Report Centro 2005 - Centro Regionale Veneto Fibrosi Cistica

Centro Fibrosi Cistica - Regione Veneto
REPORT DELLE ATTIVITA’ 2005
PROGRAMMA 2006
Relazione annuale delle attività a cura di
BM. Assael, direttore del Centro
P. Iansa, Servizio Informatica
Questo testo è pubblico e i dati riportati possono essere citati come appartenenti al
Database Cfcverona, 2005.
Il contenuto è accessibile e scaricabile attraverso il sito web www.cfcverona.it
Non sono disponibili versioni cartacee oltre a quelle direttamente inviate dal Centro.
1

INDICE
INTRODUZIONE E STRATEGIE DI SVILUPPO DEL CENTRO FIBROSI CISTICA DI
VERONA...................................................................................................................................................... 3
STRUTTURA ORGANIZZATIVA E ORGANIGRAMMA.................................................................. 4
DATI STATISTICI GENERALI DEL CENTRO................................................................................. 5
Distribuzione dei pazienti per caratteristiche demografiche................................................... 5
Distribuzione dei pazienti per caratteristiche cliniche .............................................................. 7
SERVIZIO INFORMATICA................................................................................................................... 8
STRUTTURA FUNZIONALE SEMPLICE DI PEDIATRIA.............................................................11
ATTIVITA’ DI TRAPIANTO D’ORGANO......................................................................................... 12
PROGETTI DI COLLABORAZIONE INTERNAZIONALE............................................................ 13
Rotterdam ............................................................................................................................................ 13
Sidney.................................................................................................................................................... 13
Minneaplis-Toronto-Londra .............................................................................................................. 13
Toronto-Chappel Hill.......................................................................................................................... 13
CENTRO ITALIANO PER LA DIAGNOSI DI FORME ATIPICHE DI FIBROSI CISTICA .13
SERVIZIO DI GASTROENETROLOGIA .......................................................................................... 14
Progetti 2006 ...................................................................................................................................... 15
TEAM NUTRIZIONALE PEDIATRICO DELL’ AZIENDA OSPEDALIERA .................................................... 15
SERVIZIO SOCIALE............................................................................................................................. 15
Progetti 2006 ...................................................................................................................................... 16
SERVIZIO DI PSICOLOGIA CLINICA ............................................................................................ 19
Progetti 2006 ......................................................................................................................................20
SERVIZIO CONSULENZA GENETICA............................................................................................. 21
Attività di ricerca legata alla consulenza genetica..................................................................... 21
Progetti 2006 ......................................................................................................................................22
PROGETTI COLLABORATIVI INTERNAZIONALI E ATTIVITA’ NELL’AMBITO DI
SOCIETA’ INTERNAZIONALI ..........................................................................................................22
CF aging group .....................................................................................................................................22
ECFS Neonatal Screening Working Group....................................................................................22
Ruolo della risonanza magnetica nucleare nell’imaging del polmone ........................................23
LABORATORIO DI PATOLOGIA MOLECOLARE...........................................................................23
Attività di diagnostica genetico-molecolare. ...............................................................................23
Progetti di ricerca..............................................................................................................................24
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INTRODUZIONE E STRATEGIE DI SVILUPPO DEL CENTRO
FIBROSI CISTICA DI VERONA
Nel corso del 2005 il Centro Fibrosi Cistica di Verona si è confermato Centro di
riferimento nazionale per la Fibrosi Cistica proseguendo l’aumento della casistica,
anche per pazienti provenienti da fuori regione. Il Centro si propone di continuare a
rappresentare un programma avanzato di assistenza per i pazienti italiani e di
rafforzare, con programmi collaborativi, la propria collocazione a livello internazionale.
Il prossimo anno sarà quello della ristrutturazione del Centro che prevede:
• Completo rifacimento del settore delle degenze con stanze singole dotate, tutte,
di servizi
• Creazione di un’area pediatrica autonoma per ricoveri e ambulatori
• Spostamento del laboratorio di Patologia Molecolare nel Laboratorio Centrale
dell’Ospedale
• Ristrutturazione e ammodernamento della rete informatica
Il rinnovamento logistico permetterà di sostenere importanti innovazioni dal punto di
vista sanitario e scientifico. In particolare gli obiettivi sono:
• Rafforzamento della struttura assistenziale al bambino con programmi autonomi di
ricerca clinica
• Sviluppo di un processo di screening-patologia molecolare-genetica a cavallo fra
diverse Unità Operative nell’ambito dell’Azienda Ospedaliera
• Miglioramento delle modalità di follow-up dei pazienti ambulatoriali con il
potenziamento dell’informatica
• Creazione di un Centro per la diagnosi delle forme atipiche
• Creazione e sviluppo di un Centro per la ricerca clinica in Fibrosi Cistica
• Creazione di due nuove aree assistenziali:
- Paziente adolescente
- Ambulatorio nutrizionale/metabolico per pazienti diabetici, con
problemi nutrizionali o con osteoporosi
Progetto di particolare importanza è quello della creazione di un Centro per la diagnosi
di forme atipiche che si baserà su una sinergia fra diagnostica molecolare e
introduzione di nuove forme di diagnostica elettrofisiologia di cui il nostro Centro
sarà dotato nei primi mesi del 2006. Questo progetto permetterà di inserire il Centro
di Verona in una rete di Centri europei e mondiali in grado di valutare l’efficacia a
livello clinico di nuove terapie. Il progetto viene presentato in maggior dettaglio
separatamente. Strategicamente, questo dovrebbe rappresentare il nucleo di un
programma di ricerca clinica di interfaccia fra ricerca di base e sviluppo di protocolli
di fase 2-3 nel paziente per ora molto carenti in Europa.
3

La necessità di un Centro simile è sottolineata dal fatto che la ricerca di base si
appresta a rendere disponibili vari farmaci di nuova concezione in grado di attivare o
potenziare la proteina CFTR. Parallelamente, sono disponibili nuovi antibiotici e nuovi
farmaci antinfiammatori con potenziale uso nella Fibrosi Cistica. Manca, tuttavia, una
corrispondente capacità dei Centri Fibrosi Cistica europei di reclutare pazienti e di
sviluppare ricerca clinica. Ciò rende difficili e prolunga notevolmente gli studi clinici.
Negli Stati Uniti la Cystic Fibrosis Foundation ha promosso la creazione di una rete di
Centri Clinici per la sperimentazione sul paziente di nuovi farmaci. A livello europeo,
malgrado l’interesse dimostrato da alcuni Centri, la situazione resta particolarmente
critica e carente. Con questo nuovo progetto, il nostro Centro potrà entrare a far
parte di una rete di Centri per la sperimentazione clinica, avendo a disposizione tutti
gli strumenti, dalla diagnostica molecolare alle strumentazioni elettrofisiologiche e
radiologiche, per monitorare l’effetto di terapie.
STRUTTURA ORGANIZZATIVA E ORGANIGRAMMA
Cogliendo la richiesta dell’Azienda Ospedaliera di Verona, il Centro Fibrosi Cistica ha
adeguato la propria struttura organizzativa con l’istituzione di una Struttura Semplice
Funzionale, affidata al dott. D’Orazio per il settore pediatrico e di due posizioni di
alta specialità, assegnate a Marco Cipolli e Carlo Castellani per il programma di followup
dei pazienti ambulatoriali e per la genetica.
L’organigramma del Centro viene così modificato rispetto agli anni precedenti ed è
riportato nella Figura 1.
Figura 1. Organigramma del Centro
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Le scelte organizzative pregnanti degli anni scorsi sono state ulteriormente sostenute
nel corso di quest’anno e possono così essere riassunte:
• Continuità assistenziale e separazione di un ambulatorio pediatrico 0-15 anni con la
creazione di una Struttura Semplice Funzionale
• Sviluppo e sostegno del programma di trapianto polmonare
• Sviluppo di poli esterni - Servizio di Treviso
• Consulenza a distanza – Collaborazione con il Servizio Di Supporto di Cerignola
DATI STATISTICI GENERALI DEL CENTRO
Distribuzione dei pazienti per caratteristiche demografiche
La casistica di pazienti seguiti dal Centro Fibrosi Cistica di Verona è in costante
aumento, proseguendo lo storico andamento in crescita. Stazionario il numero di
pazienti da fuori Regione. Tuttavia, per un accordo con il Servizio di supporto di
Cerignola, il nostro Centro fornisce una consulenza a distanza, arrivando a ridurre
sostanzialmente il numero di pazienti provenienti dalla Puglia.
Aumenta sostanzialmente il numero di pazienti adulti e vi è un aumento di pazienti di
oltre 30 anni di età che complessivamente superano il 25% della casistica (Fig. 2).
Figura 2 - Distribuzione per gruppi di età dei pazienti seguiti dal Centro
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Figura 3 - Affluenza dei pazienti per Regione di provenienza
Fig. 4 - Distribuzione percentuale dei pazienti provenienti da altre Regioni
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Fig.5 - Nuove diagnosi di pazienti veneti per anno dal 1990 al 2005
Distribuzione dei pazienti per caratteristiche cliniche
La Figura 6 mostra la distribuzione percentuale dei pazienti per gravità funzionale. A
partire dal periodo 1995-2000 si assiste a una caduta tendenziale del numero di
pazienti con funzione respiratoria più compromessa.
Fig.6 – Distribuzione percentuale pazienti per gravità funzionale. Anni 1990-2005
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SERVIZIO INFORMATICA
L’informatizzazione al Centro Fibrosi Cistica è un aspetto essenziale del Centro per la
gestione organizzativa, l’assistenza al malato e l’elaborazione di dati clinici ed
epidemiologici. Il sistema informativo del Centro viene perciò arricchito ogni anno con
nuove procedure software e acquisizione o aggiornamenti hardware.
