You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
JRI حيدري <strong>و</strong> ...<br />
4-1- خارج سازي هسته به ر<strong>و</strong>ش فيزيكي: در اين ر<strong>و</strong>ش محل<br />
استقرار صفحه متافازي <strong>و</strong> كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مها از ر<strong>و</strong>ي م<strong>و</strong>قعيت<br />
جسم قطبي تخمين زده شده ليكن در اغلب م<strong>و</strong>ارد (بيش از<br />
از محل ا<strong>و</strong>ليهخ<strong>و</strong>د حركت مينمايد <strong>و</strong> معم<strong>و</strong>لاً نزديك<br />
به صفحهمتافازي قرار ندارد. در اين ر<strong>و</strong>ش با <strong>و</strong>ارد كردن سر<br />
س<strong>و</strong>زن به داخل سيت<strong>و</strong>پلاسم، <strong>و</strong> حجمي از سيت<strong>و</strong>پلاسم<br />
%10) خارج ميگردد؛ ليكن در اين ر<strong>و</strong>ش<br />
هيچ تضمين قطعي براي خارجسازي <strong>و</strong>اقعي كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مها<br />
<strong>و</strong>ج<strong>و</strong>د ندارد از طرف ديگر خارج سازي حجم بالاي<br />
سيت<strong>و</strong>پلاسم سبب كاهش قابليت برنامه ريزي مجدد اپي<br />
1<br />
ژنتيكي هسته سل<strong>و</strong>ل دهنده ت<strong>و</strong>سط تخمك خ<strong>و</strong>اهد شد<br />
در اين ر<strong>و</strong>ش به منظ<strong>و</strong>ر افزايش اطمينان از خارج<br />
2<br />
سازي صفحه متافازي از رنگ ه<strong>و</strong>خس استفاده <strong>و</strong> پس از<br />
مجا<strong>و</strong>رت تخمك با UV (كمتر از ثانيه) <strong>و</strong> مشخص شدن<br />
جايگاه هسته، محت<strong>و</strong>يات ژنتيكي خارج ميش<strong>و</strong>د.<br />
4-2- خارج سازي هسته به ر<strong>و</strong>ش شيميايي: در اين ر<strong>و</strong>ش پس<br />
از مجا<strong>و</strong>رت تخمك با تركيبات شيميايي مختلف، ر<strong>و</strong>ند<br />
سايت<strong>و</strong>كاينز <strong>و</strong> كاري<strong>و</strong>كاينز سل<strong>و</strong>ل دچار تغيير ميگردد. در<br />
<strong>و</strong> (مهار<br />
گذشته بدين منظ<strong>و</strong>ر از<br />
استفاده مي گرديد. بعدها با<br />
پيشرفتهاي حاصله مشخص گرديد كه تخمكهايي كه با<br />
<strong>و</strong> <strong>و</strong> يا تركيبي از <strong>آن</strong>ها فعال<br />
ميش<strong>و</strong>ند در انتهاي ر<strong>و</strong>ند خارج سازي هسته فاقد <strong>آن</strong>زيم<br />
فعال هستند <strong>و</strong> درصد تسهيم <strong>و</strong> ت<strong>و</strong>ليد بلاست<strong>و</strong>سيت در<br />
<strong>آن</strong>ها به ط<strong>و</strong>ر معنيدار كمتر از ساير ر<strong>و</strong>شها است. بنابراين<br />
MPF<br />
Etoposide<br />
pb<br />
5<br />
Cyclohexamide<br />
Pb (%50<br />
(%10-30، ترجيحاً<br />
.(35،42)<br />
.(35،44،68)<br />
كنندهII (topoisomerase<br />
Etoposide<br />
Cyclohexamide<br />
kinase<br />
Democolcine (DEM)<br />
<strong>و</strong><br />
Nocodazole (NOC)<br />
به عن<strong>و</strong>ان<br />
جايگزين مناسبي براي د<strong>و</strong> دار<strong>و</strong>ي ف<strong>و</strong>ق مطرح گرديد. DEM<br />
با<br />
اتصال به دايمر ت<strong>و</strong>ب<strong>و</strong>لين از پليمريزه شدن ميكر<strong>و</strong>ت<strong>و</strong>ب<strong>و</strong>لها<br />
جل<strong>و</strong>گيري <strong>و</strong> دانسيته<strong>آن</strong>ها را كاهش داده <strong>و</strong> همچنين سبب بير<strong>و</strong>ن<br />
زدگي ت<strong>و</strong>ده كاملاً متراكم كر<strong>و</strong>ماتين از سطح غشاء<br />
سيت<strong>و</strong>پلاسمي تخمك ميگردد. استفاده از اين تركيب سبب<br />
تحريك ر<strong>و</strong>ند تكاملي تقسيمات جنيني <strong>و</strong> افزايش درصد<br />
بلاست<strong>و</strong>سيت ميگردد. اين تركيب معم<strong>و</strong>لاً همراه با اتان<strong>و</strong>ل<br />
استفاده گرديده <strong>و</strong> كاربرد <strong>و</strong>سيعي در شبيه سازي م<strong>و</strong>ش، بز،<br />
خرگ<strong>و</strong>ش <strong>و</strong> خ<strong>و</strong>ك دارد<br />
NOC .(44،54،64)<br />
مشابه DEM<br />
