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組 織 染 色 、<br />
in situハイブリダイゼーション<br />
RNAscope®RNA in situハイブリダイゼーション<br />
IsHyb in situハイブリダイゼーションキット<br />
HistoGreen ペルオキシダーゼ 染 色 基 質 キット<br />
Fluoromount/Plus & CC/Mount<br />
CISH/FISH 用 プローブキット<br />
ウサギモノクローナル 抗 体 ─SPクローンとEPクローン─<br />
コスモ・バイオ 取 り 扱 いのおすすめ 生 体 組 織 供 給 メーカー 紹 介<br />
M a y<br />
2013<br />
No.98<br />
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注 目 商 品<br />
シグナル 伝 達<br />
Arf1&6 活 性 アッセイキット<br />
汎 用<br />
DiSH キット<br />
細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学<br />
StemBeads FGF2<br />
受 託 サービス<br />
Gene-TALER Custom TALEN and<br />
TALE-TFサービス<br />
バイオメディカル<br />
D-セリン 測 定 キット( 比 色 法 )<br />
機 器<br />
大 容 量 遺 伝 子 導 入 装 置 「AgilePulseMAX」
組 織 染 色 、<br />
in situハイブリダイゼーション<br />
M a y<br />
2013<br />
No.98<br />
RNAscope®RNA in situハイブリダイゼーション‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 2<br />
IsHyb in situハイブリダイゼーションキット‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 4<br />
HistoGreen ペルオキシダーゼ 染 色 基 質 キット‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 4<br />
Fluoromount/Plus & CC/Mount‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 5<br />
CISH/FISH 用 プローブキット‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 6<br />
ウサギモノクローナル 抗 体 ─SPクローンとEPクローン─‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 7<br />
コスモ・バイオ 取 り 扱 いのおすすめ 生 体 組 織 供 給 メーカー 紹 介 ‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 8<br />
新 商 品 & トピックス<br />
シグナル 伝 達<br />
血 小 板 VASP/P2Y12アンタゴニスト 活 性 測 定 キット… …………… 10<br />
血 小 板 GpIIb/IIIaレセプター 結 合 度 測 定 キット…………………… 10<br />
デキストラマーパッケージ… ………………………………………… 11<br />
Arf1&6 活 性 アッセイキット 注 目 … ……………………………… 12<br />
スルホトランスフェラーゼ( 硫 酸 基 転 移 酵 素 ) 活 性 測 定 キット… …… 13<br />
シアル 酸 トランスフェラーゼ 活 性 測 定 キット………………………… 13<br />
λプロテインホスファターゼ ………………………………………… 14<br />
オートファジーインヒビター 3-メチルアデニン …………………… 14<br />
アルコールアッセイキット…………………………………………… 15<br />
過 酸 化 水 素 アッセイキット… ………………………………………… 15<br />
細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学<br />
ヒト 内 皮 前 駆 細 胞 ……………………………………………………… 16<br />
血 球 分 離 溶 液 Lymphoprep とLymphoprep チューブ… … 17<br />
StemBeads FGF2 注 目 … ………………………………………… 18<br />
バイオメディカル<br />
D-セリン 測 定 キット( 比 色 法 ) 注 目 … ……………………………… 19<br />
汎 用<br />
NEXTflex 16S V4 Amplicon-Seqキット……………………… 20<br />
FcRブロッキング 試 薬 … ……………………………………………… 21<br />
遺 伝 子 組 換 えヒイロチャワンタケレクチン………………………… 21<br />
DiSH キット 注 目 ………………………………………………… 22<br />
受 託 サービス<br />
Gene-TALER Custom TALEN and<br />
TALE-TFサービス 注 目 …………………………………………… 23<br />
機<br />
器<br />
大 容 量 遺 伝 子 導 入 装 置 「AgilePulseMAX」 注 目 … …………… 24<br />
▍ 新 規 抗 体 商 品 のご 案 内<br />
シトルリン 化 フィブリノーゲン 抗 体 ‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 27<br />
20Sプロテアソーム 特 異 的 認 識 モノクローナル 抗 体 ‥ ‥ 27<br />
形 質 細 胞 様 樹 状 細 胞 の 研 究 用 モノクローナル 抗 体 ‥ ‥‥ 28<br />
Epi-Plus® 抗 体 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 29<br />
BRAF V600E 突 然 変 異 特 異 抗 体 ‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 30<br />
BRD4 抗 体 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 30<br />
▍ 新 規 ELISA 商 品 のご 案 内<br />
PAD 活 性 アッセイキット‥ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 31<br />
セルベースELISAキット‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 32<br />
VeriKine IFN-α Serum ELISAキット‥ ‥‥‥‥‥‥ 32<br />
研 究 室 のホープ<br />
‥‥‥‥‥‥ 25<br />
お 知 らせコ−ナ−<br />
‥‥‥‥‥‥ 33<br />
水 や 汚 れをはじくハスの 超 撥 水<br />
ハスの 葉 の 上 をはじかれたようにコロコロと 転 がる 水 滴 、 雨 の 日 によく 見 かける 光 景 だ。 泥 の 多 い<br />