Nel corso del 2005 si è reso operativo il programma di cartella clinica elettronica
CAMILLA e a tale scopo è stato effettuato un lavoro accurato di aggiornamento e
sostituzione dei PC del Centro e di manutenzione della rete informatica.
La nuova cartella clinica è pratica e versatile nell’utilizzo e permetterà di
implementare nuove utili funzionalità per le pratiche amministrative del paziente,
come la possibilità di inviare i fax per le farmacia tramite il PC e le lettere di
dimissione via e-mail.
Progetti informatici 2006
1. Collegamento telematico con gli Ambulatori di supporto di Treviso e Trento per la
condivisione della cartella clinica informatizzata
2. Ristrutturazione della rete informatica del Centro
3. Acquisizione delle radiografia on-line dall’UO Radiologia e potenziamento delle
macchine poste negli ambulatori e in biblioteca
4. Upgrade software statistici
5. Rinnovo parco macchine Centro
6. Acquisizione referti di laboratorio on-line
7. Implementazione CAMILLA per invio fax alle farmacie di riferimento tramite PC e
lettera di dimissione tramite e-mail
8. Inserimento degli articoli di Bibliografia del Centro (articoli sulla malattia raccolti
negli ultimi 20 anni) su supporto informatico (CD)
9. Ricerca epidemiologico-statistica e informatica.
Condivisione cartella clinica informatizzata tra gli Ambulatori di supporto di
Treviso e Trento
Per migliorare il servizio al Paziente è stato concordata la disponibilità di un
ambulatorio all’interno del Presidio Ospedaliero di Treviso cui gli utenti possono
rivolgersi in caso di necessità. Poiché gli stessi pazienti possono afferire
indistintamente sia a Treviso che a Verona si rende necessaria la condivisione dello
strumento di lavoro utilizzato dal Centro da ben 15 anni: la cartella clinica elettronica
che raccoglie i dati del paziente e gestisce tutta la parte clinico-amministrativa,
dall’invio della lettera di dimissione, alla spedizione dei fax alle farmacie di
riferimento, ai futuri appuntamenti.
Il progetto è stato approvato nel corso del 2005, ma crediamo sia operativo all’inizio
del 2006. In seguito tale sistema potrà essere utilizzato da qualsiasi ambulatorio
decentrato. Sono necessarie a tale progetto alcune modifiche strutturali della
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cartella clinica, oltre all’intervento del Sistema Informativo aziendale per il
collegamento tra Verona e Treviso.
Ristrutturazione della rete informatica del Centro. Acquisizione lastre rx
on-line dall’UO Radiologia e potenziamento delle macchine poste negli
ambulatori e in Biblioteca
La rete informatica del Centro risale al 1990 circa e ormai non offre più le necessarie
garanzie di affidabilità e soprattutto riparabilità.
La ristrutturazione della rete sarà dunque l’obiettivo principale del 2006 e sarà in
parte sostenuta dall’Azienda anche perché da questo dipende l’acquisizione delle
lastre on-line, servizio che faciliterà il medico e tutti gli operatori del Centro,
riducendo notevolmente i tempi di visione dei referti.
È importante che nelle aree operative (ambulatori di DH, per cominciare), siano
presenti monitor a buona risoluzione e PC di media potenza. Per avere una buona
visione, al momento riteniamo opportuno proporre semplici monitor LCD, a 20” di
grandezza, collegati a PC di media potenza. Un unico monitor medicale per quanto con
prestazioni limitate sarà posto in Biblioteca per valutare casi che necessitino di un
controllo più accurato.
Upgrade software statistici
• Presso il Centro vengono utilizzati da anni i software di analisi statistica
SigmaPlot e SigmaStat. La versione attuale dei software è ormai incompatibile
con i nuovi sistemi operativi dei nuovi PC ed è necessario un aggiornamento.
• Il programma Banca DNA viene utilizzato da circa 10 anni dal Laboratorio di
Patologia Molecolare per archiviare i test genetici. Esso è stato creato con una
vecchia versione di Paradox, non più compatibile con gli standard attuali (SO
Windows 2000): per questo motivo è necessario aggiornarlo. Si prevede una
nuova versione con Access 2000, standard in uso presso il Servizio Informatica
del Centro, quindi facilmente aggiornabile e riparabile.
Rinnovo parco macchine del Centro secondo le tempistiche aziendali
Nel corso del 2005 è stata fatta richiesta all’Azienda Ospedaliera di sostituire alcuni
PC (10 ca) ormai obsoleti (risalgono al 1997). È stato garantito l’arrivo di 10 macchine.
Acquisizione referti di laboratorio on-line
Dovremo affrontare questo impegno con il Servizio Sistemi Informativi aziendale
all’inizio del 2006.
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Implementazione CAMILLA per invio fax alle farmacie di riferimento
tramite PC e lettera di dimissione tramite e-mail
Configurando opportunamente il software Camilla è possibile inviare le lettere di
dimissione tramite e-mail e i fax alle farmacie di riferimento.
Nel 2006 si implementerà questo processo di semplificazione dell’invio dei documenti,
al fine di ottimizzare il lavoro di segreteria.
Inserimento degli articoli di Bibliografia del Centro (articoli sulla malattia
raccolti negli ultimi 20 anni) su supporto informatico (CD)
Il progetto ha lo scopo di inserire in un CD tutta la Bibliografia del Centro dall’inizio
ad oggi (21000 articoli specialistici sulla Fibrosi Cistica e patologie affini). Tramite un
database di archiviazione degli articoli, che permetta una ricerca parametrizzata dei
singoli titoli, sarà possibile la lettura e la stampa degli articoli full text in
formato .pdf direttamente dal CD stesso. Questa operazione permetterà di eliminare
tutto il cartaceo ora archiviato nella biblioteca del Centro, e di offrire un servizio
pratico, veloce e all’avanguardia a chi avesse necessità di consultare gli articoli
raccolti dal Centro nel corso degli ultimi 20 anni.
Per tale progetto è necessaria la creazione di un database ad hoc e la possibilità di
caricarlo su un supporto CD autoinstallante. Gli articoli cartacei saranno convertiti in
formato pdf, dopo scannerizzazione e collegati al DB su supporto CD.
Ricerca epidemiologico-statistica e informatica
Il DB del Centro viene usato per ricerche epidemiologico-statistiche e sono
periodicamente create procedure informatiche utilizzate nel lavoro quotidiano dagli
operatori del Centro.
Sono in corso le seguenti ricerche epidemiologiche collaborative
• Fattori che influenzano la sopravvivenza dei pazienti con FC. Collaborazione con
Professoressa Valsecchi (Monza)
• Aging Group Internazionale. Epidemiologia dei pazienti FC che hanno superato i
40 anni di vita (Collaborazione con i Centri Adulti di Toronto, Minneapolis,
Londra)
• Registro italiano FC. Vengono periodicamente inviati i dati richiesti dal registro
• Registro Europeo FC. Il nostro Centro si è proposto come Centro collaborativo
italiano indipendentemente dal Registro italiano
• Ricerca collaborativa italiana sulle diagnosi FC in età adulta (Collaborazione con
dottoressa Bossi, Milano e dottoressa Padoan, Brescia)
• Ricerca collaborativa sull’voluzione della funzione epatica in pazienti trattati
con ac ursodeossicolico (Collaborazione con Professoressa Colombo, Milano)
• Ricerca collaborativa sull’accrescimento somatico in pazienti con FC
(Collaborazione con Prof. Milani, Istituto di Statistica Milano)
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• Ricerca collaborativa sull’evoluzione dell’epatopatia in pazienti con FC
(Responsabile Dott Cipolli, collaborazione con il Centro FC di Sidney, dott
Gaskin)
STRUTTURA FUNZIONALE SEMPLICE DI PEDIATRIA
Responsabile dott. Ciro D’Orazio
La creazione di una struttura dedicata al paziente pediatrico rappresenta una scelta
strategica degli ultimi anni.
Il bambino con fibrosi cistica viene seguito da una équipe dedicata con esperienza in
campo pediatrico.
Obiettivi principali
• Garantire al bambino e alla famiglia un’assistenza continuativa
• Garantire una segregazione stretta dei casi con infezione da Pseudomonas
• Mettere in atto programmi di eradicazione delle prime infezioni da
Pseudomonas aeruginosa
• Controllare in maniera costante l’insorgenza di infezioni e di complicanze
precoci della malattia
• Sviluppare metodi per la individuazione precoce dei casi a rischio,
• Sviluppare un programma di trapianto polmonare pediatrico.
I dati riportati nella Figura 7 mostrano che il numero di bambini a cui viene garantita
una continuità assistenziale da parte dell’équipe è in costante aumento.
La percentuale di pazienti non affetti da Pseudomonas aeruginosa è in continuo
aumento, e questo deve essere considerato un importante successo del programma
(Figura 8).
Fig.7 – Numerosità pazienti pediatrici. Anni 2002-2005
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Fig.8 – Riscontri di Pseudomonas aeruginosa nei pazienti pediatrici. Anni 2002-2005
ATTIVITA’ DI TRAPIANTO D’ORGANO
Responsabile dott.ssa Marisol Barao Ocampo
Il Centro FC di Verona pone fra le sue massime priorità la collaborazione con Centri di
trapianto. I pazienti vengono orientati nella scelta del Centro trapianti e viene dato un
pieno supporto sia nella fase pre-trapianto che post-trapianto (Tab. I).
Il Centro di Verona è prevalentemente collegato ai Centri chirurgici di Padova (Prof.
Rea), Bergamo (Dott. Colledan), Pavia (Dott. D’Armini), ma si prospettano
collaborazioni con l’ISMET di Palermo e con Centri Trapianto all’estero.
