bibliografia - Università degli Studi di Ferrara

A) Parte sperimentaleSintesi di 2,3-ottandione 81-Ottin-3-olo 6 (1.0 g, 7.9 mmoli) viene aggiunto goccia a goccia ad unasoluzione di HgO (6.9 g, 32 mmoli) e H 2 SO 4 (1.7 ml) in H 2 O (50 ml) e distillatoin corrente di vapore. Il distillato viene saturato con NaCl e la fase organicaseparata mentre la fase acquosa viene estratta nuovamente con etere etilico (2 x 30ml). Gli estratti organici riuniti vengono anidrificati con Na 2 SO 4 anidro edevaporati ottenendo il 3-idrossiottan-2-one 7, come olio giallo (1.02 g, 7.1 mmoli,90%): 1 H NMR (CDCl 3 ) 4.20 (t, J = 6 Hz, 1H), 2.20 (s, 3H), 1.80 (br s, 1H,OH), 1.60-1.40 (m, 2H), 1.40-1.20 (m, 6H), 0.90 (t, J = 7 Hz, 3H); 13 C NMR(CDCl 3 ) 210.0, 76.8, 33.4, 31.6, 25.1, 24.3, 22.4, 13.9. Al composto 7 (1.0 g, 6.9mmoli) sciolto in CH 2 Cl 2 (50 ml) viene aggiunto piridinio clorocromato (4.3 g, 20mmoli) e si lascia sotto agitazione per 3 h a temperatura ambiente. Si diluisce lareazione con etere etilico (200 ml) e la miscela viene filtrata su una colonna di geldi silice (4x6 cm) usando come eluente etere etilico. Dopo evaporazione si ottiene2,3-ottandione 8 (0.93 g, 6.0 mmoli, 85%): 1 H NMR (CDCl 3 ) 2.70 (t, J = 7 Hz,2H), 2.15 (s, 3H), 1.65-1.55 (m, 2H), 1.40-1.20 (m, 6H), 0.90 (t, J = 6 Hz, 3H);13 C NMR (CDCl 3 ) 199.5, 197.6, 35.6, 31.2, 23.7, 22.7, 2.3, 13.8.Sintesi di 3-idrossi-3-metil-2,4-nonandione 5Il composto 8 (0,94 g, 2.0 mmoli) viene aggiunto ad una soluzione contenentetiammina difosfato (14 mg, 30 moli), MgSO 4 (10 mg, 80 moli) in tamponefosfato 50 mM a pH 6.5 (50 ml). Alla soluzione si aggiunge il lisato cellulare,ottenuto con trattamento ad alta pressione (Frech-press, 1380 bar) ecentrifugazione della sospensione (10.000 rpm, 10 minuti), di B. licheniformisDSM13 (3.5 g) in tampone fosfato 50 mM a pH 6.5 (50 ml). La miscela vieneposta sotto agitazione a 30°C per 12 h, poi scaldata a 70°C per 1 h ed infinecentrifugata (10.000 rpm, 10 minuti). Il supernatante viene estratto con acetato dietile (3 x 30 ml). Gli estratti organici riuniti vengono lavati con una soluzione175