You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
يها<br />
يها<br />
يع<br />
يها<br />
JRI<br />
شبيه سازي <strong>و</strong> ع<strong>و</strong>امل م<strong>و</strong>ثر بر <strong>آن</strong><br />
<strong>و</strong> فاقد هر گ<strong>و</strong>نه<br />
حاصله از لحاظ كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي كاملاً طبي البته گزارشهايي مبني<br />
ناهنجاري ميباشند<br />
آسيب كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي متعاقب<br />
مرحله بر انتقال سل<strong>و</strong>ل با كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مها غير متعارف <strong>و</strong>ج<strong>و</strong>د<br />
<strong>و</strong> ايجاد جنين دارد<br />
(49،51،67،68،75)<br />
G 2 <strong>و</strong><br />
.(51،67)<br />
PCC<br />
2-3- ت<strong>و</strong>انايي ا<strong>و</strong><strong>و</strong>پلاسم در برنامهريزي مجدد هستهسل<strong>و</strong>ل<br />
دهنده: اصطلاح برنامه ريزي مجدد هسته (NR) براي ا<strong>و</strong>لين<br />
بار در ر<strong>و</strong>ند شبيه سازي د<strong>و</strong>زيستان به كار گرفته شد <strong>و</strong> به<br />
معناي تغييرات م<strong>و</strong>رف<strong>و</strong>ل<strong>و</strong>ژيك <strong>و</strong> م<strong>و</strong>لك<strong>و</strong>لي هسته سل<strong>و</strong>ل<br />
س<strong>و</strong>ماتيك پس از م<strong>و</strong>اجهه با ا<strong>و</strong><strong>و</strong>پلاسم است<br />
.(76)<br />
بعدها اين<br />
تعريف، تغييرات كر<strong>و</strong>ماتين <strong>و</strong> نح<strong>و</strong>ه بيان ژن را نيز شامل شد.<br />
<strong>و</strong>قايعي كه در ر<strong>و</strong>ند NR در هسته سل<strong>و</strong>ل س<strong>و</strong>ماتيك رخ ميدهد<br />
اساساً مشابه تغييرات DNA اسپرم <strong>و</strong> تخمك در ر<strong>و</strong>ند لقاح<br />
طبيعي است؛ ليكن تفا<strong>و</strong>تهايي در اين بين <strong>و</strong>ج<strong>و</strong>د دارد كه به<br />
<strong>آن</strong>ها پرداخته خ<strong>و</strong>اهد شد. SCNR اساساً <strong>و</strong>ابسته به فاكت<strong>و</strong>رهاي<br />
سيت<strong>و</strong>پلاسمي تخمك ميباشد. اين ع<strong>و</strong>امل خاص، منحصراً در<br />
ا<strong>و</strong><strong>و</strong>پلاسم تخمكهاي بالغ (مرحله<br />
(MII<br />
بار<strong>و</strong>ر نشده (يا به<br />
عبارتي فعال نشده) <strong>و</strong> فقط به مدت ك<strong>و</strong>تاهي پس از فعال شدن<br />
تخمك <strong>و</strong>ج<strong>و</strong>د دارند <strong>و</strong> لازم است كر<strong>و</strong>ماتين سل<strong>و</strong>ل س<strong>و</strong>ماتيك<br />
مستقيماً با اين فاكت<strong>و</strong>رها م<strong>و</strong>اجه گردد<br />
،SCNR فعاليت بالاي<br />
.(33)<br />
MPF<br />
محرك اصلي ر<strong>و</strong>ند<br />
ا<strong>و</strong><strong>و</strong>پلاسم ميباشد. MPF از د<strong>و</strong><br />
1<br />
زير <strong>و</strong>احد به نام زير <strong>و</strong>احد كاتاليتيك CDC2 كه مشابه<br />
پر<strong>و</strong>تئين كيناز<br />
cdc2<br />
CyclinB<br />
3<br />
2<br />
مخمر ميباشد <strong>و</strong> زير <strong>و</strong>احد تنظيم كننده<br />
تشكيل شده است. به دنبال <strong>و</strong>ر<strong>و</strong>د سل<strong>و</strong>ل س<strong>و</strong>ماتيك<br />
به داخل ا<strong>و</strong><strong>و</strong>پلاسم، فعاليت بالاي MPF سبب شر<strong>و</strong>ع <strong>و</strong>قايعي<br />
نظير PCC ،NEBD<br />
<strong>و</strong> يكسري تغييرات اپيژنتيكي در<br />
كر<strong>و</strong>ماتين سل<strong>و</strong>ل س<strong>و</strong>ماتيك ميگردد. در ص<strong>و</strong>رتيكه اين تغييرات<br />
اپيژنتيك به ط<strong>و</strong>ر منظم در ر<strong>و</strong>ند طبيعي خ<strong>و</strong>د پيش نر<strong>و</strong>ند، دامنه<br />
<strong>و</strong>سيعي از ان<strong>و</strong>اع ناهنجاريهاي كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي در جنين ايجاد<br />