Tabella I. Attività di trapianto polmonare effettuata dal Centro Fibrosi Cistica negli anni 1999-2005
Centro Regionale Fibrosi Cistica Verona-Attività trapianto polmonare 1999-2005
Anno Inseriti in lista Trapiantati
Polm. CF Polm. Non CF Feg/ feg-polm
1999 10 - - 5
2000 14 1 1 fegato 7
2001 8 - 2 fegato-polmone 10 polmone + 1 fegato
2002 4 1 - 4 polmone + 1 fegato-polmone
2003 8 - - 5
2004 12 1 fegato-polmone 3
2005 14 11
TOTALE 70 2 4 46
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PROGETTI DI COLLABORAZIONE INTERNAZIONALE
Il Centro Fibrosi Cistica di Verona è fortemente orientato alla collaborazione con
Centri di livello mondiale ed è attualmente impegnato in programmi collaborativi con i
seguenti Centri.
Rotterdam
Sviluppo della diagnostica per immagini nella Fibrosi Cistica (tomografia ad alta
risoluzione- Risonanza magnetica nucleare) Questo progetto prevede la presenza di
uno specializzando in radiologia di Verona a Rotterdam per un anno.
Sidney
Collaborazione con K. Gaskin sull’evoluzione della malattia epatica.
Minneaplis-Toronto-Londra
Studio multicentrico sui pazienti di oltre 40 anni per descriverne le caratteristiche e
ricercare i fattori che favoriscono la longevità nella Fibrosi Cistica.
Toronto-Chappel Hill
È stata richiesta la collaborazione del nostro Centro per un allargamento dello studio
internazionale sui geni modificatori.
CENTRO ITALIANO PER LA DIAGNOSI DI FORME ATIPICHE DI
FIBROSI CISTICA
Responsabili Paola Melotti e Carlo Castellani
L’ aumento progressivo del numero di mutazioni ricercate insieme alla disponibilità di
nuove tecniche diagnostiche ha considerevolmente ampliato lo spettro clinico della
Fibrosi Cistica (FC), consentendo di identificare un numero non trascurabile di forme
atipiche o monosintomatiche. Queste risultano spesso caratterizzate da espressione
clinica respiratoria modesta, sufficienza pancreatica e concentrazioni di elettroliti nel
sudore normali o comunque non francamente patologici.
Tre esempi di queste forme sono l’atresia congenita dei dotti deferenti, le pancreatiti
croniche ed acute ricorrenti idiopatiche e le ipertripsinemie in neonati con test del
sudore negativo o borderline. Tutte e tre possono essere l’espressione fenotipica di
mutazioni del gene CFTR responsabile della FC. In tali casi la diagnosi, abitualmente
semplice da porre nelle forme classiche della malattia, può essere molto complessa. Il
ritardo nella diagnosi, o anche l’obiettiva impossibilità a formularla per mancanza di
mezzi, pesano negativamente nella storia del paziente, e possono impedire la messa in
atto di cure adeguate o di consulenza genetica.
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In seguito a tali considerazioni presso il Centro Fibrosi Cistica di Verona si è deciso di
creare un Centro per la Diagnosi di Fibrosi Cistica e Patologie Correlate. In
particolare a tale scopo si sta attuando un progetto mirato all’allestimento di tecniche
di diagnosi elettrofisiologica, per mettere a disposizione mezzi diagnostici in grado di
identificare tra i pazienti afferenti al Centro una popolazione con caratteristiche
atipiche di malattia. Questa verrà poi valutata clinicamente, al fine di meglio definire
lo spettro di manifestazioni di malattia.
L’obiettivo è creare una struttura in grado di gestire, a livello locale ma anche
nazionale, tutti gli aspetti della diagnosi, anche con risvolti di ricerca.
Si sta procedendo perciò ad acquisire competenze specifiche per diagnostica con
metodiche elettrofisiologiche. Per mettere a punto la misurazione di differenze di
potenziali elettrici nasali (NPD) sono in corso collaborazioni con i gruppi della dr.ssa
Pamela Zeitlin (Johns Hopkins Hospital, Baltimore, USA) e del dr. Maarten
Sinaasappel (Sophia Children Hospital, Erasmus Medical Center, Rotterdam, Olanda)
presso i quali la dr.ssa Paola Melotti è stata ospitata per periodi di formazione. Grazie
alla collaborazione con il gruppo olandese si apre inoltre la prospettiva di poter
effettuare presso il Centro Fibrosi Cistica di Verona anche misurazioni
elettrofisiologiche su mucosa intestinale.
Si sta procedendo all’acquisizione degli apparecchi necessari per l’allestimento e la
validazione della metodica di misurazione NPD presso il Centro. Si potrà poi procedere
al suo utilizzo per definizione diagnostica in pazienti del Centro Fibrosi Cistica di
Verona ai quali, per le loro caratteristiche, non è stato ancora possibile attribuire una
diagnosi adeguata.
L’attuazione del progetto apre la prospettiva di adeguarsi a linee guida e protocolli
stabiliti a livello internazionale per procedure diagnostiche non ancora disponibili in
Italia. Inoltre si considera rilevante che il conseguimento degli obiettivi di questo
progetto possa fornire nuove competenze per la ricerca clinica sulla FC, anche a livello
multicentrico. Risulterebbe infatti possibile valutare elettrofisiologicamente l’effetto
di terapie, nuove o già disponibili, per la FC. Questi nuovi approcci permetterebbero
anche di indagare nei pazienti possibili meccanismi d’azione di farmaci utilizzati o
proposti per la cura della FC.
SERVIZIO DI GASTROENETROLOGIA
Responsabile Marco Cipolli
Il Servizio di gastroenterologia del Centro conduce un ambulatorio comune con la
Clinica Pediatrica dell’Università in collaborazione con il dott. E. Valletta. Questo
ambulatorio segue pazienti pediatrici con patologia gastrointestinale (celiachia, MICI,
pancreas). Si è sviluppato un database comune dei pazienti e un sito web
gastroenterologia pediatrica (www.gastroped.it) in collaborazione con la Clinica
Pediatrica del Policlinico “G.B. Rossi”. Il sito è funzionante da quasi un anno e
comprende il data base dei pazienti celiaci seguiti dai due Centri.
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Progetti 2006
An evaluation of liver involvement in a screened cystic fibrosis population
over a 15-year period. A multicentre study.
Progetto collaborativo con il Department of Gastroenterology, Royal Alexandra
Hospital for Children, Camperdown, Sydney, Australia.
Responsabile per il Centro: Marco Cipolli
Collaboratori: Marina Bestini
Obiettivo: valutare la frequenza dell’epatopatia in una popolazione screenata alla
nascita e descriverne l’evoluzione clinica.
La raccolta dati è iniziata nei primi mesi 2005. Il progetto ha ricevuto finanziamento
da parte dell’Associazione Veneto FC. La dott.ssa Bertini si occupa della individuazione
dei pazienti da inserire nello studio, della raccolta dei dati e della creazione di un data
base. Tempi previsti: termine raccolta dati Febbraio-Marzo 2006; termine
elaborazione dati Estate 2006. Invio manoscritto per pubblicazione dati fine 2006-
inizio 2007.
Team Nutrizionale Pediatrico dell’Azienda Ospedaliera
Dal 2003 il TNP è attivo sui problemi della nutrizione artificiale domiciliare.
Nell’ Ottobre 2004 in collaborazione con la Direzione Sanitaria dell’ Az Osp si è
tenuto il 1° meeting del TNP. Nel 2005 si è discusso il progetto collaborativo con la
Direzione Infermieristica dell’Az Osp per la definizione di protocolli di lavoro
infermieristici comuni, in campo nutrizionale, tra le varie realtà pediatriche dell’Az
Ospedaliera. I dati del TNP di Verona sono stati esposti in due convegni a Ravenna e
Padova (Maggio-Giugno 2005).
SERVIZIO SOCIALE
Attività Servizio Pediatrico
Il servizio svolge attività di inquadramento-orientamento alla diagnosi Presa in carico
di casi “sociali” con elaborazione di progetti di sostegno al nucleo familiare in rete coi
servizi territoriali
Collaborazione con il Team per la NADP
Valutazione eleggibilità logistica per l’attivazione di NADP domiciliare e
organizzazione intervento a domicilio in collaborazione con le strutture territoriali
competenti
Consulenza sulla normativa vigente e le agevolazioni ottenibili dai familiari di minori
con necessità di interventi di nutrizione artificiale a domicilio
Elaborazione progetti di sostegno al nucleo in rete coi servizi territoriali e
volontariato
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Attivita’ rivolta ai pazienti adulti
Attività di consulenza sulla tematica del lavoro (inserimenti protetti, agevolazioni
per portatori di handicap, forme pensionistiche/previdenziali a
sostituzione/integrazione del reddito ecc.) Elaborazione di progetti di inserimento
lavorativo mirato in rete coi servizi territoriali Organizzazione cure domiciliari
(terapia antibiotica endovenosa; nutrizione artificiale, ossigenoterapia, NIV ecc)
Attività di consulenza ambulatoriale.
Progetti 2006
Pogetto 1 (Bortolameazzi – Bonomelli)
Pubblicazione di un libretto informativo per pazienti e familiari.
Premessa
Nel corso del 2005 si è proceduto alla sistematizzazione di tutte le informazioni di
carattere sociale di principale interesse per gli utenti del Centro nell’ambito di un
libretto di facile consultazione. Nel 2006 si ultimerà il progetto attraverso la
pubblicazione e la distribuzione del manuale.