沼 に 生 息 するハス、しかし 葉 の 表 面 は 泥 や 汚 れが 少 なく 水 をはじく。この 撥 水 性 は 葉 の 構 造 に 起 因 し<br />
ている。 一 見 、ツルツルに 見 えるハスの 葉 の 表 面 は、 数 ミクロンの 小 さな 突 起 が 並 ぶ 凹 凸 状 の 形 状 と<br />
なっている。その 突 起 にもさらに 小 さな 凹 凸 がある。この 形 状 により 水 に 触 れる 表 面 積 が 減 り、 同 時<br />
に 凹 状 のへこんだ 部 分 に 溜 まった 空 気 がクッションの 役 割 を 果 たし、 水 をはじくのだ。ハスの 葉 を 参 考<br />
にしたコーティング 技 術 は、 雨 具 やスポーツ 用 品 、 住 宅 外 壁 等 、 様 々な 分 野 で 応 用 されている。ハスの<br />
撥 水 性 を 生 かした 傘 で、ハスの 葉 にできるような「 水 玉 」 模 様 を 眺 めるのも 梅 雨 時 の 楽 しみの 一 つかも<br />
しれない。<br />
出 典 :すごい 自 然 のショールーム(http://www.nature-sugoi.net/)
in situハ<br />
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特<br />
集<br />
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織<br />
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組<br />
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組 織 染 色 、<br />
in situハイブリダイゼーション<br />
免 疫 組 織 化 学 法 の 起 源 は1955 年 にまでさかのぼりますが、 細 胞 や 組 織 の 状 態 を 把 握 するのに 有 効 な<br />
方 法 であるため、 現 在 も 広 く 扱 われています。その 中 で、 固 定 による 抗 原 性 の 変 化 や、 検 出 できたタンパク<br />
質 が 必 ずしもその 組 織 で 合 成 されたものであると 保 証 ができないということから、 新 たに 開 発 された 方 法<br />
がin situハイブリダイゼーションです。In situハイブリダイゼーションは「その 場 所 にて」 発 現 した 遺 伝 子 を<br />
検 出 する 方 法 であり、 現 在 ではRNAが1コピーの 場 合 でも 検 出 が 可 能 となるまでに 進 歩 しています。<br />
今 回 の 特 集 では、 多 岐 にわたる 免 疫 組 織 染 色 とin situハイブリダイゼーション 商 品 の 中 から、コスモ・<br />
バイオがおすすめする 商 品 をご 紹 介 致 します。<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
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伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
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細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
今 回 特 集 で 紹 介 する 商 品 は、コスモ・バイオが 取 り 扱 う 商 品 のごく 一 部 です。 目 的 の 商 品 が 見 つからなくても、コスモ・バイオ<br />
ホームページから 見 つかるかもしれません。<br />
コスモ・バイオホームページでは、「サイト 内 検 索 」「 商 品 検 索 」の2 通 りの 検 索 方 法 から 商 品 をお 探 しいただけます。また、 商 品<br />
カテゴリからもお 探 しいいただけます( 抗 体 アッセイ→ 免 疫 組 織 染 色 、 分 子 生 物 →ブロッティング/ハイブリダイゼーション)。<br />
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カテゴリ 検 索<br />
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抗 体 関 連<br />
<br />
遺 伝 子 工 学<br />
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<br />
検 索<br />
製 造 中 止 商 品 を 含 める<br />
タンパク 質 、 糖 類 、ホ<br />
<br />
ルモン<br />
miRNA 研 究 化 成 品 定 量 ・ 検 出 キット<br />
検 出 試 薬<br />
<br />
細 胞 ・ 生 体 試 料<br />
<br />
<br />
cDNAクローン<br />
<br />
<br />
<br />
機 器 、 消 耗 品<br />
<br />
機 器 ・ 消 耗 品 カタログ<br />
から 探 す<br />
<br />
siRNA, shRNAベクタ<br />
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ー<br />
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培 地 、 培 養 試 薬 ・ 機 材<br />
<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
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ビ<br />
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機<br />
器<br />
Cosmo Bio News No.98 1
in situハ<br />
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特<br />
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組 織 染 色 、in situハイブリダイゼーション<br />
RNAscope®RNA in situハイブリダイゼーション<br />
組 織 中 の 特 定 遺 伝 子 のRNAを1コピーから 検 出 できます!<br />
シ<br />
グ<br />
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培<br />
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RNAscope®は、ホルマリン 固 定 パラフィン 包 埋 (FFPE) 組 織 中 と 新<br />
鮮 凍 結 (FF) 組 織 の 発 現 遺 伝 子 を、RNA in situハイブリダイゼーション<br />
(ISH) 法 により 検 出 する 新 しいテクノロジーです。<br />
ユニークなプローブデザインとその 増 幅 方 法 により、1コピーから<br />
RNAを 検 出 でき、ターゲット 遺 伝 子 の 発 現 と 細 胞 内 局 在 を 検 証 でき<br />
ます。<br />
特 長<br />
超 高 感 度<br />
