bibliografia - Università degli Studi di Ferrara

A) Parte sperimentaleI componenti dei terreni di coltura quali glucosio, estratto di lievito, peptone esono stati acquistati dalla ditta Oxoid. I sali KH 2 PO 4 , MgSO 4 , NaHCO 3 ,(NH 4 ) 2 SO 4 e Na 2 SO 4 sono prodotti acquistati presso la ditta Carlo Erba. 3-Idrossi-2-butanone (acetoino), 2,3-butandione (diacetile) e 3,4-esandione sono prodottiFluka. Le cellule batteriche sono state lisate usando una “French-press celldisrupter” della Thermo Electron Corporation. Le lastre per le analisicromatografiche su strato sottile sono del tipo Kiesegel 60F 254 Merck e per larivelazione dei prodotti è stata utilizzata una miscela di acido fosfomolibdico(H 3 [P(Mo 3 O 10 ) 4 ]), acido solforico ed acetico in proporzioni 2.5 : 2.5 : 5. Per leanalisi gascromatografiche è stato utilizzato uno strumento Carlo Erba 6000 GCdotato di rilevatore a ionizzazione di fiamma (FID) ed equipaggiato con colonnacapillare chirale (25m x 0.25 mm) con fase stazionaria composta da dimetil n-pentil-β-ciclodestrine su OV 1701 fornita dalla ditta Mega s.n.c. Come gas ditrasporto è stato utilizzato He alla pressione di 68 kPa, la temperaturadell’iniettore è stata impostata a 200°C e quella del rilevatore a 250°C.Per l’ultrafiltrazione sono stati utilizzati filtri Amicon Ultra-4 della Millipor concut-off di 10 KDa. Per la preparazione del gel denaturante SDS-PAGE è statoutilizzato il protocollo e i componenti contenuti nell’SDS Gel Preparation Kit08091 fornito dalla Fluka. Come standard di riferimento per il peso molecolareproteico è stato utilizzato S8445-1VL (Sigmamarker, wide range) fornito dallaSigma-Aldrich che contiene Miosina (200 kDa), -galattosidasi (116 kDa), -fosforilasi da muscolo di coniglio (97 kDa), albumina da siero bovino (66 kDa),ovalbumina (45 kDa) e anidrasi carbonica (29 kDa).Il Bacillus licheniformis DSM 13 è conservato ad una temperatura di 4° C suterreno solido agarizzato Plate Count Agar.190