Obiettivi
Diffondere informazioni corrette sulle agevolazioni cui, in base alla normativa vigente,
i pazienti con Fibrosi Cistica e loro familiari hanno diritto, sugli iter burocratici da
seguire per ottenerle e sugli uffici territoriali cui rivolgersi (nel Veneto)
Materiali e metodologie
• Ricerca sul territorio veneto volta all’individuzione di tutti i punti di
riferimento principali (Uffici Protesi, Uffici Invalidi Civili, UOIC, INPS,
Farmacie Ospedaliere, SIL ecc)
• Raccolta di tutte le informazioni in una pubblicazione suddivisa in 4 parti:
− Agevolazioni per pazienti con Fibrosi Cistica
− Agevolazioni specifiche per pazienti in età pediatrica
− Agevolazioni specifiche per pazienti adulti
− Principali riferimenti territoriali (Regione Veneto).
Risultati attesi
• Maggiore consapevolezza da parte di tutti gli utenti del Centro in merito
ai propri diritti
• Incremento qualità di vita del paziente e dei familiari
• Riduzione dei tempi di consulenza telefonica del Servizio.
Progetto 2 (Bortolameazzi)
Studio su scolarità - attività lavorativa – stato civile della popolazione CF adulta
residente in Veneto in carico al Centro.
Premessa
In seguito ai crescenti progressi ottenuti nella cura della Fibrosi Cistica ed al
conseguente innalzamento dell’aspettativa di vita dei pazienti, da qualche anno si
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egistra un progressivo aumento nell’inserimento lavorativo delle persone affette da
tale patologia nonché nelle scelte di vita volte ad un processo di emancipazione dalla
famiglia di origine. Vivere da soli (o in coppia) e, soprattutto, lo svolgimento di attività
lavorative regolari pongono, tuttavia, il difficile problema della conciliazione delle
esigenze di terapia con una presenza produttiva nel mercato del lavoro ed una
soddisfacente vita affettiva e di relazione. Nel corso del 2005, sulla base dei dati
sociali pubblicati dalla Cystic Fibrosis Foundation, si sono raccolti e analizzati i dati
sulla scolarità, l’occupazione e lo stato civile dei pazienti adulti residenti in Veneto in
carico al Centro. Nel 2006 ci si propone di continuare lo studio confrontando i dati
raccolti con quelli relativi alla popolazione veneta generale (fonte: Istat) nonché con
dati di ricerche sociali condotti all’estero su popolazioni CF.
Obiettivi
• Individuare eventuali distanze tra le scelte di vita dei pazienti con FC
rispetto ai coetanei ed analizzarne cause e significati.
• Elaborare linee guida condivise per il counselling sociale al paziente
adolescente e adulto (su cui confrontarsi coi Servizi Sociali degli altri Centri
CF italiani)
Materiali e metodologie
• Ricerca e studio dei dati ISTAT o di eventuali altre fonti (ancora da
individuare)
• Verifica ed eventuale ricerca nuove risorse normative per una migliore
gestione esigenze malattia / vita sociale
Risultati attesi
• Miglior orientamento del counselling fornito dal Servizio Sociale.
Progetto 3 (Bonomelli)
Indagine su eventuale rapporto tra situazione socio-economico-culturale-familiare del
paziente con Fibrosi Cistica in età pediatrica (0-6 anni) e l’andamento clinico della
malattia – III parte.
Premessa
Nel corso del 2003-2004 si è condotta una ricerca bibliografica volta
all’individuazione di indicatori che consentano di rapportare l’andamento clinico della
malattia col retroterra familiare, sociale, culturale ed economico degli assistiti. Dato
che la letteratura sulla Fibrosi Cistica contiene scarsissimi studi di matrice
esclusivamente sociale, si è dovuto prendere spunto anche da indagini condotte su
altre patologie croniche (tumore, AIDS ecc.). Sulla base degli esiti di tale ricerca è
stato elaborato un questionario da sottoporre ai genitori dei pazienti in età pediatrica.
Nel corso del 2005 il questionario è stato somministrato a tutti i genitori dei pazienti
attualmente seguiti dal settore Pediatrico di età compresa tra gli 0 e i 6 anni. Nel
2006 lo studio sarà concluso attraverso il confronto tra dati sociali raccolti e
andamento clinico dei pazienti.
Obiettivi
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• Individuare eventuali fattori di rischio di tipo sociale rispetto alla
compliance terapeutica
• Migliorare il monitoraggio di situazioni sociali che tendenzialmente
potrebbero portare ad evoluzioni peggiorative della malattia
Materiali e metodologie
• Questionario da somministrare ai genitori di pazienti seguiti in Settore
Pediatrico
• Studio ed elaborazione dei dati raccolti
Risultati attesi
• Individuazione di fattori di rischio di tipo sociale rispetto alla compliance
terapeutica nel nucleo familiare del paziente
• Progettazione di interventi sociali di tipo preventivo, basati sul monitoraggio
costante dei fattori di rischio individuati nell’indagine, nell’ambito di una
presa in carico globale del paziente.
Progetto 4 (Bortolameazzi – Bonomelli)
PC portatili con accesso alla rete internet per pazienti ricoverati in regime di
isolamento.
Premessa
I pazienti ricoverati in regime di isolamento, impossibilitati a prendere parte alle
attività sociali organizzate all’interno del reparto, possono percepire, più degli altri, il
bisogno di mantenere i contatti con la propria realtà di vita quotidiana (scuola, lavoro,
rete amicale, affetti ecc.), inevitabilmente interrotti dalla degenza. Nel corso del
2005 si sono ricercate aziende disposte a donare pc portatili e, soprattutto, si è
tentato di sensibilizzare la Direzione dell’Azienda Ospedaliera al fine di ottenere
l’autorizzazione ad attivare la messa in rete dei pc donati. Non essendo possibile
ottenere tale autorizzazione, nel 2006 si tenterà di perseguire lo scopo attraverso
l’utilizzo di carte pre-pagate, gestite da vari operatori di telefonia mobile, da inserire
nei singoli pc portatili.
Obiettivi:
• Facilitare la comunicazione del paziente ricoverato con l’ambiente esterno
• Offrire momenti di svago ai pazienti ospedalizzati
• Permettere al paziente studente o lavoratore di mantenere i contatti
necessari con la propria attività scolastica o lavorativa
Materiali e metodologie:
• Avvio e gestione contatti con operatori di telefonia mobile
• Coinvolgimento dei medici del Centro nello studio di metodologie che
riducano il rischio di diffusione di germi patogeni in reparto a mezzo dei pc,
spostati di stanza in stanza
Risultati attesi
• Miglioramento della qualità della degenza in ospedale
18

SERVIZIO DI PSICOLOGIA CLINICA
Responsabile: Sandra Perobelli
L’attività del Servizio di Psicologia Clinica si può suddividere in tre aree principali:
1. l’attività clinica con interventi sia di follow up periodico, a scopo preventivo, sia
di risposta a richieste espresse dal paziente/famiglia di fronte a comparsa di
sintomi di disturbo psichico;
2. l’attività di ricerca su tematiche specifiche;
3. l’attività di formazione per il personale di assistenza.
In sintesi, qui di seguito è riassunto lo stato di realizzazione del programma formulato
per il 2005
Attività 2005 - Fibrosi Cistica
Attività clinica
Nel corso del 2005 sono stati finora circa 130 i pazienti/genitori che si sono rivolti
spontaneamente al Servizio per situazioni problematiche di vario tipo (Tabella I). Si
tratta di un dato piuttosto costante nel tempo (all’incirca 140-150 pazienti/anno).
Tab. I – Numero ed età dei pazienti/famiglie che hanno richiesto spontaneamente le prestazioni del
Servizio di Psicologia Clinica
pazienti settore pediatrico
n.° 45
In età prescolare
n.° 25
In età scolare
n.° 20
pazienti settore adulti
n.° 75
Adolescenti
n.° 15
Adulti
n.° 60
Un terzo di queste richieste è stata posta da famiglie afferenti al settore pediatrico,
che presentavano difficoltà di adattamento alla diagnosi da parte di uno o entrambi i
membri della coppia genitoriale, disturbi emotivi e/o del comportamento nel bambino,
problemi di compliance terapeutica.
Per quanto riguarda i pazienti adolescenti/adulti, la valutazione clinica ha messo in
evidenza situazioni patologiche compatibili con una diagnosi secondo DSMIV in circa la
metà dei casi, con una prevalenza di disturbi di tipo depressivo. In due casi (un
adolescente e un adulto) si è reso necessario il ricovero in struttura specialistica in
seguito a gravi comportamenti autolesivi. Circa il 15% ha avuto bisogno anche di una
terapia farmacologica ansiolitica/antidepressiva, dopo consulenza psichiatrica.
Progetti specifici
Cartella informatizzata → Avviata con l’inserimento dei dati dell’archivio cartaceo.
Area pediatrica
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Clinica: identificazione casi a rischio di disagio psicosociale, con particolare
attenzione per i disturbi del comportamento alimentare (V. in “attività clinica”).
Elaborato il protocollo diagnostico e le scale di valutazione sia dello sviluppo generale
che relative al comportamento alimentare.
Ricerca: studio sulle problematiche del comportamento alimentare → non realizzato
per interruzione borsa di studio.
Area adolescenti
Clinica: consulenza alle famiglie e ai ragazzi in età adolescenziale limitatamente alle
richieste spontanee di intervento (V. in “attività clinica”)
Ricerca: validazione strumento di Qualità di vita (in collaborazione con Centro Cesena)
→ sospesa l’attività a Cesena.
Area trapianti
Clinica: attività di valutazione, presa in carico e supporto dei casi da avviare al Tx : nel
2005 inseriti in lista d’attesa n. 15 pazienti
Ricerca: Impatto del Tx polmonare sulla qualità di vita → raccolta dati su nuovi
pazienti inseriti in lista d’attesa e su pazienti trapiantati dopo 6-12 mesi
dall’intervento.