● 独 自 の“ZZ”プローブデザイン( 図 1)により、RNAを1コピーから<br />
検 出 可 能<br />
● 抗 体 による 免 疫 組 織 染 色 (IHC)や 従 来 のFISH/ISHでは 検 出 不 可 能<br />
な 発 現 量 の 少 ない 遺 伝 子 のRNAも 検 出 可 能<br />
●バックグラウンドが 非 常 に 低 く、 従 来 のdig-ISHよりも100 倍 以 上 高<br />
感 度<br />
●RIによるISHよりも 高 感 度<br />
高 い 特 異 性<br />
● 相 同 性 の 高 い 遺 伝 子 も 識 別 可 能<br />
● 複 数 のターゲット 遺 伝 子 も 同 時 に 検 出 可 能 (2-, 3-プレックスアッセイ)<br />
簡 単 操 作<br />
● 免 疫 組 織 染 色 と 同 様 の 簡 単 プロトコール<br />
● 脱 パラフィンから 染 色 まで、8 時 間 以 内<br />
応 用 例<br />
●バイオマーカーの 解 析 ● 新 規 のバイオマーカー 探 索<br />
●Non-coding RNA 解 析 ●IHCの 検 証<br />
● 分 子 病 理 学<br />
● 幹 細 胞 研 究<br />
● 発 現 レベルの 低 いターゲット 遺 伝 子 の 解 析<br />
● 腫 瘍 の 不 均 一 性<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
図 1 RNAscope®ワークフロー<br />
(1)FFPE 組 織 切 片 を 脱 パラフィンし、ターゲットRNAを 検 出 できるよう 前 処 理 。<br />
(2) 遺 伝 子 特 異 的 “ZZ”プローブペアをターゲットmRNAにハイブリダイズ。<br />
(3)PreAMPのハイブリダイゼーション→AMP→ 標 識 プローブを 反 応 させてシグナルを 増 幅 。<br />
(4)ターゲットRNAを 発 色 法 により 検 出 、 鏡 顕 。<br />
■ 性 能<br />
感 度<br />
シングルコピー<br />
適 用 サンプル<br />
FFPE 切 片<br />
ターゲット 領 域 ( 標 準 )<br />
1,000 塩 基<br />
最 低 限 必 要 なターゲットの 長 さ( 推 奨 ) 200 塩 基<br />
最 適 な 発 現 レベル<br />
1〜20コピー/ 細 胞<br />
RNAの 分 解 度 合<br />
RNAが 多 少 分 解 しているサンプルにも 対 応 可<br />
鏡 顕 環 境<br />
×10〜×20レンズ<br />
アッセイ 時 間<br />
8 時 間 以 内<br />
【RNAscope®シングルプレックス 発 色 アッセイ(FFPE 組 織 用 )】<br />
汎<br />
用<br />
特 長<br />
● 茶 色 (DAB)もしくは 赤 色 (Fast Red)から 選 択 可 能<br />
●ヒト 遺 伝 子 のプローブ( 約 27,000 種 類 )の 提 供 が 可 能<br />
●マウス、ラット 遺 伝 子 のプローブもカスタムプローブとして 作 製 可 能<br />
図 2<br />
RNAscope®2.0 FFPEアッセイ( 茶 色 )による 乳 癌<br />
FFPE 組 織 でのHER2 発 現 解 析 。<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
機<br />
器<br />
■ 必 要 な 試 薬 と 機 器 Advanced Cell Diagnostics, Inc 略 号 ADC<br />
種 類 品 名 内 容 品 番 包 装<br />
ター ゲットプローブ RNAscope®Target Probe 各 ターゲットプローブの 初 回 購 入 時 は、 XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
下 記 のセットアップ 料 金 が 必 要 になります。<br />
ターゲットプローブセットアップ 料 金 Setup fee for RNAscope®new target ─ XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
FFPE 試 薬 キット 茶 RNAscope®2.0 FFPE Reagent Kit_Brown Detection Kit、Pretreatment Kit、 310035 1 kit(20 slide 分 )<br />
赤 RNAscope®2.0 FFPE Reagent Kit_Red Wash Buffer のセット 310036 1 kit(20 slide 分 )<br />
コントロールプローブ ポジティブ RNAscope®Housekeeping Gene Positive Control Probe, POLAR2A ヒト 310451 1 vial(20 slide 分 )<br />
RNAscope®Housekeeping Gene Positive Control Probe, PPIB ヒト 313901 1 vial(20 slide 分 )<br />
RNAscope®Housekeeping Gene Positive Control Probe, POLAR2A マウス 312471 1 vial(20 slide 分 )<br />
RNAscope®Housekeeping Gene Positive Control Probe, POLAR2A ラット 312481 1 vial(20 slide 分 )<br />
RNAscope®Positive Control, PPIB マウス 313911 1 vial(20 slide 分 )<br />
ネガティブ RNAscope®Negative Control Probe-DapB ─ 310043 1 vial(20 slide 分 )<br />
コントロールスライド RNAscope®FFPE Control Slide Pack ヒト(HeLa cells) 310045 1 unit(4 slide 入 )<br />
RNAscope®FFPE Control Slide Pack マウス/ラット(NIH 3T3 cells) 310023 1 unit(4 slide 入 )<br />
* 品 番 「XXXXXX」にはターゲットにより 異 なる 任 意 の 数 字 が 入 ります。<br />
!<br />
希 望 販 売 価 格 につきましては、コスモ・バイオ( 欄 外 参 照 )までご 照 会 ください。お 客 様 の 所 属 機 関 ( 営 利 or 非 営 利 )により 希 望 販 売 価 格 が 異 なります。<br />
2<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
【RNAscope®2-プレックス 発 色 アッセイ(FFPE 組 織 用 )】<br />
特 長<br />
●2 種 類 のターゲットを 同 時 に 検 出 可 能<br />
●ヒト、マウス、ラット 遺 伝 子 のプローブの 提 供 が 可 能<br />
3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
図 3<br />
RNAscope®2-プレックスFFPEアッセイによる 乳 癌<br />
FFPE 組 織 でのPecam-1( 赤 色 )とEGFR( 緑 色 )の 発<br />
現 解 析 。<br />
in situハ<br />
