Colon Panel

Colon Panel
La soluzione nella diagnosi
delle infiammazioni
intestinali

Colon
Il colon è un organo cavo, posto
in sede addominale, lungo circa
un metro e mezzo, che inizia a
livello della valvola ileo-cecale,
tratto terminale dell'intestino
tenue, e termina con il retto e il
canale anale.
È formato da diverse parti:
cieco,
•colon ascendente,
• colon trasverso,
•colon discendente
• sigma.

La sua funzione essenziale è quella di assorbire
sali minerali, nutrienti e acqua dal materiale che
gli perviene dal tenue, ha un’importante attività
secretrice, rappresentata principalmente dalla
produzione di muco e immunoglobuline che
esplicano un ruolo lubrificante e un’azione
protettiva dal punto di vista immunitario su tutta
la mucosa del grosso intestino

Il colon è soggetto a diverse patologie
infiammatorie che ne condizionano il buon
funzionamento, ad esempio la Colite è il
termine generico con cui viene indicata una
condizione del colon infiammato.
Questa condizione può configurare un nutrito
numero di patologie anche molto diverse tra
loro per eziologia ma tutte unite dal tratto
unificante della flogosi della mucosa intestinale
e da una sintomatologia abbastanza simile.

Tra le più comuni malattie di tale tipo possiamo identificare:
Colite infettiva.
In questo caso l’infiammazione è causata dall’infezione di un agente patogeno, da
virus, batteri e altri microrganismi.
Colite ischemica.
Infiammazione causata da un ridotto apporto vascolare al tratto intestinale.
Colite ulcerosa.
L’infiammazione si estende causando un’ulcerazione del colon. La causa della
malattia non è nota e si presume sia coinvolto il sistema immunitario.
Morbo di Crohn.
Malattia caratterizzata da infiammazione e ulcerazioni della parete del colon a tratti
ben distinti tra parti sane e malate.
Sindrome del colon irritabile.
Malattia caratterizzata da una serie di disturbi del colon a cui non è possibile
associare specifiche patologie riscontrabili.
Si ritiene che possa essere causata da effetti di natura psicologica: stress, ansia, etc.

What we can do more?

• Più del 90 % dei carcinomi colorettali si sviluppano
da adenomi, la progressione dei quali nella media
dei casi dura da 10 a 15 anni.
• La diagnosi avviene spesso solo in uno stadio
avanzato, a causa di una sintomatologia aspecifica,
anche se in genere ci sono emorragie intestinali già
molto tempo prima della comparsa di altri sintomi
clinici.
• Il test di sangue occulto nelle feci viene da alcuni
anni applicato come metodo di screening per la
popolazione che non presenta sintomi clinici.

• un’incidenza di circa 100.000 di nuovi casi ogni
anno e una mortalità di circa 34/100.000, che
significa circa 30.000 casi di patologie intestinali
nuove all’anno, tra cui il cancro dell’intestino che è
la seconda causa di morte in Italia, in Germania e
una delle prime cause di morte in Europa.
• In Italia, un’ uomo su 22 si ammala di tumore del
colon-retto entro i 74 anni e la probabilità di
ammalarsi per le donne è una su 37 mentre le
patologie correlate alle infiammazioni del colon
sono in costante aumento del 23% e di difficile
interpretazione per i tempi lunghi delle analisi

Cosa occorre
• Un Nuovo sistema diagnostico
• Easy-to-use
• Utile per lo screening delle infiammazioni
intestinali

COLON PANEL
SISTEMA PER IL RILEVAMENTO
DI FATTORI INFIAMMATORI INTESTINALI
NELLE FECI

Il Colon Panel è un dispositivo diagnostico “One Step” con
Risultato Visivo Immediato ed è un IVD (dispositivo medico
diagnostico in vitro).
Questo dispositivo è stato ideato per poter fornire al
medico alcuni importanti parametri clinici essenziali per la
valutazione dello stato infiammatorio del colon utilizzando
un semplice campione fecale.
Il dispositivo ha dimensioni contenute, è di semplice utilizzo
e non necessita di alcuna attrezzatura dedicata; nelle
finestrelle del dispositivo vengono visualizzati in pochi
minuti i vari livelli qualitativi dello stato infiammatorio del
colon.

