Working Paper of Public Health Volume 2012 - Azienda Ospedaliera ...
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Azienda Ospedaliera Nazionale“SS. Antonio e Biagio e Cesare Arrigo”Working Paper of Public Healthnr. 15/2012I FAEE si formano nel duodeno e nel circolo in presenza di etanolo. Nel sangue sonoveicolati all’albumina o alle lipoproteine e possono essere trasferiti tra i diversi compartilipidici. L’albumina causa una rapida secrezione di FAEE dalle cellule di epatoblastomaHpG2 in cultura, mentre le lipoproteine attivano sia la sintesi sia la liberazione di FAEE(Hasaba et al. 2001).La loro misura richiede una strumentazione molto complessa (GC-MS o LC-MS) (Pragst etal. 2001), grande esperienza in campo cromatografico, patrimonio questo di laboratorispecializzati.Sono misurabili nel sangue, nei capelli e in diversi organi quali fegato, pancreas, cuore edencefalo e questo ha suggerito l’ipotesi che essi possano giocare un ruolo diretto nell’effettotossico dell’alcol sugli organi (Bird et al. 1996; Laposata et al. 1996; Laposata et al. 1998;Vanlaufen et al. 2007; Doyle et al.1996; Borucki et al. 2007). La curva di eliminazione èsimile a quella dell’etanolo, con tempi di eliminazione più prolungati. Livelli ematici diFAEE sono rilevabili nel siero anche 24 ore dopo l’assunzione di alcol (Sodeberg et al. 2003)e nel caso di abuso cronico anche dopo 4 giorni. Sono stati proposti anche per individuarebevitori occasionali di quantità smodate di alcol (binge drinking) (Wurst et al. 2004).Una limitazione potrebbe essere rappresentata dal fatto che non è ancora noto quanto alcol equali modalità di assunzione sono necessarie per la loro formazione.Nella diagnosi di abuso alcolico cronico, così come nel monitoraggio dell’astinenza, i FAEEsono marcatori promettenti se determinati nel capello, infatti le curve ROC nel capellopossono distinguere gli astemi, dai bevitori occasionali e i forti bevitori dagli alcolisti(Laposata et al. 1996, Yegles et al. 2004; Wurst et al. 2008).Essi possono essere determinati anche dopo due mesi di astinenza (Wurst et al. 2008a), percui questa pratica potrebbe essere utile nel monitorare le donne in gravidanza (Morini et al.2008) e gli eventuali autori di reati sotto l’influenza dell’alcol (Bakdash et al. 2010).L’uso di prodotti per la cura dei capelli influenza il dosaggio dei FAEE nel senso che sonoprobabili risultati falsamente positivi, mentre l’incorporazione non dipende dal colore delcapello.La SoTH ha proposto la soglia di 0,5 ng/mg di capelli nei 3 cm più vicini alla radice comesomma dei seguenti quattro esteri: etilmiristato, etilpalmitato, etiloleato ed etilstearato(sensibilità 90%, specificità 90%) (Society of Hair Testing, 2011), anche se nel capello nesono stati isolati almeno quindici.11
Azienda Ospedaliera Nazionale“SS. Antonio e Biagio e Cesare Arrigo”Working Paper of Public Healthnr. 15/2012La determinazione dei FAEE é stata recentemente eseguita anche nel meconio al fine dimonitorare un’eventuale esposizione del feto all’alcol ( Bakdash et al. 2010).7. Fosfatidiletanolo (PEth)Questo nome è un termine generico per indicare un gruppo di fosfolipidi che si formano dallafosfatidilcolina in presenza di etanolo (Gustavsson et al. 1987; Aradottir et al. 2006).Normalmente la fosfatidilcolina si trasforma in diversi acidi fosfatidici per opera dell'enzimafosfolipasi D, ma in presenza di etanolo le membrane cellulari alterate portano allaformazione di PEth che può quindi essere utilizzato come marcatore specifico di uso di alcol(Gunnarsson et al. 1998).Da un punto di vista chimico la molecola di PEth è costituita da un gruppo di fosfoetanolo cuisono legati due acidi grassi a lunga catena. Questi possono essere diversi per cui si hannoPEth diversi, le forma quantitativamente più importante è il PEth16:0/18:1 che contiene unresiduo di acido oleico (16 atomi di carbonio) e uno di acido palmitico (18 atomi dicarbonio); il numero 0 e il numero 1 indicano rispettivamente che l’acido oleico non ha doppilegami nella sua catena, mentre l’acido palmitico ne ha 1.La prima tecnica utilizzata per il dosaggio del PEth – l’HPLC con rivelatore evaporative lightscattering (ESLD) - misurava il PEth totale (Aradottir et al. 2005; Helander at al. 2009a).Per la