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特<br />
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■ 必 要 な 試 薬 と 機 器 Advanced Cell Diagnostics, Inc 略 号 ADC<br />
種 類 品 名 内 容 品 番 包 装<br />
ター ゲットプ ロ ーブ( 2 - プ レックス 用 )RNAscope®2-Plex Target Probe 各 ターゲットプローブの 初 回 購 入 時 は、 XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
下 記 のセットアップ 料 金 が 必 要 になります。<br />
ターゲットプローブセットアップ 料 金 Setup fee for RNAscope®new target ─ XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
FFPE 試 薬 キット(2-プレックス 用 ) RNAscope®2-Plex FFPE Reagent Kit Detection Kit、Pretreatment Kit、 320700 1 kit(20 slide 分 )<br />
Wash Buffer のセット<br />
コントロールプローブ ポジティブ RNAscope®2-Plex Housekeeping Gene Positive Control Probe<br />
320741 1 vial(20 slide 分 )<br />
ヒト<br />
(PPIB-red-pos + POlR2a-green-pos)<br />
RNAscope®2-plex Positive Control Probe マウス 320761 1 vial(20 slide 分 )<br />
RNAscope®2-plex Positive Control Probe ラット 320771 1 vial(20 slide 分 )<br />
ネガティブ RNAscope®2-Plex Negative Control Probe<br />
─ 320751 1 vial(20 slide 分 )<br />
(DapB-red-neg + DapB-green-neg)<br />
コントロールスライド RNAscope®FFPE Control Slide Pack ヒト(HeLa cells) 310045 1 unit(4 slide 入 )<br />
RNAscope®FFPE Control Slide Pack マウス/ラット(NIH 3T3 cells) 310023 1 unit(4 slide 入 )<br />
* 品 番 「XXXXXX」にはターゲットにより 異 なる 任 意 の 数 字 が 入 ります。<br />
!<br />
希 望 販 売 価 格 につきましては、コスモ・バイオ( 欄 外 参 照 )までご 照 会 ください。お 客 様 の 所 属 機 関 ( 営 利 or 非 営 利 )により 希 望 販 売 価 格 が 異 なります。<br />
細<br />
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培<br />
養<br />
・<br />
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工<br />
学<br />
【RNAscope®マルチプレックス 蛍 光 アッセイ( 新 鮮 凍 結 (FF) 組 織 用 )】<br />
特 長<br />
●シングルプレックス、2-プレックス、3-プレックスから 選 択 可 能<br />
※4-プレックスは 別 途 ご 相 談 ください。<br />
●アッセイ 時 間 は6 時 間<br />
●ヒト、マウス、ラット 遺 伝 子 のプローブの 提 供 が 可 能<br />
図 4<br />
RNAscope®マルチプレックス 蛍 光 アッセイによる<br />
正 常 マウス 脳 ( 大 脳 皮 質 ) 新 鮮 凍 結 組 織 のNpy( 赤 色 )<br />
とFezf2( 緑 色 )の 発 現 解 析 ( 共 焦 点 画 像 )。<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
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ル<br />
■ 必 要 な 試 薬 と 機 器 Advanced Cell Diagnostics, Inc 略 号 ADC<br />
種 類 品 名 内 容 品 番 包 装<br />
ター ゲットプローブ<br />
1-Plex Target Probe<br />
各 ターゲットプローブの 初 回 購 入 時 は、 XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
(マルチプレックス 蛍 光 用 ) 2-Plex Target Probe 下 記 のセットアップ 料 金 が 必 要 になります。 XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
3-Plex Target Probe XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
4-Plex Target Probe 別 途 ご 相 談 ください XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
ターゲットプローブセットアップ 料 金 Setup fee for RNAscope®new target ─ XXXXXX * 1 vial(20 slide 分 )<br />
FF 試 薬 キット<br />
RNAscope®Fluorescent Multiplex Reagent Kit<br />
Detection Kit、Pretreatment Kit、 320850 1 kit(20 slide 分 )<br />
(マルチプレックス 蛍 光 用 )<br />
Wash Buffer のセット<br />
コントロールプローブ ポジティブ 3-plex Positive Control Probe ヒト 320861 1 vial(20 slide 分 )<br />
3-plex Positive Control Probe マウス 320881 1 vial(20 slide 分 )<br />
3-plex Positive Control Probe ラット 320891 1 vial(20 slide 分 )<br />
ネガティブ 3-plex Negative Control Probe ─ 320871 1 vial(20 slide 分 )<br />
* 品 番 「XXXXXX」にはターゲットにより 異 なる 任 意 の 数 字 が 入 ります。<br />
!<br />
希 望 販 売 価 格 につきましては、コスモ・バイオ( 欄 外 参 照 )までご 照 会 ください。お 客 様 の 所 属 機 関 ( 営 利 or 非 営 利 )により 希 望 販 売 価 格 が 異 なります。<br />
P.2〜3の3 商 品 は、 共 通 -ハイブリダイゼーションシステム( 品 番 :310010)が 必 須 です。RNAscope®RNA in situハイブリダイゼーションの 性<br />
能 は、 本 システムを 用 いた 場 合 のみ 保 証 しています。また、 撥 水 ペン( 品 番 :310023)の 使 用 もおすすめします。<br />