Test
Piastra
Colon Panel
Area Controllo
Area Test
Serbatoio
Sistema di
raccolta
La piastra è a tenuta e non ha dispersioni di liquidi

Tappo di sicurezza
sito inserimento provetta
Provetta campione
Fermo di sicurezza serbatoio

Colon Panel fornisce all’utilizzatore solo indicazioni qualitative dello stato
patologico in esame, non possono essere determinati con questo sistema né i
valori quantitativi e né la percentuale di incremento delle concentrazioni dei
singoli test presenti; qualora il sistema fornisca esiti positivi è consigliabile
approfondire il quadro generale delle indagini specifiche con altre tecniche
diagnostiche e con ulteriori approfondimenti clinici.
Questo dispositivo è dedicato solo all’uso professionale di laboratorio o dello
studio medico.
Test presenti nel COLON PANEL
1. Determinazione di : Hb fecale
2. Determinazione di : Calprotectina fecale
3. Determinazione di : Escherichia Coli 0157
4. Determinazione di : Lactoferrina fecale
5. Determinazione di : Transferrina fecale

• E’ un test immunocromatografico monofase
rapido per la determinazione qualitativa e
semiquantitativa della Calprotectina fecale
• utilizza il principio dell’immunocromatografia a
flusso su membrana di nitrocellulosa. Il test
prevede dopo l’estrazione dal campione di feci
la dispensazione di alcune gocce del liquido di
estrazione nel pozzetto della card.
• La soluzione reidrata l’anticorpo specifico
coniugato con oro colloidale e, se nel
campione è presente l’antigene, si forma un
complesso immunologico colorato che migra
fino a raggiungere la zona (T) dove è fissato il
secondo anticorpo che cattura il complesso
immunologico.
• In caso di positività del test si forma una linea
rosso porpora di facile lettura. Il liquido
continua la migrazione fino a raggiungere una
seconda zona reattiva (C) dove un anticorpo
fissato sulla striscia cattura l’eccesso di
anticorpo primario formando una linea
analoga a quella del test. Questa linea serve
invece da controllo del test per verificare la
corretta procedura analitica.

INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
L'intensità della banda colorata nell’area Test (T) varia a seconda
della concentrazione dell’antigene presente nel campione.
Tuttavia, né il valore quantitativo, né il tasso di aumento in
percentuale del parametro che stiamo analizzando può essere
determinato da questo test qualitativo.

Sistema di RACCOLTA DEI CAMPIONI FECALI

RACCOLTA DEI CAMPIONI FECALI
Ai fini di un corretto utilizzo del sistema e al fine di ottenere le migliori
prestazioni vi consigliamo di seguire attentamente le varie fasi
procedurali qui evidenziate.
1. La raccolta del campione fecale va eseguita prelevando una
sufficiente quantità di feci (1-2 g o ml per campioni liquidi).
2. I campioni di feci devono essere raccolti in contenitori puliti e asciutti
(nessun conservante o terreno di trasporto).
3. I campioni possono essere conservati in frigorifero (2-4ºC/36-40ºF)
per 1-2 giorni prima di essere testati. Per periodi di stoccaggio più
lunghi i campioni vanno congelati a -20°C/4ºF. In questo caso, il
campione andrà completamente scongelato e portato a temperatura
ambiente prima di poter essere processato

La Calprotectina è un eterodimero composto da due
proteine ( 8 e 14 kD) calcio-vincolanti presente nel
citoplasma dei neutrofili ed espresse dalle membrane
dei monociti .
La Calprotectina fecale costituisce quasi il 60% delle
proteine citosolubili dei neutrofili e ha sopratutto un
ruolo importante nella difesa immunitaria
La Calprotectina fecale viene rilasciata dalle cellule
sia durante l'attivazione sia dopo la loro
degradazione, si mantiene e rimane stabile per molti
giorni dopo l'escrezione.

