Working Paper of Public Health Volume 2012 - Azienda Ospedaliera ...

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Azienda Ospedaliera Nazionale“SS. Antonio e Biagio e Cesare Arrigo”Working Paper of Public Healthnr. 15/2012con un numero di residui differente di acido sialico (Bianchi et al. 2006). La glicoforma piùcomune contiene 4 residui di acido sialico (80% della transferrina totale).Il consumo di alcol inibisce la sializzazione della transferrina per cui le forme con due residuidi acido sialico o addirittura prive aumentano (Bianchi et al. 2006) in caso di pesanteconsumo di bevande alcoliche.L’insieme di queste glicoforme, povere di acido sialico, note con il nome di transferrinacarboidrato-carente (CDT) costituisce un ottimo biomarcatore per individuare i forti bevitori.La CDT è studiata puntualmente da oltre 30 anni, e, a differenza di altri marcatori moltopromettenti, ma indagati in modo limitato da poco tempo, è ormai consolidata l’evidenzadelle sue performance in ambito alcologico.Per quel che riguarda il dosaggio della CDT negli anni, sono stati proposti metodi e tecnichedifferenti.Il metodo considerato a oggi candidato a essere di riferimento effettua la separazione delleglicoforme in HPLC e la rilevazione del complesso ferro-transferrina a 470 nm (Helander etal. 2003), dopo saturazione del campione di siero con un sale di ferro.La separazione delle glicoforme può essere effettuata anche in elettroforesi capillare (CZE)con lettura a 210 nm (Crivellente et al. 2000).Queste metodiche sono di difficile applicazione nei laboratori clinici di routine, dove ilnumero di campioni da analizzare è notevole. La richiesta di semplicità e velocità ha spinto ilmercato della diagnostica a sviluppare metodi commerciali in HPLC e CZE sotto forma di kitsemplificati su strumentazione dedicata che permettono di poter effettuare in tempi ridotti uncarico di lavoro notevole. In commercio esiste anche un kit immunometrico diretto che nonnecessita alcun pretrattamento del campione (Bianchi et al. 2008a).La presenza di metodi diversi per il dosaggio della CDT è stata un limite per l’utilizzo diquesto biomarcatore, infatti differenti metodi danno risultati diversi per lo stesso campione,da qui la necessità di soglie di positività differenti metodo dipendenti. Si osservano così cutoff che variano da 1.3-1.6% (CZE dedicati), 1.8-2.0 (HPLC) e 2.5 % (metodoimmunometrico). Per ovviare a questa criticità è stato costituito un gruppo di lavorointernazionale per la standardizzazione della misura della CDT che avrà lo scopo, tra l’altro,di validare il materiale di riferimento che permetta di allineare tutti i metodi (Helander et al.2010) al fine di raggiungere un traguardo di tutto rispetto: ottenere lo stesso risultato per lostesso campione in qualsiasi laboratorio.7
Azienda Ospedaliera Nazionale“SS. Antonio e Biagio e Cesare Arrigo”Working Paper of Public Healthnr. 15/2012Questo è importante per tutti gli esami di laboratorio ma in particolar modo per quegli analitidal cui risultato possono scaturire provvedimenti limitativi per la libertà personale. E’ perquesto motivo che nei casi in cui la CDT è eseguita per scopi amministrativo-legali (rilasciodi patente di guida, porto d’armi, affidamento di minori ecc) è assolutamente necessario che irisultati “non-negativi” ottenuti con kit diretti o con strumentazione dedicata venganoconfermati con tecniche di elevata gerarchia analitica (HPLC e CZE), tipica di moltilaboratori specializzati a cui è possibile inviare i campioni.L’emivita della CDT è di circa 14 giorni per cui generalmente dopo 2-3 settimane diastinenza ritorna entro il’intervallo di normalità.La CDT aumenta nelle persone che bevono regolarmente elevate quantità di bevandealcoliche, un apporto giornaliero medio di almeno 40 grammi di etanolo (due lattine di birraad alta gradazione alcolica, mezza bottiglia di vino o 120 ml liquore) per qualche settimanasono sufficienti a fare aumentare questo analita oltre la soglia di positività (cut-off).La CDT è un marcatore molto specifico, a differenza degli enzimi epatici (es. GGT), il suoaumento è legato solo all’abuso alcolico, se misurato con metodi appropriati.Le malattie metaboliche con difetti della glicosazione (CDG), che vengono però diagnosticatenei primi anni di vita poiché normalmente sono legate a ritardi mentali, rappresentanonell’uomo forse l’unico caso in cui si ha una CDT alterata anche senza uso di alcol.Ci sono poi situazioni che rendono più complessa la determinazione della CDT come nelcaso di varianti genetiche (
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