determinazione delle diverse specie chimiche del PEth recentemente sono stati messi apunto metodi in LC-MS e LC-MS/MS su sangue intero dopo estrazione dalle membranecellulari (Nalesso et al. 2011; Zheng et al. 2011).La complessità dell’analisi e della strumentazione non lo rende di facile esecuzione neilaboratori di routine, anche se alcune semplificazioni sono state proposte (Helander 2011).La famiglia del PEth comprende molte specie diverse che probabilmente variano anche infunzione dell’alimentazione, tuttavia è stato dimostrato che la somma delle forme PEth16:0/18:1 e PEth 16:0/18:2 correla meglio con il PEth totale piuttosto che le singole formeprese singolarmente, questo potrebbe significare che le due forme insieme rappresentano lamaggior parte del PEth presente nel sangue (Nalesso et al. 2011; Zheng et al. 2011).L’emivita del PEth è di circa 4 giorni nel sangue e riflette il consumo delle ultime settimane.La sua concentrazione è dose dipendente ma con molta variabilità interindividuale (Nalessoet al. 2011) assunzioni occasionali di alcol non portano a concentrazioni di PEth misurabile inHPLC, mentre l’uso della LC-MS, tecnica analitica molto sensibile, ha permesso di rilevarela positività del PEth in almeno un terzo dei donatori (Helander 2011). Sulla base di questi12
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<strong>Azienda</strong> <strong>Ospedaliera</strong> Nazionale“SS. Antonio e Biagio e Cesare Arrigo”<strong>Working</strong> <strong>Paper</strong> <strong>of</strong> <strong>Public</strong> <strong>Health</strong>nr. 15/<strong>2012</strong>La determinazione dei FAEE é stata recentemente eseguita anche nel meconio al fine dimonitorare un’eventuale esposizione del feto all’alcol ( Bakdash et al. 2010).7. Fosfatidiletanolo (PEth)Questo nome è un termine generico per indicare un gruppo di fosfolipidi che si formano dallafosfatidilcolina in presenza di etanolo (Gustavsson et al. 1987; Aradottir et al. 2006).Normalmente la fosfatidilcolina si trasforma in diversi acidi fosfatidici per opera dell'enzimafosfolipasi D, ma in presenza di etanolo le membrane cellulari alterate portano allaformazione di PEth che può quindi essere utilizzato come marcatore specifico di uso di alcol(Gunnarsson et al. 1998).Da un punto di vista chimico la molecola di PEth è costituita da un gruppo di fosfoetanolo cuisono legati due acidi grassi a lunga catena. Questi possono essere diversi per cui si hannoPEth diversi, le forma quantitativamente più importante è il PEth16:0/18:1 che contiene unresiduo di acido oleico (16 atomi di carbonio) e uno di acido palmitico (18 atomi dicarbonio); il numero 0 e il numero 1 indicano rispettivamente che l’acido oleico non ha doppilegami nella sua catena, mentre l’acido palmitico ne ha 1.La prima tecnica utilizzata per il dosaggio del PEth – l’HPLC con rivelatore evaporative lightscattering (ESLD) - misurava il PEth totale (Aradottir et al. 2005; Helander at al. 2009a).Per la determinazione delle diverse specie chimiche del PEth recentemente sono stati messi apunto metodi in LC-MS e LC-MS/MS su sangue intero dopo estrazione dalle membranecellulari (Nalesso et al. 2011; Zheng et al. 2011).La complessità dell’analisi e della strumentazione non lo rende di facile esecuzione neilaboratori di routine, anche se alcune semplificazioni sono state proposte (Helander 2011).La famiglia del PEth comprende molte specie diverse che probabilmente variano anche infunzione dell’alimentazione, tuttavia è stato dimostrato che la somma delle forme PEth16:0/18:1 e PEth 16:0/18:2 correla meglio con il PEth totale piuttosto che le singole formeprese singolarmente, questo potrebbe significare che le due forme insieme rappresentano lamaggior parte del PEth presente nel sangue (Nalesso et al. 2011; Zheng et al. 2011).L’emivita del PEth è di circa 4 giorni nel sangue e riflette il consumo delle ultime settimane.La sua concentrazione è dose dipendente ma con molta variabilità interindividuale (Nalessoet al. 2011) assunzioni occasionali di alcol non portano a concentrazioni di PEth misurabile inHPLC, mentre l’uso della LC-MS, tecnica analitica molto sensibile, ha permesso di rilevarela positività del PEth in almeno un terzo dei donatori (Helander 2011). Sulla base di questi12