ميگردد. از جمله مهمترين <strong>آن</strong>ها، تغييرات اپيژنتيكي مسئ<strong>و</strong>ل<br />
،NR<br />
استيله <strong>و</strong>متيله شدن هيست<strong>و</strong>ن <strong>و</strong> متيله شدن DNA ميباشند.<br />
2-4- زمان خارج سازي محت<strong>و</strong>يات ژن<strong>و</strong>مي تخمك: مناسب ترين<br />
زمان براي خارج سازي جسم قطبي<br />
متافازي تخمك در گ<strong>و</strong>سفند<br />
4<br />
(pb) <strong>و</strong> صفحه<br />
22-24 h<br />
24-26 h<br />
<strong>و</strong><br />
<strong>و</strong> در گا<strong>و</strong><br />
پس از شر<strong>و</strong>ع IVM ب<strong>و</strong>ده <strong>و</strong> ت<strong>و</strong>صيه شده<br />
تخمكهايي كه در گ<strong>و</strong>سفند <strong>و</strong> گا<strong>و</strong> به ترتيب ظرف مدت<br />
24<br />
26 ساعت<br />
مطالعه حذف گردند<br />
پس از شر<strong>و</strong>ع كشت،<br />
pb<br />
.(35)<br />
مشخصي ندارند از<br />
2-5- كيفيت <strong>و</strong> كميت ا<strong>و</strong><strong>و</strong>پلاسم: كيفيت ا<strong>و</strong><strong>و</strong>پلاسم تخمكهايي<br />
كه در شرايط<br />
in vitro<br />
تخمكهايي است كه در<br />
بالغ شدهاند بسيار پايين تر از<br />
in vivo<br />
بالغ شدهاند. ليكن به دليل<br />
دسترسي آسان <strong>و</strong> فرا<strong>و</strong>اني تخمكهاي كشت داده شده در<br />
شرايط آزمايشگاهي معم<strong>و</strong>لاً از اين تخمكها به عن<strong>و</strong>ان سل<strong>و</strong>ل<br />
گيرنده استفاده ميگردد. در ص<strong>و</strong>رت استفاده از تخمكهاي<br />
بل<strong>و</strong>غ يافته در آزمايشگاه ت<strong>و</strong>جه به نكاتي از جمله انتخاب<br />
ف<strong>و</strong>ليك<strong>و</strong>ل جهت آسپيره كردن، مدت زمان <strong>و</strong> شرايط محيط<br />
كشت تخمكها، شرايط اتمسفر حاكم بر انك<strong>و</strong>بات<strong>و</strong>ر <strong>و</strong> انتخاب<br />
تخمكهاي مناسب جهت خارج سازي هسته<br />
II<br />
.(35)<br />
بالاي MPF<br />
ضر<strong>و</strong>ري است<br />
3- همزماني سيكل سل<strong>و</strong>لي سل<strong>و</strong>لهاي دهنده <strong>و</strong> گيرنده<br />
به منظ<strong>و</strong>ر اجتناب از اختلالات كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي جنينهاي شبيه<br />
سازي شده، بايستي سيكل سل<strong>و</strong>لي سل<strong>و</strong>لهاي دهنده با ميزان<br />
تخمك متافاز هماهنگي <strong>و</strong> همخ<strong>و</strong>اني داشته باشد.<br />
به همين دليل تنها سل<strong>و</strong>لهاي دهندهاي كهDNA ديپل<strong>و</strong>ئيد داشته<br />
<strong>و</strong> در فاز <strong>و</strong> يا هستند براي اين كار مناسباند<br />
G0<br />
G1<br />
.(22،34،47،68،78)<br />
4- ر<strong>و</strong>ش خارجسازي هسته<br />
خارج سازي دقيق تمام محت<strong>و</strong>يات هسته در ر<strong>و</strong>ند شبيه<br />
سازي، كاري <strong>و</strong>قت گير <strong>و</strong> خسته كننده <strong>و</strong> در عين حال بسيار<br />
حساس <strong>و</strong> كليدي است. انتخاب ر<strong>و</strong>شي سريع، ساده، كارامد <strong>و</strong><br />
با حداقل آسيب <strong>و</strong>ارده به تخمك سبب افزايش مشخص<br />
راندمان شبيه سازي خ<strong>و</strong>اهد شد. تاكن<strong>و</strong>ن از ر<strong>و</strong>ش مختلفي<br />
به منظ<strong>و</strong>ر خارج سازي محت<strong>و</strong>يات كر<strong>و</strong>م<strong>و</strong>ز<strong>و</strong>مي تخمك استفاده<br />
شده كه مرس<strong>و</strong>مترين <strong>آن</strong>ها عبارتند از:<br />
4- Polar body<br />
1- Catalytic subunit; CDC2<br />
2- Yeast cdc2 protein kinase<br />
3- Regulatory subunit; Cyclin B<br />
Downloaded from http://www.jri.ir<br />
فصلنامه بار<strong>و</strong>ري <strong>و</strong> نابار<strong>و</strong>ري/ بهار 1390<br />
58
Change language