詳 細 は、コスモ・バイオホームページ 上 “サイト 内 検 索 ”でご 確 認 ください(キーワード:RNAscope)。ホームページよりお 見 積 依 頼 も 可 能 です。<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
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ビ<br />
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近 日 リリース 予 定 !<br />
RNAscope®VSシリーズ<br />
ロシュ(Ventana) 社 DISCOVERY ULTRA 及 びDISCOVERY XT<br />
組 織 自 動 染 色 システムに 対 応 した 試 薬 キットが 発 売 になります。<br />
詳 細 はコスモ・バイオ( 欄 外 参 照 )までご 照 会 ください。<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp Cosmo Bio News No.98 3
in situハ<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
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イ<br />
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組<br />
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組 織 染 色 、in situハイブリダイゼーション<br />
IsHyb in situハイブリダイゼーションキット<br />
組 織 切 片 、 組 織 マイクロアレイスライドでISH 検 出<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
高 品 質 で、お 客 様 のご 都 合 に 合 わせてカスタマイズ 可 能 なin situハ<br />
イブリダイゼーション(ISH)キットです。 全 てのロットで 予 備 テストを 行<br />
い、 品 質 を 確 認 しています( 陽 性 であることを 確 認 済 みの 腫 瘍 組 織 スラ<br />
イドにジゴキシゲニン 標 識 したp53プローブを 用 いて、ポジティブな 結<br />
果 が 得 られています)。プロトコールはコスモ・バイオホームページで<br />
紹 介 しています。ホームページ 上 の” 商 品 検 索 ”で 品 番 を 入 力 し、ご 確<br />
認 ください。<br />
構 成 内 容<br />
●プレ・ハイブリダイゼーション 液 ●NBT<br />
●ハイブリダイゼーション 液<br />
●BCIP<br />
●ア ル カ リ ホ ス ファ タ ー ゼ バ ッファ ー( 1 0 × ) ●SSCバッファー(20×)<br />
● 抗 DIG 抗 体 ●ブロッキング 液 (100×)<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
特 長<br />
● 同 位 体 不 使 用 、 発 光 検 出<br />
●RNase-freeでISHに 最 適 化 された 試 薬<br />
●オリゴヌクレオチド、リボヌクレオチドのどちらでも 使 用 可 能<br />
●ジゴキシゲニン 標 識 オリゴヌクレオチドプローブでテスト 済 み<br />
図 1 ヒトhippocampusのin situハイブリダイゼーション 分 析 結 果<br />
上 :40×、 下 :100×<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
BIOCHAIN INSTITUTE INC. 略 号 BCH<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
IsHyb In Situ Hybridization (ISH)Kit K2191020 20 slide ¥35,000 4<br />
K2191050 50 slide ¥65,800 4<br />
HistoGreen ペルオキシダーゼ 染 色 基 質 キット<br />
DABより 高 感 度 かつ 特 異 的 な《 緑 色 》の 発 色 基 質<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
HistoGreenは、ペルオキシダーゼベースの 免 疫 組 織 染 色 とin situ<br />
ハイブリダイゼーションで 用 いる 高 感 度 の 基 質 です。 本 キットには、 必 要<br />
な 試 薬 が 全 て 含 まれています。DABとの 多 重 染 色 に 最 適 です。<br />
特 長<br />
● 高 感 度 かつ 特 異 的<br />
● 微 細 構 造 の 鮮 明 化<br />
●HistoGreenとペルオキシダーゼの 反 応 産 物 は、 永 久 的 にマウント<br />
されます。<br />
●ペルオキシダーゼとアルカリホスファターゼ 基 質 で 非 常 に 鮮 明 な 対<br />
比 染 色<br />
●HistoNuclear、FastRedと 対 比 染 色 可 能<br />
● 毒 性 や 発 癌 性 はありません。<br />
■ 表 1 二 重 染 色 用 の 組 み 合 わせ 例<br />
First Substract<br />
Second Substract<br />
DAB DAB+Ni AEC Vector VIP Vector SG HistoGreen<br />
DAB ー + + + +<br />
DAB+Ni + + + ー +<br />
AEC + ー ー + ー<br />
Vector VIP + + ー + +<br />
Vector SG + ー + + +<br />
※DAB( 品 番 :SK-4100)、AEC( 品 番 :SK-4200)、HistoGreen( 品 番 :E109)<br />
図 1 胎 児 子 宮 のパラフィン 切 片 の 三 重 染 色<br />
CD34(DAB 染 色 )、HLA-DR(HistoGreen 染 色 )、Pan<br />
-Cytokeratin(Vector VIP 染 色 )で 免 疫 染 色 した。<br />
構 成 内 容<br />
機<br />
器<br />
●HistoGreen Chromogen<br />
● 過 酸 化 水 素 水<br />
※ 全 て 滴 下 ボトル 入 り<br />
●HistoGreen バッファー<br />
● 希 釈 用 ワーキングソリューション<br />
図 2 リンパ 節 のパラフィン 切 片 の 四 重 染 色<br />
CD20(HistoGreen 染 色 )、CD34(VectorSG 染 色 )、<br />
HLA-DR(DAB Vector 染 色 )、CD8(Vector VIP 染 色 )<br />
で 免 疫 染 色 した。<br />
AbCys SA 略 号 AYS<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
HistoGreen, Substrate kit for peroxidase E109 1 kit ¥42,000 4<br />
4<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