• Molti studi hanno dimostrato che la
calprotectina è un marcatore sensibile
dell'attività nelle patologie del Colon
• Si è dimostrato inoltre che la calprotectina è
ben correlata con l' endoscopia e con l'
istologia.
• Agli inizi degli anni 2000 Due studi sulla FC
dimostravano l’utilità della calprotectina per
poter distinguere le malattie infiammatorie
intestinali dalla sindrome dell' intestino
irritabile, mostrando una alta sensibilità e
specificità.
Tibble JA et al. Gut 2000;47: 506-13
Roseth AG et al. Digestion 1997;58: 176-80
Tibble JA et al. Gastroenterology 2002; 123: 450-60
Carroccio A et al. Clin Chem 2003;49: 861-867

• La determinazione della calprotectina nelle feci
è utilizzata come marcatore dell'infiltrazione
dei neutrofili nel lume intestinale e di
conseguenza come marcatore indiretto
dell'infiammazione intestinale
• La calprotectina è molto stabile nelle feci, la
sua concentrazione correla molto bene con il
livello di attività della malattia infiammatoria
cronica intestinale.
• Dopo l'attivazione dei neutrofili, o delle cellule
di adesione endoteliale, la calprotectina viene
rilasciata e può essere determinata nel siero,
nei fluidi corporei o nelle feci assumendo quindi
un ruolo clinico importante come marker
infiammatorio

• Studi a supporto di questa applicazione indicano che
aumentati livelli di calprotectina fecale si riscontrano
soprattutto nelle IBD (Inflammatory Bowel Disease o
rettocolite ulcerosa, Morbo di Crohn) e in alcune
neoplasie del tratto gastroenterico.
• Ovviamente livelli aumentati vengono anche
riscontrati in tutte le patologie che implicano un
processo infiammatorio, acuto o cronico, a carico
dell'apparato gastroenterico includendole
patologie peptiche, la malattia diverticolare, le
enterocoliti infettive, l'IBS infiammatoria e nel
trattamento con alcuni farmaci.
• La determinazione dei livelli di concentrazioni
fecali di calprotectina è inoltre utile nel
monitoraggio dell'efficacia terapeutica e nella
valutazione della gravità della flogosi mucosale in
soggetti affetti da malattia infiammatoria cronica
intestinale.
•

Indicazioni per l’utilizzo del Colon Panel:
• Differenziazione tra infiammazione intestinale di
tipo funzionale (ex. IBS) e infiammazione
intestinale di tipo organico (IBD)
• Ottimizzazione della terapia nei pazienti con
infiammazioni croniche dell'intestino.
• Monitoraggio dell'attività flogistica della mucosa
intestinale del post-operatorio.
• Differenziazione tra diarrea organica e diarrea
funzionale

Perché utilizzarlo?
E' un esame eseguito per la diagnosi di malattie
infiammatorie e tumori di grado avanzato dell'intestino.
In tal caso, infatti, i livelli di calprotectina (una proteina) nelle
feci risultano notevolmente elevati. La calprotectina fecale
viene prodotta in grossa quantità in caso di morbo di Crohn
(malattia infiammatoria cronica dell'intestino), tumori dello
stomaco e dell'esofago, enterocolite (infiammazione delle
mucose intestinali, frequentissima nei bambini, ma comune
anche negli adulti) di origine infettiva o tossica, esofagite
(infiammazione dell'esofago, che è il "tubo" che collega la
bocca allo stomaco), diverticolite (processo infiammatorio
soprattutto a carico del colon, in particolare discendente e
sigma) ed altre gravi malattie dell'apparato digerente.

