ALLERGEN Total IgE REF - Radim S.p.A.

ENZYMIMMUNOASSAY ZUM QUANTITATIVEN NACHWEIS VON TOTAL IgE IN HUMANEM SERUM
ODER PLASMA
NUR ZUR IN-VITRO-DIAGNOSTIK
1.0 VERWENDUNG
Der Testsatz ALLERGEN Total IgE ist ein Enzymimmunoassay zur quantitativen Bestimmung von Total-
Immunglobulin E (IgE) in humanem Serum oder Plasma. Er dient ausschließlich der In-vitro-Diagnostik
und die Ergebnisse sollten nur in Verbindung mit anderen für den Arzt verfügbaren Daten interpretiert
werden.
2.0 PHYSIOLOGIE
Die IgE-Moleküle enthalten 2 Arten von Polypeptidketten, haben ein Molekulargewicht von ca. 200.000
Dalton (1) und binden an die Oberfläche von Mastzellen und basophilen Granulozyten. Die nachfolgende
Bindung von Allergenen an das zellgebundene IgE veranlasst diese Zellen, Histamin und andere
vasoaktive Substanzen freizusetzen, und so die allergischen Reaktionen auszulösen (1,2,3). Bei den
meisten Patienten mit atopischen allergischen Erkrankungen wie z.B atopischem Asthma, atopischer
Dermatitis und Heuschnupfen werden erhöhte IgE-Konzentrationen im Blut nachgewiesen (4,5,6).
Nichtallergiker haben stark variierende IgE-Konzentrationen und während der Kindheit zeigt sich
normalerweise ein Anstieg; Erwachsenenwerte werden im 2. Lebensjahrzehnt erreicht (7,8). Die
Messung der Gesamt-IgE-Konzentration kann bei der Früherkennung einer Allergie bei Kindern von
Bedeutung sein und dient als Mittel für die Vorhersage einer zukünftigen atopischen Manifestation
(9,10,11). Eine signifikante Erhöhung kann nicht nur bei Allergikern gefunden werden, sondern auch in
Fällen von IgE-Myelom, Aspergillose der Lunge und während der aktiven Phase von Parasitenbefall
(12,13). Erhöhte IgE-Werte werden in Fällen von Hypergamma-globulinämie, Autoimmunerkrankungen,
Colitis ulcerosa, Hepatitis, Krebs und Malaria gefunden (14).
3.0 TESTPRINZIP
Der ALLERGEN Total IgE-Assay ist ein Immunoassay nach dem Sandwich-Prinzip. Die Patientenprobe
wird in die Wells, die mit einem monoklonalen Anti-IgE-Antikörper beschichtet sind, pipettiert. Während
der ersten Inkubation bindet dieser Antikörper das IgE der Probe. Nach Zugabe und anschließender
Inkubation mit einem Anti-IgE-Biotin-Konjugat bildet sich ein „sandwichartiger” Anti-IgE:IgE:Anti-IgE-
Biotin-Komplex. Die weiteren Inkuba-tionsschritte mit einem Streptavidin-Peroxidase-Konjugat und dem
Substrat führen zur einer Entwicklung einer Blaufärbung. Die enzymatische Reaktion wird dann mit einer
Stopplösung blockiert und es entsteht eine Gelbfärbung. Die entstandene Farbe wird photometrisch bei
450 nm gemessen. Die Farbintensität ist direkt proportional zur IgE-Konzentration in der Probe.
4.0 KITKOMPONENTEN
MT PLATE
CONJ│BIOT
CAL│A…F
BUF│INC
Reagenzien
IgE-MIKROTITERPLATTE: Die Packung enthält eine Mikrotiterplatte mit 12
Streifen x 8 Wells. Jedes Well ist mit monoklonalem anti-Human IgE (Maus)
beschichtet. Lagern Sie die unbenutzten Streifen zusammen mit dem
Trockenmittel bei 2-8°C in dem verschließbaren Plastikbeutel.
ANTI-IgE-BIOTIN-KONJUGAT: Das Fläschchen enthält 13 ml Anti-IgE-Biotin-
Konjugat in Tris-Puffer, pH 8,1, mit Stabilisatoren und Konservierungsmittel.
Gebrauchsfertig.
Total IgE KALIBRATOREN: 6 Fläschchen (je 0,5 ml) mit humanem IgE in den
Konzentrationen 0 - 10 - 50 - 250 - 500 - 1000 kIU/l (2. IRP 75/502 WHO), in
Pferdeserum mit 0,01 % Proclin 300 als Konservierungsmittel. Gebrauchsfertig.
INKUBATIONSPUFFER: Inkubationspuffer; das Fläschchen enthält 18 ml TRIS-
Puffer, pH 8,4, mit 0,1 % Tween 20 und 0,005 % Proclin 300 als
Konservierungsmittel. Gebrauchsfertig.
A1002 – ALLERGEN Total IgE
M541 – Rev. 1 – 06/2010 – Pag. 19/32