Fluoromount/Plus & CC/Mount<br />
蛍 光 法 / 酵 素 法 での 組 織 染 色 に 最 適 な 水 溶 性 封 入 剤<br />
3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
<br />
in situハ<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
<br />
組<br />
<br />
【Fluoromount/Plus 退 色 防 止 剤 入 り 蛍 光 組 織 染 色 用 水 溶 性 封 入 剤 】<br />
蛍 光 色 素 で 染 色 した 組 織 にカバースリップをのせた 標 本 用 の 退 色 防<br />
止 剤 入 りの 水 溶 性 封 入 剤 です。 退 色 防 止 剤 によって 数 カ 月 間 、 蛍 光 を<br />
確 認 できます。 本 商 品 は FITCやフィコエリスリン、フィコシアニン、アロ<br />
フィコシアニン、テキサスレッド、ローダミン 等 の<br />
様 々な 蛍 光 色 素 を 用 いた 標 本 にお 使 いいただけま<br />
す。<br />
使 用 手 順<br />
1 試 薬 ボトルの 赤 色 チップを 取 り 除 きます。<br />
2 使 用 前 に、ボトルを 容 器 中 で 上 下 逆 さまに 置 き、Fluoromount/Plus<br />
の 細 かい 気 泡 を 取 り 除 きます。<br />
3 乾 燥 しないように 注 意 しながら、 組 織 標 本 から 余 分 な 水 分 を 拭 き 取<br />
ります。<br />
4 組 織 切 片 の 上 にFluoromount/Plus を2、3 滴 滴 下 し、カバース<br />
リップをそっとのせます。<br />
5 室 温 で30〜45 分 間 置 き、Fluoromount/Plus を 乾 燥 させます。<br />
※ 長 期 保 存 の 際 はカバースリップの 端 をマニキュア 液 でシールしてく<br />
ださい。<br />
Diagnostic BioSystems 略 号 DBS<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Fluoromount/Plus K048 25 F ¥29,000 3<br />
K048-200 200 F ¥184,000 3<br />
!<br />
ただ 今 サンプル( 約 2.5f) 配 布 中 です。コスモ・バイオホームページ( 欄 外 参 照 ) 上 の“キャンペーン 情 報 ・モニター 募 集 ”からサンプル 請 求 を 行 ってください。<br />
無 料 サンプルは1 研 究 室 あたり1 点 のみです。お 届 けまでに 数 日 かかります。<br />
関 連 商 品<br />
Fluoromount<br />
退 色 防 止 剤 を 含 まない 蛍 光 組 織 染 色 用 水 溶 性 封 入 剤<br />
Diagnostic BioSystems 略 号 DBS<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Fluoromount K024 25 F ¥9,000 3<br />
K024-200 200 F ¥65,000 3<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
【CC/Mount 酵 素 法 組 織 染 色 用 水 溶 性 封 入 剤 】<br />
AECやFast Redはそれぞれペルオキシダーゼとアルカリホスファ<br />
ターゼを 用 いた 免 疫 染 色 でよく 使 用 される 色 素 です。しかしこれらの<br />
色 素 で 染 色 されたスライドは、 高 屈 折 率 の 水 溶 性 永 久 保 存 封 入 剤 がな<br />
かったため、 永 久 保 存 することはできませんでした。CC/Mount は<br />
この 問 題 を 解 決 するべく 開 発 された 試 薬 で、 標 本 の 色 素 を 退 色 させず<br />
に 永 久 的 に 保 存 することができます。CC/Mount はAECやDAB、<br />
Fast Red、BCIP/NBT、BCIP/INTのような 色 素 及 びFITCやフィコビ<br />
リタンパク 質 のような 蛍 光 色 素 を 用 いた 標 本 にお 使 いいただけます。<br />
またCC/Mount はpH 値 が 高 く、 蛍 光 の 安 定 性 を 上 げることができ<br />
ます。<br />
使 用 手 順<br />
1 試 薬 ボトルの 赤 色 チップを 取 り 除 きます。<br />
2 使 用 前 に、ボトルを 容 器 中 で 上 下 逆 さまに 置 き、CC/Mount の 細<br />
かい 気 泡 を 取 り 除 きます。<br />
3 乾 燥 しないように 注 意 しながら、 組 織 標 本 から 余 分 な 水 分 を 拭 き 取<br />
ります。<br />
4 組 織 切 片 の 上 にCC/Mount を2、3 滴 滴 下 します。 手 首 を 動 かしな<br />
がらゆっくりとガラススライドを 旋 回 させ、CC/Mount の 薄 層 を 作<br />
ります。 組 織 部 分 をCC/Mount で 完 全 に 覆 うようにしてください。<br />
5 スライドをあらかじめ 70℃に 温 めたオーブンに 入 れ、およそ 10〜<br />
20 分 間 乾 燥 させます(CC/Mount の 量 によって 調 節 してくだ<br />
さ い )。<br />
6 スライドを 取 り 出 し 冷 ました 後 、 顕 微 鏡 で 観 察 します。<br />
7 蛍 光 色 素 で 染 色 した 標 本 を 加 熱 したくない 場 合 はカバースリップを<br />
CC/Mount の 液 体 上 にのせ、スライドを 室 温 で45 分 〜1 時 間 置<br />
いてCC/Mount を 乾 燥 させます。<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
Diagnostic BioSystems 略 号 DBS<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
CC/Mount K002 30 F ¥9,000 3<br />
K002-200 200 F ¥83,000 3<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp Cosmo Bio News No.98 5
in situハ<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
<br />
組<br />
<br />
<br />
組 織 染 色 、in situハイブリダイゼーション<br />
CISH/FISH 用 プローブキット<br />
In situ ハイブリダイゼーションのエキスパートがお 届 けするFISH/CISH 用 プローブキット<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
【CISH 用 プローブ ZytoDot®シ リ ー ズ 】<br />
光 学 顕 微 鏡 を 用 いて 遺 伝 子 変 化 を 確 実 かつ 簡 単 に 検 出 !<br />
ZytoDot®シリーズは、Chromogenic in situ hybridization<br />