FECAL CALPROTECTIN IN COLONIC DIVERTICULAR
DISEASE: A CASE-CONTROL STUDY AND
COMPARISON IN IRRITABLE BOWEL SYNDROME
AND HEALTHY PEOPLE
Antonio TURSI°, Giovanni BRANDIMARTE§, Walter ELISEI§,
Gian Marco GIORGETTI^, Cosimo Damiano INCHINGOLO*,
Rosanna NENNA*, Attilio CITRINO^^,Fabio AIELLO#
° Digestive Endoscopy Unit, “Lorenzo Bonomo” Hospital, Andria (BA)
§ Division of Gastroenterology, “Cristo Re” Hospital, Roma
^ Clinical Nutrition Unit, “S. Eugenio” Hospital, Roma
* Department of Pathology, “Lorenzo Bonomo” Hospital, Andria (BA)
# Department of Statistic and Mathematic Sciences, University of Palermo
^^ Sofar S.p.A.

Sangue occulto nelle feci
La preparazione all'esame è subordinata alle tecniche diagnostiche
utilizzate dal laboratorio di analisi (Hemmocult o prove immunochimiche).
Le tecniche tradizionali si basano sull'utilizzo del guaiaco e sfruttano
striscette di carta che, quando trattate con idrogeno-perossidasi,
sviluppano un colore ben definito in presenza o assenza di EME (porzione
emoglobinica, contenuta nei globuli rossi, che lega l'ossigeno).
Per evitare falsi positivi, nei giorni precedenti l'esame è bene astenersi dal
consumo di carni rosse crude o semicrude e salumi di ogni genere,
evitare fonti particolarmente ricche di vitamina C (alimenti, farmaci
ed integratori), gli alcolici ed i medicinali antinfiammatori tipo Aspirina ©
(che potrebbero danneggiare la mucosa dello stomaco, con conseguente
fuoriuscita di sangue).

È inoltre importante spazzolare i denti con delicatezza, per evitare
di provocare emorragie gengivali, e seguire un'alimentazione il più
possibile ricca di fibra alimentare.
Con i test di ultima generazione non è più necessario rispettare
queste norme, poiché la ricerca di sangue occulto nelle feci
sfrutta specifici anticorpi diretti contro la porzione proteica
(globina), dell'emoglobina umana. Questi test, tuttavia, sono in
grado di evidenziare soltanto la presenza di sangue occulto
proveniente dal colon e dal retto, poiché la globina non supera
indenne il tratto gastrointestinale superiore (viene digerita). In
genere queste innovative indagini istochimiche vengono utilizzate
per la loro alta specificità nei test di screening per il cancro al
colon/retto, anche per la già citata indipendenza dei risultati da
possibili emorragie dei tratti iniziali del tubo digerente (ulcere
gastriche e duodenali, varici esofagee ecc).

Sinora però i test immunologici non hanno completamente sostituito il
test al guaiaco, perché più costosi anche se una recente revisione
della letteratura pubblicata dall’Organizzazione Mondiale della Sanità
e dall’Organizzazione Mondiale di Endoscopia Digestiva ha
dimostrato che i test immunochimici rimuovono le difficoltà create
dalla dieta e dai farmaci e consentono una standardizzazione della
procedura e dei controlli di qualità rendendoli sicuramente preferibili
per programmi di screening (16).
Attualmente, l’adesione regolare al FOBT risulta < 50% sia in gruppi
di volontari sia nella popolazione generale. Per questo, l’adozione di
un test da utilizzare per un solo giorno, che non richiede alcuna
restrizione dietetica, come nel caso dei test immunologici, può
favorire un incremento dell’adesione dei soggetti invitati, migliorando
l’efficacia dei programmi di prevenzione basati sul test FOBT (3,26).

