TESI SIMONA MANDINI - Università degli Studi di Ferrara
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abituale e tutti i partecipanti allo studio erano invitati a non assumere caffeina nelle 12 ore precedenti ed evitare lavori muscolari impegnativi ed inusuali nelle 24 ore precedenti la misurazione. Valutazioni emodinamiche Indice Caviglia-Braccio (ABI): all’arrivo in ospedale, ai soggetti esaminati veniva richiesto un periodo di riposo di circa 10-15 minuti prima procedere alle misure. L’indice ABI è stato misurato a tutti i soggetti in studio secondo le modalità standard (39) mediante l’utilizzo di un doppler acustico (Stereodop 448.S) ed un bracciale da sfigmomanometro standard. Al paziente disteso sul lettino in posizione supina, venivano misurate la pressione sistolica a livello delle arterie tibiale posteriore e pedidia di entrambe le gambe e successivamente veniva misurata la pressione arteriosa sistemica a livello omerale con uno sfigmomanometro aneroide, dotato di un bracciale per adulti. L’indice ABI per ogni arto è stato calcolato attraverso il rapporto tra la pressione sistolica più alta rilevata alla caviglia e la pressione sistolica riscontrata al braccio. Le gambe di ogni paziente sono state classificate come arto peggiore o migliore in base all’indice ABI. Sono stati considerati incomprimibili i vasi in presenza di ABI maggiore di 1,40 o in caso di interruzione della procedura, per dolore nella sede del manicotto, ad una pressione di 300 mmHg pur in presenza di segnale Doppler. In sede di outcome, i pazienti che presentavano un incremento significativo di ABI (≥ 10%) a carico della gamba peggiore rispetto alle misurazioni basali, sono stati classificati come “responders” al trattamento dal punto vista emodinamico (gruppo ABI+ ) ed i restanti pazienti (ABI < 10%) sono stati classificati come non responders (gruppo ABI-). Valutazioni metaboliche muscolari mediante spettroscopia a raggi infrarossi (NIRS) Per le misure effettuate con spettroscopio a raggi infrarossi NIRS, è stato utilizzato uno strumento ad onda continua (Oxymon MK III Artinis Medical System, the Netherlands) le cui caratteristiche tecniche sono riportate in tabella 1 (figura 1). Questo sistema, dotato di due canali (un canale sorgente di luce ed uno rilevatore), utilizza una luce ad intensità modulata alla frequenza di 1 MHz ed i diodi laser a tre lunghezze d’onda (905, 850, and 770 nm), corrispondenti alle lunghezze d’onda di assorbimento di ossiemoglobina (O 2 Hb) e deossiemoglobina (HHb). La luce dai diodi laser, propagandosi attraverso i tessuti biologici, viene in parte assorbita e in parte dispersa da parte dei tessuti stessi per poi essere catturata dalle fibre rilevatrici. L’intensità della quota di luce raccolta fornisce informazioni dirette riguardo la concentrazione di O 2 Hb e HHb ([O 2 Hb], [HHb]). 18
Altri parametri vengono invece calcolati dai precedenti, quali l’emoglobina totale (tHb= O 2 Hb + HHb) e l’emoglobina differenziale (dHb= O 2 Hb - HHb). Tali misure sono state sempre eseguite dagli stessi operatori. Prima di effettuare la valutazione, è stato stimato lo strato di tessuto adiposo mediante la misura delle pliche al polpaccio, nel suo punto più largo, utilizzando un plicometro (Holtain Ltd, UK), in accordo con gli standard internazionali (73) . È stata effettuata quindi la lettura in millimetri ed è stata considerata la media di tre misurazioni consecutive. Successivamente, al soggetto, disteso sul lettino in posizione supina, venivano posizionati ed assicurati con nastro adesivo i sensori a raggi infrarossi NIRS al ventre mediale del muscolo gastrocnemio (figura 2), nello stesso punto in cui sono state misurate le pliche. Per tutte le misure, la distanza fra gli optodi dei sensori NIRS è stata mantenuta a 4 cm consentendo una profondità massima di penetrazione della luce di circa 20 mm. Determinazione del consumo di ossigeno muscolare a riposo ( mVO 2 ) con metodica dell’occlusione venosa: Con il paziente sempre in posizione supina, veniva posizionato a livello del terzo distale di coscia, un centimetro al di sopra dell’articolazione del ginocchio, un manicotto da sfigmomanometro (l=79 cm, h=21 cm) con manometro (Wenzhou Bokang Medical Instruments and Health Products Co. Ltd, Wenzhou, China) (figura 2). Durante le misure NIRS, il paziente veniva invitato a rimanere in silenzio e a non effettuare contrazioni muscolari. L’occlusione venosa veniva