Ricerca “EXERCISE”
A ottobre 2005 sono stati inseriti 16 pazienti.
Attività di supporto alle Associazioni di volontariato FC
Partecipazione al Direttivo Associazione Veneta + incontri divulgativi sulle attività del
Centro con comitati locali.
Nutrizione artificiale
Componente del Team Aziendale per la Nutrizione Artificiale Pediatrica a Domicilio:
• partecipazione alle riunioni mensili del team
• valutazioni psicologiche dei casi segnalati.
Malattie rare
Sindrome di Shwachman e sviluppo psicologico: valutazione psicocognitiva dei casi in
carico al Centro (n. 15).
Progetti 2006
Espansione del database psicologico su pazienti/famiglie. L’obiettivo è di arrivare a
raccogliere nella cartella informatizzata CAMILLA dati su sviluppo psicologico,
presenza di disturbi emotivi, livello di adattamento alla malattia e alle cure, condizioni
psicologiche familiari, qualità di vita, sia attraverso l’attività clinica che con apposito
follow up e con progetti di ricerca su tematiche specifiche. In particolare nel 2006, vi
saranno collegati due progetti di studio:
20

• Come crescono i bambini con FC nei primi anni di vita (collaborazione da
parte operatori medici e infermieri del settore pediatrico)
• L’adolescenza è un’età a rischio (collaborazione da parte del dr. R.
Palminteri)
• Trapianto polmonare e qualità di vita
Si prevede di organizzare un ulteriore follow up al 2006 e una elaborazione
dei dati preliminare alla possibilità di pubblicazione (in collaborazione con la
dr.ssa M. Ocampo).
La ricerca Exercise dovrebbe ultimare la raccolta della casistica nel 2006
(coordinatore della ricerca dr. C. Braggion): sarà così possibile l’elaborazione dei dati.
Nell’ambito della SDS, prosegue l’applicazione del protocollo di ricerca per la
valutazione dello sviluppo psico-cognitivo, progetto di collaborazione ad una
pubblicazione su proposta del Prof. P. Durie.
SERVIZIO CONSULENZA GENETICA
Responsabili: Carlo Castellani- Paola Melotti
Il Centro offre consulenza genetica e orientamento per la diagnosi pre e post natale
della Fibrosi Cistica a singole persone o copie. Il Servizio di consulenza genetica si
avvale delle strutture diagnostiche del laboratorio di patologia molecolare, con cui
sviluppa il programma di screening neonatale della Regione del Veneto.
Nel corso dell’anno 2006 verrà intrapreso lo sviluppo di un Centro per la diagnosi di
forme atipiche di Fibrosi Cistica.
Attività di ricerca legata alla consulenza genetica
• Demo programma per computer interattivo che possa fornire informazioni sulla
Fibrosi Cistica, il suo rischio genetico ed il test per il portatore
• Richiesta finanziamento per il sovracitato progetto a EuroGeneTest;
approvazione del progetto da parte di CF Worldwide
• Progetto inviato ed accettato da Fondazione Italiana Fibrosi Cistica: A NEW
APPROACH FOR NONINVASIVE PRENATAL DIAGNOSIS OF CYSTIC
FIBROSIS BY FETAL DNA ANALYSIS IN MATERNAL PLASMA
• Presentazione: Genotipo vs fenotipo: a che punto siamo. Convegno Le molte
facce della Fibrosi Cistica: confronto tra specialisti, Trieste 9-10 settembre
2005.
• Presentazione Consulenza genetica per Fibrosi Cistica: la verifica della diagnosi,
l’informazione sulla clinica e sulla prognosi, I° congresso nazionale SIFC, Roma
1-3 dicembre 2005.
• Presentazione Mutazioni del gene CFTR e sterilità maschile, I° congresso
nazionale SIFC, Roma 1-3 dicembre 2005
21

• Poster Prospettive terapeutiche per la Fibrosi Cistica da cellule staminali:
raccolta dedicata di sangue di cordone ombelicale VIII° Congresso Nazionale
Società Italiana di Genetica Umana, Chia Laguna, Cagliari, 28-30 settembre
2005.
Progetti 2006
• Sviluppo del programma Computerized Interactive Genetic Counselling (se
finanziato), ed eventuale valutazione con studio randomizzato dell’efficacia,
paragonandolo con sessioni classiche di consulenza genetica.
PROGETTI COLLABORATIVI INTERNAZIONALI E ATTIVITA’
NELL’AMBITO DI SOCIETA’ INTERNAZIONALI
Il Centro di Verona privilegia i rapporti con Centri di eccellenza a livello mondiale e
sono in corso collaborazioni con i Centri di Toronto, Sidney, Londra, Rotterdam,
Minneapolis.
Il Centro partecipa attivamente all’attività di Società Scientifiche internazionali come
la European Respiratory Society e la European Society for Cystic Fibrosis.
Carlo Castellani fa parte del Board della European Cystic Fibrosis Society.
Marco Cipolli è Chairman del Medical and Scientific Advisory Board (MSAB) dell’
Associazione N. Americana della Sindrome di Shwachman (SDSFound).
CF aging group
Responsabile per il Centro Carlo Castellani
Su iniziativa di un gruppo internazionale promosso dai Prof. Warwick (Minneapolis) e
Dodge (Inghilterra) si è costituito un gruppo collaborativo a cui hanno dapprima
aderito Londra (Dott. Hodson), Toronto (Dott. Corey) e Verona. Questo gruppo si
propone di descrivere le caratteristiche genetiche e cliniche dei pazienti con FC che
hanno superato i 40 anni di vita.
Lo studio verrà successivamente allargato a chi, nel mondo, volesse parteciparvi.
Le dottoresse Corey e Hodson stanno estendendo un primo rapporto del Gruppo da
sottoporre per la pubblicazione.
ECFS Neonatal Screening Working Group
Responsabile per il Centro Carlo Castellani
Azioni/Prodotti
• Censimento dati europei
• creazione sottogruppi di lavoro application EuroCFCare, 6 th European
framework, in veste di leader per il sottogruppo di ricerca clinica sullo
screening neonatale
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• Presentazione A survey on CF neonatal screening practice around Europe, 28 th
ECFS Conference, Crete 22-25 June
• Presentazione A survey on CF neonatal screening practice around Europ,e 4 th
European meeting of the International Society for Neonatal Screening, Paris
5-6 September 2005
• Poster L’analisi di mutazioni nello screening neonatale per Fibrosi Cistica:
censimento europeo, VIII° Congresso Nazionale Società Italiana di Genetica
Umana, Chia Laguna, Cagliari, 28-30 settembre 2005.
Sviluppo
• 2006 Organizzazione di meeting dell’ECFS NBS WG a Verona nella prima metà
dell’anno.
Ruolo della risonanza magnetica nucleare nell’imaging del polmone
Responsabile BM Assael
Il progetto viene condotto in collaborazione con l’Istituto di Radiologia dell’Università
di Verona e con Harm Tiddens del Centro FC di Rotterdam. Si propone di ottimizzare
l’uso della RMN per lo studio della progressione del danno nel paziente con FC.
Uno specializzando in pediatria dell’Università di Verona sta sviluppando il protocollo e
ottenendo dati preliminari. Il protocollo sarà presentato entro gennaio 2006 e la
ricerca sarà sviluppata in parte a Verona e in parte a Rotterdam.
LABORATORIO DI PATOLOGIA MOLECOLARE
Attività di diagnostica genetico-molecolare
Negli ultimi 12 mesi, i test standard per la ricerca delle mutazioni CF più comuni
(analisi genetiche di primo livello) sono stati circa 1140, di questi: 600 nell'ambito
dello screening neonatale e 540 per la diagnostica tradizionale nei pazienti e nei loro
familiari.
Continua lo sviluppo dei nuovi protocolli per le analisi genetiche di livello superiore, che
in futuro comprenderanno: analisi D-HPLC e sequenziamento diretto dell’intera
porzione codificante, ricerca dei riarrangiamenti del gene e analisi dell’mRNA.
La messa a punto dell’analisi D-HPLC è già stata realizzata in tutti gli esoni,
utilizzando circa 120 controlli positivi per altrettante mutazioni.
Per stimare il detection rate del test, basato sul D-HPLC, è stato studiato un
campione di pazienti originario del nostro territorio (160 soggetti per il veneto e 90
per le province di Trento e Bolzano). Per i pazienti di origine veneta, il detection rate
è stato stimato di poco superiore al 95%, per quelli del Trentino Alto Adige è
prossimo al 100%.
In generale, è possibile affermare che il detection rate dipende, sia dalla sensibilità
della metodica D-HPLC, sia dalla frequenza dei riarrangiamenti del gene CFTR nelle
23

diverse aree geografiche e quindi, per i soggetti originari di altre regioni non è ancora
stato determinato.
La frequenza dei riarrangiamenti del gene CFTR nei pazienti veneti è stata studiata in
modo approfondito e i dati sono stati pubblicati sulla rivista European Journal of
Human Genetics. Nel nostro laboratorio sono state messe a punto le metodiche per
l’analisi diretta dei riarrangiamenti più frequentemente osservati (Dele17a-18, Dele1,
Dele2-3).
Progetti di ricerca
1. Ruolo dei recettori adenovirali nell’attivazione di segnali intracellulari coinvolti
nella risposta infiammatoria precoce, in cellule di origine epiteliale.