(CISH) 法 により、 遺 伝 子 増 幅 や 染 色 体 異 常 を 検 出 するシステムです。<br />
ホルマリン 固 定 、パラフィン 包 埋 組 織 や 細 胞 、 血 液 、 骨 髄 の 塗 抹 標 本 、<br />
分 裂 中 期 の 染 色 体 分 布 の 検 出 にご 利 用 いただけます。<br />
特 長<br />
● 免 疫 染 色 よりも 迅 速 かつ 簡 単 に 解 析 できます。<br />
● 組 織 の 形 態 変 化 とCISHのシグナルを 同 時 に 観 察 できます。<br />
●CISHシグナルは 非 常 に 安 定 で、 標 本 を 常 温 保 存 できます。<br />
●シグナルが 強 く、 高 価 な 顕 微 鏡 は 必 要 ありません。<br />
●ジゴキシゲニン(DIG) 標 識 した「ZytoDot®」と、DIG/DNP 標 識 した<br />
「ZytoDot®2C」の2 種 類 をご 用 意 しています。<br />
図 1 ZytoDot®2Cシステムの 原 理<br />
ZytoDot® 2 C シ ス テ ム は 、 異 な る ゲ ノ ム 部<br />
分 をターゲットとするジゴキシゲニン 及 び<br />
DNP 標 識 カクテルプローブを 用 いる(1)。<br />
ブロッキング(2) 後 に、マウス 抗 ジゴキシゲ<br />
ニン/ウサギ 抗 DNP 抗 体 カクテルにより 検 出<br />
(3)。これらの 抗 体 はHRP 標 識 ヤギ 抗 マウ<br />
ス 抗 体 (4)とAP 標 識 ヤギ 抗 ウサギ 抗 体 (5)<br />
により 検 出 。AP-Red(6)とHRP-Green<br />
(7)の 酵 素 的 反 応 により 引 き 起 こされる 強<br />
いシグナルによって 光 学 顕 微 鏡 (40 倍 )で 観<br />
察 可 能 。<br />
図 2 ZytoDot®2C SPEC HER2/CEN17 プローブキットを 用 いてHER2 遺 伝 子 の 増 幅 を 検 出<br />
(A)1つの 核 周 辺 に 緑 (HER2) 及 び 赤 色 (CEN17)のドット 型 シグナルが 各 2つの 場 合 は 増 幅 していないが、<br />
増 幅 すると(B)のように、また 強 く 増 幅 すると(C)のように 観 察 される。<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
【CISH 用 プローブ ZytoFast®シ リ ー ズ 】<br />
【FISH 用 プローブ ZytoLight®シ リ ー ズ 】<br />
わずか4 時 間 でCISH 結 果 が 得 られます<br />
蛍 光 ラベルを 利 用 して 複 数 ターゲットを 同 時 検 出 !<br />
特 長 特 長<br />
汎<br />
用<br />
● 非 常 に 迅 速 なCISH 反 応 :ZytoFast®システムの 最 適 化 されたプロ<br />
トコールと 短 いオリゴヌクレオチドプローブの 迅 速 な 組 織 透 過 性 に<br />
より、ZytoFast®CISH 手 順 は 非 常 に 早 く 終 了 します。1 色 検 出 は<br />
4 時 間 以 内 、 操 作 時 間 は 約 2 時 間 です。<br />
● 高 い 感 度 と 特 異 性 :ZytoFast®プローブは、 全 て 独 自 のZytoFast®<br />
HighTag systemを 使 用 して 標 識 されたプローブで、シグナル 強 度<br />
が 改 良 されています。 最 適 化 されたオリゴヌクレオチドプローブにより、<br />
クロスハイブリダイゼーションのリスクがない 高 い 特 異 性 を 示 します。<br />
●パラフィン 包 埋 切 片 のリンパ 球 クローナリティの 判 別 や 病 原 性 ウイ<br />
ルスの 検 出 ・ 識 別 にご 利 用 いただけます。<br />
●ビ オ チ ン 標 識 し た「 ZytoFast®」と、DIG 標 識 した「ZytoFast®<br />
Plus」の2 種 類 をご 用 意 しています。<br />
●Fluorescence in situ hybridization(FISH) 法 により 転 座 や 欠<br />
損 、 増 幅 、 染 色 体 異 常 等 を 検 出 するためのシステムです。<br />
● 高 い 選 択 性 と 特 異 性 :ZytoLight®Direct Label System IIを 使 用<br />
して 直 接 標 識 したプローブで、これによりシグナル 強 度 が 改 良 され<br />
ています。ZytoLight®の 単 一 プローブ(SPEC)は 全 てZytoLight®<br />
Repeat Subtraction Techniqueにより 加 工 されており、 特 異 性<br />
の 向 上 や 低 バックグラウンドを 得 ることができます。 繰 り 返 し 配 列 を<br />
さらにブロッキングする 必 要 はありません。<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
図 3<br />
ZytoFast®システムはビオチンあるいはジゴキシゲニンで 標 識 した<br />
オリゴヌクレオチドプローブを 用 いて(1)、ビオチンあるいはジゴキ<br />
シゲニンに 特 異 的 な 酵 素 結 合 させた 抗 体 で 検 出 する(2)。 発 色 基 質<br />
(BCIP/NBTあるいはAEC)と 酵 素 が 反 応 し(3)、 強 い 色 素 沈 殿 を 形<br />
成 。これを 光 学 顕 微 鏡 で 観 察 。<br />
図 4 ZytoLight®システムを 使 用 したパラフィン 包 埋 組 織 片 のFISH 解 析 と 分 裂 中 期 の 拡 散<br />
(A) 乳 房 組 織 切 片 のHER2 遺 伝 子 を 増 幅 させて 検 出 。(B) 胞 巣 状 横 紋 筋 肉 腫 におけるt(2;13) 転 座 を 検 出 。<br />
それぞれ 赤 色 、 緑 色 で 検 出 し、 重 なり 合 ったシグナルは 黄 色 を 示 している。(C)CEN X/Y Dual Color<br />
Probeを 用 いた 正 常 男 性 組 織 の 分 裂 中 期 の 拡 散 の 検 出 。<br />
ZytoVision GmbH 略 号 ZYV<br />
各 シリーズとも 様 々なプローブと、 専 用 検 出 キットを 取 り 揃 えています。<br />
詳 細 につきましては、コスモ・バイオホームページ 上 の“サイト 内 検 索 ”でご 確 認 ください。(キーワード:ZytoDot、ZytoFastまたはZytoLight)<br />
機<br />
器<br />
6<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
ウサギモノクローナル 抗 体 ─SPクローンとEPクローン─<br />
免 疫 組 織 化 学 の 強 力 ツールです!<br />
3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
in situハ<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
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イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
<br />
組<br />
