Gli anticorpi nucleolari nella diagnosi della sclerosi ... - Simel

The nature of the vascular dysfunction in SSC

Vascular dysfunction is shared by several ofthe manifestations of SSc …

Classificazione♦ Cutanea localizzataMorfeaMorfea generalizzataScleroderma lineare♦ Sclerosi sistemicacutanea limitata (lcSSc)cutanea diffusa (dcSSc)

Hesselstrand. Rheumatology 2003

DIFFUSE (dcSSc)LIMITED (lcSSc)Anti-Topo IAnti-RNA pol IIICENP-BAnti-U3snRNPAnti-Th/ToAnti-U1RNPPM-sclOVERLAPMedsger-Steen 1996

Hesselstrand. Rheumatology 2003

anti-Topoisomerasi I (Scl-70)anti-Centromero (ACA)ConfermaCIEIB/IBELISA

AutoantibodyPrevalence inSScClinical associationsPrognosisAnti-U3-RNP/AFA~4% Caucasians16-22% Africandescent(HLA-DQB1 alleles)*dsSSCMyositis, pulmunaryhypertension, renaldiseaseYounger patientswith greaterinternal organinvolvementAnti-RNAP I/III ~20%Anti-PM-Scl ~3%Anti-Th/To ~2-5%(HLA-DQB1 alleles)(HLA-DRB1; DQA1;DQB1 alleles)(HLA-DRB1 alleles)*dsSScRigh heart failure,PAH, renalinvolvement*lcSSc*PM/SSc overlap*lcSSc↑ bowel involvement?↑ PAH?IncreasedmortalityBenign/chroniccorse with betterresponse tosteroidWorse prognosisKT Ho & JD Reveille. Arthritis Res Therapy 2002 (modified)

snoRNP macromolecular complexesU3snoRNP/fibrillarinBox H/ACA snoRNP

Fibrillarin antigen34 kDaHeLa cellsHeLa apoptotic cellsCortesia della dott.ssaClaudia Alpini (PV)

RNA polymerasesKuwana M et al. Arthritis Rheum 2002Immunodominant epitope of RNAP III(aa residues 891-1020 on RPC 155 the largest subunit of RNAP III)

Core exosome proteinsPM/Scl Ab reactivityPM/Scl 100 = 94-100%PM/Scl 75 = 50-60%Immunodominant epitope PM/Scl 100 aa 231-245Other proteins = low percentage Brouwer R. et al. Arthritis Res 2000

Th/ToRibonuclease MRP and ribonuclease P complexesHouser-Scott F. et.al. PNAS 2002;99:2684-2689

Patern nucleolari (ANoA) (8-43% delle SSc)OmogeneoClumpySpeckledDots

Tecniche di determinazione AFA, RNAP, PM/Scl, Th/ToIPDID, IBELISA

SE93%SP99%SE91%SE100%SP99%Clinical SE 17%Clinical SP 98%

18.3%Clin Exp Rheumatol 2007

Anti-Fibrillarina (AFA)Anti-RNA Pol IIIELISA PHADIAAntigeni ricombinantiAnti-PM/SclFutura applicazione in sistema EliA

CasisticaMorfea 250 Sclerodermie (Topo Ie ACA negative)dcSSc 19lcSSc 25Overlap (SSc/PM) 4Controlli52 Sclerodermie (32 ACA Pos; 10 Topo I pos)50 Lupus eritematoso sistemico (LES)50 Artrite reumatoide (AR)

Quadri fluoroscopici nelle SclerodermieTopo I e ACA negative3 NegativiANoA 2947 PositiviANoA + Nucleoplasmatico 8Specked 10

anti-fibrillarinAU/mL50454035302520151050SSc - SSc + SLE ARcutoff SE SP10 U/mL 22% 91.9%12 U/mL 18% 95.0%15 U/mL 10% 98.2%c.o. 98.2% SPc.o. 95.0% SPc.o. 91.9% SP

Quadri fluoroscopici in sieri positivi per anti-fibrillarina

anti-RNA polymerase IIIUA/mL65605550454035302520151050SSc - SSc + SLE ARcutoff SE SP10 U/mL 16% 97.3%13 U/mL 14% 98.2%16 U/mL 8% 99.2%c.o 99.2% SPc.o 98.2% SPc.o. 97.3% SP

Quadri fluoroscopici di sieri positivi per RNA pol III

anti-PM-SclUA/mL1201101009080706050403020100= Overlap SSc/PMSSc - SSc + SLE ARcutoff SE SP10 U/mL 8% 99.1%13 U/mL 6% 100%c.o.100% SPc.o. 99.1% SP

Quadri fluoroscopici di sieri positivi per PM-Scl

Positività anti-Fibrillarina, anti-RNA polimerasi III e anti-PM-Scl in sieri di pazienti con sclerodermia negativi peranti-Topo I e ACAanti-Fibrillarinaanti- RNA polimerasi IIIanti-PM-SclTotale9/50(18%)8/50(16%)4/50(8%)21/50(42%)SP95.0%SP97.3%SP99.1%Positività in ANoA+consecutivi in lab17/116 (14.6%)

Caratteristiche cliniche e pattern fluoroscopico dei pazientipositivi per anti-fibrillarina, anti-RNA pol III e anti-PM-sclAnticorpo Pattern IFI Classific. Polm. Cuore Rene Gastr. Musc.fibrillarina9 AnoA5 dcSSc3 lcSSc1 morfea4 FP(1IP)- - 3 -4 SpRNA polIII3 ANoA +nucleopl.6 dcSSc2 lcSSc4 FP 2 - 4 -1 ANoAPM-Scl3 ANoA1 ANoA +nucleopl.3 OverlapSSc/PM1 dcSSc2 FP - - 1 4

Conclusioni• I nuovi sistemi ELISA Phadia per la determinazione di AFA,RNAP e PM/Scl rappresentano un importante progressodiagnostico nella SSc• accessibili a tutti i laboratori• permettono la definizione autoanticorpale in quadrifluoroscopici che sono suggestivi per tali positività o inpazienti con sospetto clinico di SSc e negativi per ACA eTopo I• La diffusione su larga scala di tali diagnosticheautoanticorpali permetterà di avere ampie casistiche su cuivalutare in maniera più sistematica e precisa il loro ruolodiagnostico e prognostico

La camera pinta (particolare) – Rocca Albornoz

Ringraziamenti• dott.ssa Gabriella Morozzi (Siena)• dott.ssa Marilina Tampoia (Bari)• dott.ssa Claudia Alpini (Pavia)• dott. Ignazio Brusca (Palermo)• dott. Nicola Bizzaro (Tolmezzo)• dott. Wolfgang Papisch (Phadia, Friburgo)