Role of Adenovirus receptors in the activation of Mitogen-Activated Protein Kinase
pathways and Nuclear factor –kB in human airway epithelial cells
Progetto finanziato dalla Fondazione Fibrosi Cistica # 4/2004
Responsabile: A. Tamanini
Collaboratori: P. Melotti, A. Bonizzato, E. Nicolis, C. Cigana (Laboratorio di Patologia
Molecolare - Centro Fibrosi Cistica)
Uno dei principali ostacoli alla applicazione della terapia genica della FC riguarda
l’induzione di una risposta immunitaria indesiderata. Abbiamo precedentemente
evidenziato che cellule respiratorie esposte ad Ad resi incapaci di trascrivere geni
vettoriali sono comunque in grado di indurre segnali pro-infiammatori. Obiettivo del
progetto è identificare quali delle componenti del vettore (esone, base pentonica,
fibra) e quali recettori cellulari (CAR, eparan solfati, integrine) sono responsabili della
fase iniziale della risposta immunitaria. Nella prima fase del progetto sono state
preparate e purificate le diverse componenti del vettore e la parte extracellulare del
recettore CAR. Nella seconda fase del progetto, sono state studiate le principali vie
di trasmissione del segnale intracellulare (MAPKs) ed un fattore chiave per la
regolazione della trascrizione di geni coinvolti nella risposta infiammatoria (NF-kB). I
risultati hanno evidenziato che la fibra del vettore induce segnali pro-infiammatori,
precoci ed indipendenti dalla espressione di geni vettoriali, tramite il legame al
recettore CAR, mentre questo non avviene per gli altri componenti e recettori. Questi
risultati sono utilizzabili sia per disegnare nuovi vettori sia per studiare differenti
vettori che utilizzano gli stessi recettori cellulari degli Ad, allo scopo di correggere il
difetto genetico nella FC ottimizzando il rapporto tra efficienza e sicurezza.
2. Interazioni in vitro tra batteri patogeni della Fibrosi Cistica e cellule
epiteliali che esprimono la proteina CFTR
Interaction in vitro between cystic fibrosis pathogens and epithelial cells expressing
the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)
Progetto finanziato dalla Fondazione Fibrosi Cistica # 14/2004
24

Responsabile: M.C. Dechecchi
Collaboratori: Elena Nicolis, Federica Quiri, Gabriella Bertaso (Laboratorio di
Patologia Molecolare - Centro Fibrosi Cistica), Maria Grazia Giri (Servizio di Fisica
Sanitaria, Azienda Ospedaliera di Verona), Frederic Becq (Università di Poitiers,
Francia).
Scopo del progetto
Studiare la relazione tra difetto di maturazione di CFTR mutata e risposta
infiammatoria all’infezione da Pseuomonas Aeruginosa (PA) in cellule epiteliali
respiratorie FC.
Metodologia
È stato precedentemente messo a punto un modello di studio che utilizza linee
cellulari esprimenti la proteina CFTR normale o mutata, infettate con il ceppo PAO1.
La risposta delle cellule all’infezione è stata studiata analizzando con PCR real-time,
l’espressione di mRNA di ICAM-1 e di IL-8 dopo 4 ore d’infezione. Precedentemente
abbiamo dimostrato che PAO1 attiva una risposta marcatamente più elevata in cellule
FC IB3 (genotipo DF508/W1282X), in confronto con quelle corrette con CFTR w/t,
S9. Abbiamo esteso lo studio ad un altro modello respiratorio: le cellule CuFi-1,
ottenute da epitelio bronchiale di un paziente FC (genotipo DF508/DF508) e le cellule
NuLi-1, ottenute da un soggetto non FC. Queste linee cellulari ci sono state fornite da
A. Klingelhutz e J. Zabner (University of Iowa Research Foundation). La relazione tra
difetto di maturazione di CFTR e risposta infiammatoria è stata studiata sia in cellule
IB3 che in cellule CuFi-1, utilizzando MPB-07, un composto appartenente alla famiglia
dei benzo(c)chinolizinici (MPB), che sono stati descritti essere sia attivatori
funzionali [ Becq F. et al, J. Biol. Chem. 1999, 274, 39, 27415-27425] che potenti
correttori della localizzazione di CFTR [Dormer R.L. et al, J Cell Science 2001, 114,
4073-4081], in collaborazione con F. Becq dell’Università di Poitiers in Francia.
Abbiamo studiato l’effetto del trattamento con MPB-07 sulla risposta all’infezione
con PAO1 in cellule IB3, CuFi-1 e NuLi-1. Parallelamente abbiamo testato gli effetti
sulla funzione di CFTR, con analisi d’immagine in singola cellula, utilizzando una sonda
fluorescente sensibile al potenziale di membrana DiSBAC2(3) [Renier M. et al, Human
Gene Ther. 6: 1275-1283, 1994].
Risultati
a) nelle cellule FC CuFi-1 abbiamo dimostrato che l’infezione con PAO1 attiva una
risposta marcatamente più elevata in confronto con quella osservata in cellule non FC,
NuLi-1, confermando il difetto di risposta infiammatoria esagerata rispetto allo
stimolo, in presenza di CFTR DF508, come già avevamo osservato in cellule IB3 e C127
b) sia in cellule IB3 che in cellule CuFi-1, MPB-07 riduce significativamente
l’espressione di mRNA di ICAM-1 e di IL-8, indotta da PAO-1. Non si osservano
effetti apparenti in cellule NuLi-1
c) il trattamento delle cellule FC con MPB-07 ripristina la funzione di trasporto di
cloro CFTR-dipendente.
25

Conclusioni
Nei modelli cellulari FC, MPB-07 ha un effetto anti-infiammatorio e corregge il
difetto funzionale di CFTR. Non è noto, al momento, il suo meccanismo d’azione, ma
riteniamo che MPB-07 possa essere uno strumento utile per approfondire la relazione
tra difetto di maturazione di CFTR DF508 e risposta infiammatoria all’infezione con
PA nelle cellule FC.
3. Strategie innovative per la diagnosi e terapia della Fibrosi Cistica
Novel diagnostic and therapeutic approaches for cystic fibrosis
Sottoprogetto: Utilizzo di molecole decoy, specifiche per NF-kB, per inibire la
risposta infiammatoria all’infezione da PAO1, in cellule FC
Responsabile: R. Gambari (Dip. di Biochimica e Biologia Molecolare, Università di
Ferrara)
Responsabile Sottoprogetto: G. Cabrini
Progetto finanziato dalla Fondazione Fibrosi Cistica # 15/2004
Collaboratori: V. Bezzerri, M.C. Dechecchi, E. Nicolis, F. Quiri, (Laboratorio di
Patologia Molecolare - Centro Fibrosi Cistica), M. Borgatti e R. Gambari (Dip. di
Biochimica e Biologia Molecolare - Università di Ferrara).
Include Tesi di Laurea in Biotecnologie Farmaceutiche – Università di Ferrara di
Valentino Bezzerri (relatore R. Gambari, correlatore G. Cabrini) da discutere nella
sessione autunnale 2005
Scopo del progetto
Studiare se molecole decoy per NF-kB sono in grado di inibire la risposta
infiammatoria attivata da esposizione a PA, in cellule FC.
Metodologia: è stato utilizzato il modello cellulare FC, IB3, che abbiamo
precedentemente dimostrato esprimere livelli molto elevati di mRNA di ICAM-1 e di
IL-8, dopo infezione con PAO1. Le cellule sono state trasfettate con decoy per NF-kB,
30 ore prima dell’infezione. L’efficacia del protocollo di trasfezione è stata testata
con decoy fluorescente.
Risultati
a) la procedura di trasfezione utilizzata permette l’internalizzazione del decoy
fluorescente e quindi si considera efficiente;
b) molecole decoy per NF-kB, inibiscono in cellule IB3 l’espressione di IL-8 indotta da
PAO1.
Conclusioni
Abbiamo dimostrato che decoy specifici possono inibire l’attività del fattore di
trascrizione NF-kB. Questi risultati rappresen tano una premessa molto importante
per sostenere lo sviluppo di nuove molecole nella terapia delle manifestazioni proinfiammatorie
associate a FC
26

4. Dissezione di processi di conformazione della proteina CFTR in cellule
CFTR normali e con mutazione DF508. Uso di tossine disarmate per colpire
le molecole “chaperones” ed assistere la conformazione e l’espressione di
DF508
Dissection of folding/defolding processes in CFTR and F508-CFTR cells. Use of
disarmed toxins to target chaperones and assist refolding and expression of F508-
CFTR.
Progetto finanziato dalla Fondazione Fibrosi Cistica # 1/2004
Responsabile: M. Colombatti (Dip. Patologia, Sezione di Immunologia, Università di
Verona)
Sottoprogetto: Controllo funzionale di trasporto del cloro CFTR-dipendente dopo
trattamento di cellule FC con correttori del traffico intracellulare
Responsabile Sottoprogetto: G. Cabrini
Collaboratori: Maria Cristina Dechecchi, Federica Quiri (Laboratorio di Patologia
Molecolare - Centro Fibrosi Cistica ), Matteo Pasetto e Marco Colombatti
(Dipartimento di Patologia, Sezione di Immunologia, Università di Verona)
Scopo del progetto
Lo studio propone di utilizzare correttori del traffico di CFTR, coniugati a speciali
proteine per superare le barriere della membrana cellulare e concentrare in
compartimenti cruciali le sostanze farmacologicamente attive.
Metodologia: la fase preliminare dello studio ha visto la valutazione dell’effetto dei
correttori sulla funzione di CFTR, con analisi d’immagine in singola cellula, utilizzando
una sonda fluorescente sensibile al potenziale di membrana DiSBAC2(3) [Renier M. et
al, Human Gene Ther. 6: 1275-1283, 1994], in cellule FC IB3 e CuFi-1.