I test non hanno di per sé particolari effetti collaterali, ma i
pazienti in cui il FOBT è falsamente positivo (circa la metà)
sono sottoposti ad una colonscopia che, in una situazione
diversa dallo screening, non sarebbe stata eseguita.
Gli effetti collaterali principali sono quindi da riferire agli
esami endoscopici, anche se non devono essere
sottovalutati gli effetti collaterali psicologici, quali l’ansia
creata dalla falsa positività, poi non confermata dagli
accertamenti di II livello, o la falsa rassicurazione legata ai
risultati falsi negativi, che può comportare un rischio di
ritardo diagnostico

L’associazione dell’ Emoglobina con la Transferrina nei campioni di feci umane,
è utile per la diagnosi differenziale di disordini emorragici gastrointestinali.
Il sangue occulto fecale come abbiamo visto è un indicatore importante nella
valutazione diagnostica dei pazienti con sospetta emorragia gastrointestinale di
qualsiasi eziologia, ma non solo come un'indicazione di cancro colon-rettale.
La presenza di emoglobina umana nelle feci di fatti non è sufficiente come test
di verifica per il cancro dello stomaco (disturbi gastrointestinali superiori),
perché l’emoglobina umana proveniente dal tratto superiore dell'apparato
digerente è digerita nel tratto intestinale con conseguente perdita dell‘
antigenicità.
Nel Colon Panel la determinazione della transferrina fecale, che è più stabile
nelle feci rispetto all’emoglobina, associata alla determinazione dell’Emoglobina
offre un metodo alternativo per la diagnosi differenziale della malattia sia del
tratto superiore che inferiore dell'apparato digerente.

Escherichia coli O157:H7 è un sierotipo enterico del batterio
Escherichia coli, di solito è causa di malattia attraverso il consumo di
alimenti contaminati sia vegetali che animali.
La trasmissione avviene per via oro-fecale o per contatto orale con
superfici contaminate. L'infezione può portare a diarrea emorragica e
insufficienza renale.
È un batterio altamente virulento, con una dose infettiva basso: un
inoculo di meno di 10 a 100 UFC di E. coli O157: H7 è sufficiente a
causare l'infezione per oltre un milione di UFC rispetto ad altri ceppi
patogeni di E. coli.

L’ infezione da E. coli O157: H7 è causa di una grave diarrea emorragica
acuta accompagnata da crampi addominali. Di solito è presente poca o
nessuna febbre, e la malattia nella fase lieve si risolve da cinque a 10
giorni. Può anche essere asintomatica.
In alcune persone, soprattutto i bambini sotto i cinque anni di età e gli
anziani, l'infezione può causare la sindrome emolitica uremica (HUS), in
cui i globuli rossi sono distrutti ed i reni non riescono più a svolgere un
azione filtrante
Circa 2-7% delle infezioni portano a questa complicanza. Negli Stati
Uniti, HUS è la principale causa di insufficienza renale acuta nei bambini,
e nella maggior parte dei casi di HUS sono causati da E. coli O157: H7.

CONSIDERAZIONI
• Per coloro che soffrono di disturbi intestinali è possibile quindi
effettuare il Colon Panel unico sistema in grado di poter
determinare in soli 5 minuti la presenza o assenza di test quali
calprotectina fecale e lactoferrina esami in grado di distinguere,
nei pazienti con disturbi intestinali, quelli che soffrono di una
patologia organica (Malattie infiammatorie croniche intestinali)
da quelli che soffrono di una malattia funzionale (Sindrome
dell'intestino irritabile) e permette di seguire il decorso della
malattia nei pazienti che sono affetti da queste patologie.
• Colon Panel Permette inoltre di valutare lo stato infiammatorio
della mucosa intestinale causato da una tossinfezione
alimentare causata da Escherichia Coli 0157 senza ricorrere a
indaginosi esami colturali.
• La possibilità inoltre di poter monitorare la presenza di sangue
occulto discriminando l’origine del sanguinamento è un mezzo
di grosso ausilio al medico nella fase delicata della diagnosi
iniziale

GRAZIE