indotta gonfiando il manicotto ad una pressione di 60 mmHg in circa quattro secondi. Tale pressione veniva mantenuta costante per trenta secondi e successivamente, il manicotto pneumatico veniva velocemente sgonfiato. Il valore assoluto di mVO 2 determinato con l’occlusione venosa è stato poi calcolato analizzando il grado di incremento della [HHb] nel lasso di tempo in cui il deflusso venoso era bloccato dalla compressione (26) . I dati raccolti ed i successivi calcoli sono stati eseguti utilizzando il software Oxysoft 47 (Artinis Medical System, Netherland). Il valore di consumo di ossigeno è stato successivamente calcolato attraverso la formula validata precedentemente riportata. Le variazioni di concentrazione di HHb, originariamente espresse in micromoli per secondo (µM/s), sono state convertite in millilitri di O 2 per 100 grammi di tessuto per minuto (ml/100g/min) (74, 75) . Tale misurazione è stata effettuata per ogni arto di ogni soggetto in studio. 19
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Altri parametri vengono invece calcolati dai precedenti, quali l’emoglobina totale (tHb= O 2 Hb +<br />
HHb) e l’emoglobina <strong>di</strong>fferenziale (dHb= O 2 Hb - HHb). Tali misure sono state sempre eseguite<br />
dagli stessi operatori.<br />
Prima <strong>di</strong> effettuare la valutazione, è stato stimato lo strato <strong>di</strong> tessuto a<strong>di</strong>poso me<strong>di</strong>ante la misura<br />
delle pliche al polpaccio, nel suo punto più largo, utilizzando un plicometro (Holtain Ltd, UK), in<br />
accordo con gli standard internazionali (73) . È stata effettuata quin<strong>di</strong> la lettura in millimetri ed è stata<br />
considerata la me<strong>di</strong>a <strong>di</strong> tre misurazioni consecutive.<br />
Successivamente, al soggetto, <strong>di</strong>steso sul lettino in posizione supina, venivano posizionati ed<br />
assicurati con nastro adesivo i sensori a raggi infrarossi NIRS al ventre me<strong>di</strong>ale del muscolo<br />
gastrocnemio (figura 2), nello stesso punto in cui sono state misurate le pliche.<br />
Per tutte le misure, la <strong>di</strong>stanza fra gli opto<strong>di</strong> dei sensori NIRS è stata mantenuta a 4 cm consentendo<br />
una profon<strong>di</strong>tà massima <strong>di</strong> penetrazione della luce <strong>di</strong> circa 20 mm.<br />
Determinazione del consumo <strong>di</strong> ossigeno muscolare a riposo ( mVO 2 ) con meto<strong>di</strong>ca dell’occlusione<br />
venosa: Con il paziente sempre in posizione supina, veniva posizionato a livello del terzo <strong>di</strong>stale <strong>di</strong><br />
coscia, un centimetro al <strong>di</strong> sopra dell’articolazione del ginocchio, un manicotto da<br />
sfigmomanometro (l=79 cm, h=21 cm) con manometro (Wenzhou Bokang Me<strong>di</strong>cal Instruments and<br />
Health Products Co. Ltd, Wenzhou, China) (figura 2). Durante le misure NIRS, il paziente veniva<br />
invitato a rimanere in silenzio e a non effettuare contrazioni muscolari.<br />
L’occlusione venosa veniva indotta gonfiando il manicotto ad una pressione <strong>di</strong> 60 mmHg in circa<br />
quattro secon<strong>di</strong>. Tale pressione veniva mantenuta costante per trenta secon<strong>di</strong> e successivamente, il<br />
manicotto pneumatico veniva velocemente sgonfiato. Il valore assoluto <strong>di</strong> mVO 2 determinato con<br />
l’occlusione venosa è stato poi calcolato analizzando il grado <strong>di</strong> incremento della [HHb] nel lasso <strong>di</strong><br />
tempo in cui il deflusso venoso era bloccato dalla compressione (26) .<br />
I dati raccolti ed i successivi calcoli sono stati eseguti utilizzando il software Oxysoft 47 (Artinis<br />
Me<strong>di</strong>cal System, Netherland).<br />
Il valore <strong>di</strong> consumo <strong>di</strong> ossigeno è stato successivamente calcolato attraverso la formula validata<br />
precedentemente riportata.<br />
Le variazioni <strong>di</strong> concentrazione <strong>di</strong> HHb, originariamente espresse in micromoli per secondo (µM/s),<br />
sono state convertite in millilitri <strong>di</strong> O 2 per 100 grammi <strong>di</strong> tessuto per minuto (ml/100g/min) (74, 75) .<br />
Tale misurazione è stata effettuata per ogni arto <strong>di</strong> ogni soggetto in stu<strong>di</strong>o.<br />
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