Risultati
a) il trattamento delle cellule CuFi-1 è con DSG (desossispergualina) per 48 ore,
ripristina la funzione di trasporto del cloro CFTR-dipendente;
b) risultati molto preliminari con coniugati DSG-HSA (human serum albumin) sembrano
indicare un effetto più consistente che non con DSG. I risultati necessitano ulteriori
conferme.
4. Un bio-sensore molecolare dell’immunità delle vie respiratorie:
applicazioni per la sicurezza di terapie innovative nella Fibrosi Cistica
Progetto Fondazione Cariverona (ex Bando ricerca scientifica del 2005 nell’ambito
della salute)
Responsabile Scientifico: G. Cabrini (Laboratorio di Patologia Molecolare - Centro
Fibrosi Cistica)
27

Il progetto intende mettere a punto un nuovo modello di studio molecolare della
immunità innata ed acquisita delle vie respiratorie FC utilizzando un sistema cellulare
sensore umano costituito da cellule respiratorie umane FC e cellule dell’immunità, sul
quale verificare la sicurezza di vettori per il trasferimento del gene normale e di
molecole organiche correttrici della proteina FC mutata.
L’attività sperimentale sarà rivolta allo studio della risposta infiammatoria ed
immunitaria nel trasferimento genico polmonare e nella correzione farmacologica della
FC.
Collaboratori: M.C. Dechecchi, A. Tamanini, E. Nicolis, F. Quiri (Laboratorio di
Patologia Molecolare - Centro Fibrosi Cistica), M. Colombatti, G. Bellisola, A. Vella, M.
Pasetto, R. Trani (Dip. di Patologia, Sezione di Immunologia, Università di Verona)
5. Vettori lentivirali di nuova generazione per la terapia genica della
Fibrosi Cistica: valutazione del potenziale infiammatorio
Novel generation lentiviral vectors: evaluation of inflammatory potential in human
respiratory cells.
Progetto finanziato dalla Fondazione Fibrosi Cistica # 4/2005
Responsabile: G. Cabrini
Collaboratori: Anna Tamanini, Elena Nicolis, Federica Quiri (Laboratorio di Patologia
Molecolare - Centro Fibrosi Cistica), Elena Copreni, Lucia Palmieri, Stefano Castellani,
Massimo Conese (Institute for Experimental Treatment of Cystic Fibrosis, H. S.
Raffaele, Milano)
Lo scopo del progetto è di studiare la sicurezza di vettori lentivirali di nuova
generazione disegnati per il trasferimento del gene corretto in cellule respiratorie
differenziate e progenetrici dei polmoni di pazienti CF.
Verrà studiata l’espressione proteica di molecole coinvolte nell’induzione della risposta
infiammatoria come ICAM-1 e IL-8 e i meccanismi intracellulari che potrebbero
essere coinvolti in tale induzione dopo l’esposizione delle cellule ai vettori lentivirali.
Gli adenovirus ricombinnati saranno usati come controlli di riferimento positivi.
6. The long pentraxin PTX3 in host resistance to infection and as a
candidate diagnostic and therapeutic agent in cystic fibrosis
Progetto Telethon 2005 # GGP05095
Responsabile: A. Mantovani (Dip. Immunologia e Biologia Cellulare – Ist. Mario Negri -
Milano)
Partner 2 - Responsabile: B.M. Assael (Centro Fibrosi Cistica)
Collaboratore Partner 2: G. Cabrini
28

7. Inibizione di NF-kB: un approccio anti-infiammatorio alla Fibrosi Cistica
Responsabile: Paola Melotti
Collaboratori: Cristina Cigana, Elena Nicolis, Gabriella Bergamini, Anna Tamanini,
Alberto Bonizzato, Federica Quiri, Baroukh Assael,;
Collaboratori esterni:
- Centro Interdipartimentale per la Ricerca sul Cancro - Università di
Ferrara: Massimo Negrini, Manuela Ferracin
- Istituto Tecnologie Biomediche, CNR- Segrate (MI): Pierluigi Mauri, Louise
Benazzi, FabrizioBasilico, Enrico Rosti
- Sez. Patologia Generale - Università di Verona: Claudio Sorio, Marzia
Vezzalini, Marco Della Peruta, Andrea Mafficini.
E’ stato descritto che l'eccessiva risposta infiammatoria nei pazienti affetti da
Fibrosi Cistica (FC) correla con un’eccessiva attivazione del fattore di trascrizione
nuclear factor-kB (NF-kB) associata ad uno squilibrato rapporto tra molecole proinfiammatorie,
come l'interleuchina 8 (IL-8), ed anti-infiammatorie, come
l'interleuchina 10 (IL-10), considerata una molecola anti-infiammatoria endogena
carente in FC.
Abbiamo verificato con saggi mediante “gene-reporter”, in cellule di epitelio
respiratorio FC, che la trascrizione di IL-8 è regolata da NF-kB oltre che da un altro
fattore di trascrizione, Activatory Protein-1 (AP-1). Si è intrapresa la messa a punto
dell’utilizzo, in modelli cellulari FC, del vettore adenovirale esprimente un inibitore
molecolare specifico del fattore di trascrizione NF-kB (ottenuto dal dr. Chettibi,
University di Aberdeen, UK). Dopo aver evidenziato che l’IL-10 riduce la produzione di
IL-8 a livello trascrizionale e proteico, abbiamo osservato che essa riduce anche
l’attivazione di NF-kB. Si stanno definendo stimoli pro-infiammatori rilevanti in FC.
Esperimenti preliminari stanno evidenziando effetti inibitori dell’IL-10 sulla
trascrizione di IL-8 indotta da Tumor Necrosis Factor alfa.
La validazione mediante real-time PCR dei dati ottenuti con cDNA microarrays per
identificare geni regolati da IL-10, ha portato all’identificazione di 5 geni come
bersagli cellulari, alcuni dei quali potrebbero supportare gli effetti anti-infiammatori
di questa molecola.
I nostri risultati stanno indicando possibili meccanismi degli effetti anti-infiammatori
dell’ IL-10, oltre al razionale per un suo eventuale utilizzo terapeutico per la FC.
8. Ruoli non battericidi dell’azitromicina: rilevanza per la terapia della
Fibrosi Cistica
Responsabile: Paola Melotti
Collaboratori: Cristina Cigana, Elena Nicolis, Cinzia Bersani, Gabriella Bergamini,
Federica Quiri, Ugo Pradal, , Baroukh Assael
Collaboratori esterni:
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− Centro Interdipartimentale per la Ricerca sul Cancro - Università di Ferrara:
Massimo Negrini, Manuela Ferracin (FFC#3/2002)
− Istituto Tecnologie Biomediche, CNR- Segrate (MI): Pierluigi Mauri, Louise
Benazzi, FabrizioBasilico, Enrico Rosti (FFC#10/2005)
− Sez. Patologia Generale - Università di Verona: Claudio Sorio, Marzia Vezzalini,
Marco Della Peruta, Andrea Mafficini (FFC#10/2005)
− Istituto per la Terapia Sperimentale della Fibrosi Cistica, Istituti Scientifici
San Raffaele, Milano: Alessandra Bragonzi (FFC#10/2005).
Finanziato dalla Fondazione per la Ricerca sulla Fibrosi CisticaFibrosi Cistica, grants
FFC#3/2002, FFC#10/2005 e dal Comitato di Vicenza dell’Associazione Veneta per la
Lotta contro la Fibrosi Cistica Fibrosi Cistica.
Sono crescenti le evidenze sugli effetti terapeutici dell’azitromicina (AZM) in
pazienti affetti da Fibrosi Cistica (FC). Si stanno indagando i meccanismi non
battericididi questo macrolide rilevanti per i suoi effetti terapeutici in tale patologia.
Avendo dimostrato che questo macrolide riduce l’espressione della molecola proinfiammatoria
IL-8 in linee di epitelio respiratorio FC, si è cercato di approfondire il
meccanismo di questo effetto, avendo così evidenziato inibizione dell’attivazione di
fattori di trascrizione pro-infiammatori come NF-kB, AP-1 e Specificity Protein 1
(Sp1). Questi risultati sono stati confermati utilizzando diversi approcci sperimentali.
In particolare questi effetti sono risultati specifici avendo utilizzato come controllo
la iosamicina, un macrolide simile all’AZM da un punto di vista chimico, ma privo di
effetti clinici anti-infiammatori. Inoltre l’effetto inibitorio è risultato selettivo per i
tre fattori descritti, in quanto l’attività di un altro fattore di trascrizione, FosB, non
è risultata regolata da AZM. La validazione mediante real-time PCR dei risultati
ottenuti in precedenza dall’analisi con cDNA microarrays ha permesso l’identificazione
di nove geni regolati dall’AZM, tra i quali alcuni potrebbero essere coinvolti
nell’antività anti-infiammatoria del farmaco. Si stanno definendo le condizioni in linee
di epitelio respiratorio FC per determinare effetti dell’AZM mediante analisi
proteomica. Si sta mettendo a punto un modello murino con infezione delle vie
respiratorie da parte di Pseudomonas aeruginosa per poter stabilire l’effetto del
farmaco sulla risposta infiammatoria così indotta.
Considerando la variabilità della risposta alla terapia con AZM tra i pazienti con FC, si
è cercato di individuare eventuali caratteristiche genetiche, in particolare il
polimorfismo nella ripetizione di triplette GCC del gene multidrug resistanceassociated
protein 1 (MRP-1), omologo al gene responsabile della FC, CFTR. L’utilizzo di
questa variante genetica, analizzata in 36 pazienti FC, non si è rivelato appropriato
per distinguere i pazienti che possono trarre benefici dalla terapia con AZM. I
risultati ottenuti a questo proposito non permettono quindi per ora di proporre
un’analisi genetica utile allo scopo ma stanno gettando le basi per interessanti
collaborazioni.