نيز داراي تاثيري<br />
ب<strong>و</strong>ده با اين تفا<strong>و</strong>ت كه درصد خارج سازي م<strong>و</strong>ثر<br />
تمامي محت<strong>و</strong>يات ژن<strong>و</strong>مي با استفاده از اين تركيب در مقايسه با<br />
DEM<br />
پايينتر ميباشد. اخيراً مشخص شده استفاده از DEM<br />
<strong>و</strong> NOC سبب بير<strong>و</strong>ن زدگي كامل <strong>و</strong>لي م<strong>و</strong>قت محت<strong>و</strong>يات<br />
كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي تخمك گرديده <strong>و</strong> در ص<strong>و</strong>رت عدم خارج سازي<br />
هسته به ص<strong>و</strong>رت فيزيكي، ت<strong>و</strong>ده كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي مجدداً جذب<br />
سيت<strong>و</strong>پلاسم تخمك ميگردد<br />
.(79)<br />
لذا به نظر ميرسد<br />
خارج سازي هسته به ر<strong>و</strong>ش شيميايي به تنهايي نميت<strong>و</strong>اند<br />
اطمينان كافي از بد<strong>و</strong>ن هسته شدن تخمك را فراهم نمايد <strong>و</strong> تنها<br />
سبب سه<strong>و</strong>لت در خارج سازي محت<strong>و</strong>يات كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي تخمك<br />
ميگردد.<br />
4-3- خارج سازي هسته به كمك سانترفي<strong>و</strong>ژ: برخي از محققين<br />
تمهيداتي نظير سانتريفي<strong>و</strong>ژ تخمك قبل از خارج سازي هسته را<br />
به كار برده <strong>و</strong> گزارش نم<strong>و</strong>دهاند سانتريفي<strong>و</strong>ژ تخمك بد<strong>و</strong>ن هيچ<br />
تاثير مضر ر<strong>و</strong>ي تخمك <strong>و</strong> جنين حاصله، سبب كاهش زا<strong>و</strong>يه<br />
استقرار جسم قطبي نسبت به صفحه متافازي <strong>و</strong> افزايش<br />
درصد خارج سازي م<strong>و</strong>فق هسته خ<strong>و</strong>اهد شد<br />
.(44،77،80)<br />
(pb)<br />
Hua<br />
تخمكهاي گا<strong>و</strong><br />
<strong>و</strong> همكاران با مقايسه سرعتهاي مختلف سانتريفي<strong>و</strong>ژ<br />
2000 ،3000 RPM)<br />
دقيقه 20 به مدت 1000) <strong>و</strong><br />
<strong>و</strong> بررسي تاثير <strong>آن</strong> بر ر<strong>و</strong>ي درصد خارج سازي م<strong>و</strong>فق هسته،<br />
درصد جنينهاي<br />
2 سل<strong>و</strong>لي<br />
8-16 سل<strong>و</strong>لي، درصد<br />
بلاست<strong>و</strong>سيست <strong>و</strong> نيز تعداد بلاست<strong>و</strong>مرهاي ر<strong>و</strong>ز<br />
نم<strong>و</strong>دند كه سانتريفي<strong>و</strong>ژ تخمك در د<strong>و</strong>رهاي<br />
نسبت به د<strong>و</strong>ر<br />
8، مشخص<br />
3000 <strong>و</strong> 2000<br />
1000<br />
<strong>و</strong> گر<strong>و</strong>ه كنترل سبب افزايش معنيدار<br />
درصد خارج سازي م<strong>و</strong>فق هسته خ<strong>و</strong>اهد شد. اين محققين زا<strong>و</strong>يه<br />
نسبي استقرار جسم قطبي نسبت به صفحه متافازي را با كمك<br />
رنگ آميزي ه<strong>و</strong>خس، به سه گر<strong>و</strong>ه زا<strong>و</strong>يه ك<strong>و</strong>چك (كمتر از<br />
درجه)، مت<strong>و</strong>سط<br />
20<br />
20-30)<br />
درجه) <strong>و</strong> بزرگ<br />
(30-180)<br />
گزارش نم<strong>و</strong>دند پس از سانتريفي<strong>و</strong>ژ با سرعتهاي بالا<br />
تقسيم <strong>و</strong><br />
2000)<br />
(3000<br />
زا<strong>و</strong>يه مذك<strong>و</strong>ر در اغلب م<strong>و</strong>ارد<br />
20 (%80-90)<br />
20-30<br />
1000<br />
<strong>و</strong> ز<strong>و</strong>اياي<br />
<strong>و</strong><br />
درجه <strong>و</strong><br />
درجه خ<strong>و</strong>اهد ب<strong>و</strong>د <strong>و</strong> اين در حالي است كه در سرعت<br />
زا<strong>و</strong>يه استقرار تفا<strong>و</strong>ت معنيداري با گر<strong>و</strong>ه كنترل نداشته<br />
20-180<br />
درجه را نشان داده است<br />
.(77)<br />
در مجم<strong>و</strong>ع<br />
1- Epigenetic reprograming<br />
2- Hoechst 33342<br />
Downloaded from http://www.jri.ir<br />
59<br />
فصلنامه بار<strong>و</strong>ري <strong>و</strong> نابار<strong>و</strong>ري/ بهار 1390
Change language