi componenti) oppure <strong>in</strong> gra<strong>di</strong>ente (per laseparazione <strong>di</strong> campioni complessi).La capacità <strong>di</strong> carico <strong>di</strong> una colonna per HPLC varia sensibilmentesecondo che sia <strong>di</strong> tipo analitico o preparativo.Nel primo caso si possono <strong>in</strong>iettare <strong>di</strong> solito da poche dec<strong>in</strong>e f<strong>in</strong>o adalcune cent<strong>in</strong>aia <strong>di</strong> nanogrammi <strong>di</strong> sostanza, mentre nel secondo siarriva f<strong>in</strong>o a 500 mg.
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