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10. Cystic fibrosis: characterization of the unknown mutations in Italian
patients and assessment of their pathogenic role
Progetto collaborativo finanziato dalla Fondazione per la Ricerca sulla Fibrosi Cistica
Prof. Maria Cristina Rosatelli (Cagliari), Prof. Franca Dagna-Bricarelli, Dott. Maria
Baffico (Genova), Dott. Carlo Castellani (Verona), Dott. Manuela Seia (Milano), Prof.
Antonio Amoroso, Dott. Marcello Morgutti (Trieste).
Responsabile per il Centro di Verona: Alberto Bonizzato
Il nostro contributo ha comportato l’analisi D-HPLC dell’intera porzione codificante di
45 pazienti CF, che risultavano non completamente caratterizzati dopo l’analisi
genetica di primo livello. Dei 47 alleli CF ignoti, 36 sono stati caratterizzati. Cinque
degli 11 candidati ad effettuare l’analisi dell’mRNA hanno collaborato alla ricerca, il
loro RNA è stato estratto da brushing nasale e retrotrascritto prima dell’invio al
laboratorio di Cagliari per l’analisi genetica. Lo studio dell'mRNA è in fase di
completamento.
11. Screening of CFTR gene rearrangements in Italian CF patients.
Progetto collaborativo finanziato dalla Fondazione per la ricerca sulla Fibrosi Cistica
Prof. Giuseppe Castaldo (Napoli),
Dott. Carlo Castellani, Dott. Cristina Bombieri, Prof. Pier Franco Pignatti (Verona),
Prof. Federica Sangiuolo (Roma).
Responsabile per il Centro di Verona: Alberto Ionizzato
Il campione considerato fino ad ora per l’analisi D-HPLC e per la ricerca dei
riarrangiamenti più frequenti (Dele17a-18, Dele1, Dele2-3) comprende 56 pazienti CF
con 59 alleli non caratterizzati dopo l’analisi di primo livello. Nel corso del primo anno
di studio, 47 alleli sono stati caratterizzati.
E’ previsto che i lavori relativi al progetto durino 2 anni e quindi proseguano per un
altro anno.
12. Studio genetico dei pazienti CF con sopravvivenza superiore ai 40 anni
Responsabile: Alberto Bonizzato
Questo progetto si aggiunge, a livello del Centro di Verona, al progetto Aging project
a cui il nostro Centro partecipa assieme ai Centri di Minneapolis, Toronto, Londra
adulti.
L’analisi genetica di secondo livello ha permesso di ottenere la caratterizzazione del
96% degli alleli CF in un campione costituito da 41 pazienti con sopravvivenza
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superiore ai 40 anni. Due terzi circa di tale campione presenta un genotipo
caratterizzato da almeno una mutazione mild. Il terzo rimanente dei casi, invece, ha
genotipo classico con entrambe le mutazioni associate ad insufficienza pancreatica. In
quest’ultimo gruppo andrebbero ricercati eventuali fattori genetici o ambientali in
grado di favorire la sopravvivenza anche in presenza di un genotipo sfavorevole.
13. Analisi del gene SBDS in pazienti con la sindrome di Shwachman
Diamond (SDS)
Responsabili: Elena Nicolis e Alberto Bonizzato
Dalla scoperta del gene della sindrome di Shwachman Bodian Diamond (SBDS) nel
2002 ad oggi sono state identificate molte mutazioni diverse associate alla malattia,
almeno 33, dai dati emersi durante il 3° Congresso Internazionale della Sindrome di
Shwachman: il gene è composto di 5 esoni, ha un trascritto di 1,6 kb e codifica per una
proteina di 250 amino acidi, la cui funzione potrebbe essere implicata nel metabolismo
dell’RNA ribosomiale.
E’ convinzione unanime l’importanza di una precisa ed accurata diagnosi clinica della
SDS: l’analisi genetica fornisce, al momento attuale, un importante completamento
diagnostico.
Obiettivo 1 - Ci proponiamo di proseguire l’analisi genetica su altri pazienti SDS allo
scopo di definire ulteriormente lo spettro di mutazioni associate alla sindrome.
Risultati
l’analisi genetica ha finora permesso di identificare il 100% delle mutazioni SDS, 3
delle quali mai descritte precedentemente, in un gruppo di 20 pazienti. La strategia
finora adottata prevede che, dopo la diagnosi clinica, si ricerchino le due mutazioni più
frequenti (258+2C>T e K62X) mediante PCR-RFLP. Se vengono trovate, la diagnosi è
confermata; in caso contrario si procede con il sequenziamento dell’intero gene. La
possibilità di non trovare alcuna mutazione tuttavia esiste; non è da escludere da un
lato la presenza di mutazioni in regioni geniche non codificanti la proteina, ad esempio
nel promotore, dall’altro l’esistenza di un secondo gene coinvolto nella sindrome.
Obiettivo 2 - Allo scopo di indagare, in parte, sul meccanismo patogenetico delle
diverse mutazioni, abbiamo intenzione di studiare l’RNA messaggero (mRNA) del gene
SBDS. Per ciascuna mutazione è possibile stabilire gli effetti a livello di quantità e
qualità dell’mRNA rispetto alla forma normale.
Risultati
È in corso la raccolta di sangue intero dei pazienti e dei loro genitori in occasione della
loro visita di controllo presso il Centro. L’RNA totale deve infatti essere estratto
immediatamente dopo il prelievo. Al momento sono stati raccolti 5 campioni di RNA di
pazienti SDS e dei rispettivi genitori.
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Obiettivo 3 - Si ritiene che tra i pazienti affetti da sindrome mielodisplasica (MDS),
possibile complicanza della SDS, vi possano essere dei casi non diagnosticati di SDS.
Pertanto, ricercare nei pazienti MSD mutazioni SDS, aprirebbe una interessante
strada verso la scoperta e caratterizzazione di forme atipiche di SDS.
Risultati
Abbiamo ricevuto dal prof. Andrea Biondi e dalla dott.ssa Daniela Longoni (Clinica
Pediatrica, Monza) 6 prelievi midollari di pazienti con MDS. E’ stato estratto il DNA e
mediante PCR-RFLP è stato analizzato l’esone 2 per la ricerca delle due mutazioni più
frequenti (258+2C>T e la K62X), con risultato negativo.
14. Banca del DNA di pazienti con malattia di Parkinson e con distonie
primarie
Responsabile: Alberto Bonizzato
Questo progetto si inquadra nell’ambito delle collaborazioni interne all’Azienda
ospedaliera di Verona,
Esso si sviluppa in collaborazione con il Dott. Michele Tinazzi del reparto di
Neurologia e sono stati finore raccolti oltre 120 campioni di DNA ed è stato creato un
database apposito.
I soggetti affetti da malattia di Parkinson comprendono le categorie in cui i fattori di
tipo genetico sono più rilevanti, ossia i pazienti con insorgenza prima dei 50 anni e
quelli con familiarità per la malattia. Il materiale ottenuto ha permesso di avviare dei
progetti collaborativi con il Dott. Vincenzo Bonifati a Rotterdam (casi con familiarità)
e con la Dott.ssa Enza Maria Valente dell’Istituto Mendel di Roma (casi ad esordio
precoce). Con il gruppo guidato dal Dott. Bonifati sono stati realizzati due articoli che
recentemente sono apparsi sulle riviste Lancet e Neurology.
In collaborazione con il Dott. Mattia Gambarin del reparto di Rieducazione Funzionale
del Policlinico di Borgo Roma, è stata raccolta una famiglia molto numerosa,
comprendente vari soggetti affetti da distonia primaria. L’analisi genetica, in corso di
ultimazione, è stata svolta presso l’Istituto Mendel di Roma.
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PUBBLICAZIONI CENTRO FIBROSI CISTICA – ANNO 2005
1. Nicolis E, Bonizzato A, Assael BM, Cipolli M. Identification of Novel Mutations in
Patients with Shwachman-Diamond Sindrome. Human Mutations 2005; 795: 1-8.
2. Bombieri C, Bonizzato A, Castellani C, Assale BM, Pignatti PF. Frequency of large
CFTR gene rearrangements in Italian CF patients. European Journal of Human
Genetics 2005; 13:687-689.
3. Valletta E, Gelio S, Fontana E, Ibba MV, Piccoli R, Cipolli M. La somministrazione di
farmaci nel bambino con grave patologia neurologica in nutrizione enterale. Rivista
Italiana di Nutrizione Parenterale ed Enterale 2005; 2:62-69.
4. Bodini A, D'Orazio C, Peroni D, Corradi M, Folesani G, Baraldi E, Assael BM, Boner
A, Piacentini GL. Biomarkers of neutrophilic inflammation in exhaled air of cystic
fibrosis children with bacterial airway infections Pediatric Pulmonology 2005
Dec;40(6):494-9.
5. Castellani C, Picci L, Scarpa M, Dechecchi MC, Zanolla L, Assael BM, Zacchello F.
Cystic fibrosis carriers have higher neonatal immunoreactive trypsinogen values
than non-carriers. American Journal Medical Genetic A. 2005 Jun 1;135(2):142-4.
6. Pradal U, Delmarco A, Morganti M, Cipolli M, Mini E, Cazzola G. Long-term
azithromycin in cystic fibrosis: another possible mechanism of action Journal of
Chemotherapy. 2005 Aug;17(4):393-400.
7. Nicolis E, Pasetto M, Cigana C, Pradal U, Assael BM, Melotti P. The GCC repeat
length in the 5’UTR of MRP1 gene is polymorphic: a functional characterization of
its relevance for cystic fibrosis. BiomedCentral Medical Genetics (In press).
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