Vol. 79, supplement to no. 2, March-April 1994 - Supplements

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DISCUTIAMONE INSIEMETRISOMIA 8 NELLA LEUCEMIA MIELOMONOCITICA CRONICA VALUTA-TA CON L’IBRIDIZZAZIONE IN SITU NON RADIOATTIVAMARIO SESSAREGO, GIUSEPPINA FUGAZZA, ROBERTO BRUZZONE, FRANCO PATRONEDipartimento di Medicina Interna, Università di GenovaLe sindromi mielodisplastiche (MDS) sono un gruppo di patologie clonali caratterizzate daemopoiesi inefficace con cellularità midollare elevata e pancitopenia periferica. La natura clonaledelle MDS è stata dimostrata con diverse modalità (citogenetica, isoenzimi della G6PD,analisi di RFLP, ecc.); tuttavia è ancora oggetto di discussione se il clone abnorme tragga origineda una stem cell totipotente o se l’evento mutazionale possa coinvolgere un progenitore giàcommitted.Noi abbiamo analizzato 6 controlli e 3 casi di leucemia mielomonocitica cronica (LMMC)con trisomia 8 (+8), con la tecnica della FISH applicata su cellule midollari (metafasi e nucleiin interfase) e su strisci di sangue periferico, preparati in modo tale da poter confrontare lamorfologia e la presenza di 2 o 3 cromosomi 8.La +8 è risultata essere presente nel 92, 70 e 60% rispettivamente con la citogenetica sumetafasi di cellule midollari. Tale percentuale è stata sostanzialmente confermata con la FISHanalizzando sia metafasi che nuclei in interfase (500 per caso). I preparati di sangue perifericosono fissati con metanolo e colorati con Giemsa, montati in tampone fosfato; vengono fotografatialcuni campi significativi e registrate le coordinate; sono poi trattati per la FISH (utilizzando-8), ma non controcolorati con lo ioduro di propidio. Vengono poi riesaminate le celluleosservate in Giemsa. Sono state analizzate 40, 58 e 62 cellule per ciascun caso.I risultati possono essere così sintetizzati:1. i linfociti sono sempre risultati disomici;2. neutrofili e monociti possono essere disomici o trisomici 8;3. morfologicamente non sono evidenti differenze fra cellule con 2 o 3 cromosomi 8. Quindila +8 non ostacola una normale differenziazione cellulare sino a neutrofilo e monocitamaturo;4. fra neutrofili e monociti non sono state osservate diverse percentuali di +8.In conclusione quindi questi dati suggeriscono che se è vero che le SMD sono una stem celldisease, l’acquisizione della +8 avviene a carico di una cellula committed in senso mielomonocitario.22
DISCUTIAMONE INSIEMELA TRISOMIA 7 CARATTERIZZA UNA SOTTOPOPOLAZIONE DI LINFO-CITI UMANI CHE INFILTRANO I TUMORI RENALIPAOLA DAL CINCentre for Human Genetics, Catholic University of Leuven, BelgiumL’analisi citogenetica ha dimostrato la presenza di anomalie cromosomiche in quasi tutti itipi istologici di tumore renale. Anomalie cromosomiche specifiche sono associate e distinguonodue particolari tipi istologici di carcinoma renale, il carcinoma papillare ed quello nonpapillare.Tuttavia, è possibile incontrare in entrambi i tipi di carcinoma cloni cellulari caratterizzatiesclusivamente dalla presenza di trisomia 7. La presenza di questo clone è rilevabile anche incampioni cellulari ottenuti dal tessuto sano circondante il tumore.Al fine di una identificazione del tipo cellulare recante la trisomia 7 nel tumori renali, abbiamoeseguito una ibridazione in situ non-radioattiva su sezioni istologiche, mettendo in evidenzauna popolazione di piccole cellule mononucleate a morfologia linfocitaria con tresegnali, un dato indicativo della presenza della trisomia 7 nelle cellule infiammatorie infiltrantiil tumore.Studiando mediante FISH una popolazione cellulare arricchita mediante separazione suFicoll o mediante separazione immunomagnetica con anticorpi anti-CD3 ed anti-CD4, abbiamopotuto documentare come la gran parte di queste cellule presentasse la trisomia 7.La prova finale della natura linfocitaria delle cellule recanti trisomia 7 nei pazienti affetti datumore renale è derivata da esperimenti di doppia marcatura del fenotipo di membrana conanticorpi anti CD4 e colorazione nucleare mediante FISH.Linfociti CD4 + con trisomia 7 sono stati anche rinvenuti in sospensioni cellulari ottenute datessuto timico normale.Questi dati indicano la presenza di un fenomeno biologico di significato ignoto per cui unaanomalia cromosomica numerica rappresenterebbe un fenomeno associato alle normali difesedell’organismo contro i tumori renali. In alternativa, la trisomia 7 potrebbe rappresentare unsegnale di sofferenza cellulare in seguito alla secrezione da parte delle cellule tumorali di citochine.23
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