<br />
【スプリングバイオサイエンス 社 のSPクローン】<br />
スプリングバイオサイエンス 社 のウサギモノクローナル 抗 体 SPクローン<br />
は、 高 い 親 和 性 ・ 感 度 ・ 特 異 性 を 示 す、 最 高 品 質 の 免 疫 組 織 化 学 マーカー<br />
です。その 頑 健 性 、 高 感 度 、 特 異 的 な 特 長 から、それぞれの 領 域 で 国 際<br />
的 に 卓 越 した 抗 体 として 広 く 知 られています。SP1クローンであるエス<br />
トロゲンレセプター 抗 体 をはじめ、サイクリン-D1(SP4)、Ki-67(SP6)、<br />
cMET(SP44)、H.Pylori(SP48) 等 、 免 疫 組 織 化 学 研 究 に 有 用 な 癌 の<br />
マーカーが 揃 っています。この 抗 体 で 利 用 している 最 新 のウサギモノ<br />
クローナル 抗 体 (RMab) 技 術 は、 前 世 代 のウサギモノクローナル 抗 体<br />
に 比 べても 独 自 の 利 点 があり、マウスモノクローナル 抗 体 の 技 術 とも<br />
全 く 異 なります。リコンビナントウサギモノクローナル 抗 体 の 主 要 な 利<br />
点 を 下 表 に 示 します。<br />
ウサギ<br />
ウサギ<br />
ウサギ<br />
マウス<br />
モノクローナル 抗 体 モノクローナル 抗 体<br />
ポリクローナル 抗 体 モノクローナル 抗 体<br />
(フュージョンパートナー) (リコンビナント)<br />
再 現 性 × ○ ○ ○<br />
特 異 性 × △ ○ ○<br />
IHCへの 適 用 △ △ ○ ○<br />
ホスト 動 物 の 犠 牲 必 要 必 要 必 要 不 要<br />
安 定 的 なクローンの 産 生 × × × ○<br />
図 2 SPクローンのIHC 結 果<br />
A:S100β 抗 体 ( 品 番 :M4274)で 染 色 したヒト 扁 桃 腺<br />
B:クローディン-1 抗 体 ( 品 番 :M4284)で 染 色 したヒト 肝 細 胞 癌<br />
C:EZH2 抗 体 ( 品 番 :M4294)で 染 色 したヒト 前 立 腺 癌<br />
D:Ku80 抗 体 ( 品 番 :M4304)で 染 色 したヒト 扁 桃 腺<br />
E: 黄 体 ホルモン 抗 体 ( 品 番 :M4324)で 染 色 したヒト 脳 下 垂 体<br />
F:FoxP1 抗 体 ( 品 番 :M4334)で 染 色 したヒト 扁 桃 腺<br />
G:Fn14 抗 体 ( 品 番 :M4344)で 染 色 したヒト 腎 細 胞 癌<br />
H:ケラチン18 抗 体 ( 品 番 :M4354)で 染 色 したヒト 肝 臓<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
図 1<br />
最 新 のウサギモノクローナル 抗 体 SPクローン 技 術<br />
Spring Bioscience<br />
略 号 SBS<br />
詳 細 につきましては、コスモ・バイオホームページ 上 の“サイト 内 検 索 ”をご 利 用 ください。(キーワード:SPクローン)<br />
汎<br />
用<br />
【エピトミクス 社 のEPクローン】<br />
EPクローンは、エピトミクス 社 特 許 取 得 済 みのRabMAb®テクノロ<br />
ジーにより 作 製 したウサギモノクローナル 抗 体 で、ヒトホルマリン 固<br />
定 ・パラフィン 包 埋 (FFPE) 組 織 の 免 疫 組 織 染 色 (IHC)に 使 用 するため<br />
特 別 に 開 発 ・ 最 適 化 した 抗 体 です。コスモ・バイオホームページでは、<br />
他 社 製 品 との 豊 富 な 比 較 データと 共 に 紹 介 しています。<br />
EP78<br />
Staining score : 4<br />
JC70<br />
Staining score : 3<br />
図 1 ウサギ 対 マウスの 染 色 比 較<br />
(ヒト 結 腸 組 織 )<br />
左 :ウサギモノクローナル 抗 体 <br />
EP78クローンの 染 色 結 果<br />
右 :マウスモノクローナル 抗 体 <br />
JC70クローンの 染 色 結 果<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
図 2 EPクローンの 染 色 例<br />
EPクローンを 用 いて、ヒト 乳 癌 FFPE 切 片 で 乳 癌 マーカーを 免 疫 組 織 化 学 的 に 検 出<br />
詳 細 につきましては、コスモ・バイオホームページ 上 の“サイト 内 検 索 ”をご 利 用 ください。(キーワード:EPクローン)<br />
EPITOMICS, INC.<br />
略 号 EPT<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp Cosmo Bio News No.98 7
in situハ<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
<br />
組<br />
<br />
<br />
組 織 染 色 、in situハイブリダイゼーション<br />
コスモ・バイオ 取 り 扱 いのおすすめ 生 体 組 織 供 給 メーカー 紹 介<br />
信 頼 できるメーカーから 生 体 組 織 を 調 達 致 します!<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
【 組 織 ブロック&スライド】<br />
コスモ・バイオのおすすめする、 生 体 組 織 ブロックや 組 織 スライドの 取 扱 メーカーを<br />
ご 紹 介 します。お 問 い 合 わせいただければ、ご 要 望 に 応 じて 条 件 に 合 った 商 品 を 探 索 、<br />
またはカスタムにてお 客 様 ご 要 望 の 商 品 をお 取 り 寄 せ 致 します。 取 扱 メーカーにて<br />
品 番 が 確 定 している 商 品 は、コスモ・バイオのホームページで 検 索 いただけます。<br />
コスモ・バイオホームページ 上 の“ 商 品 検 索 ” 欄 下 の「 詳 細 」や「カテゴリ」をクリックし、<br />
検 索 画 面 にお 進 みください( 右 図 )。<br />
Tissue Solutions 社<br />
(メーカー 略 号 :TIS)<br />
BioChain 社<br />
(メーカー 略 号 :BCH)<br />
Prosci 社<br />
(メーカー 略 号 :PSC)<br />
OriGene 社<br />
(メーカー 略 号 :ORG)<br />
【 組 織 アレイ】<br />
メーカー 名 特 長<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
手 術 時 に 切 除 された 正 常 組 織 、 癌 組 織 等 を 国 立 機 関 から 譲 り 受 け、 組 織 ブロックとして 販 売 しています。 凍 結 、<br />
パラフィン 包 埋 組 織 のイチオシメーカーです。<br />
様 々な 部 位 のヒト 正 常 組 織 スライド、ヒト 胎 児 正 常 組 織 スライドに 品 番 が 付 けられており、コスモ・バイオホーム<br />
ページでご 検 索 いただけます。また、マウス、ラット、ウサギ、ウシ、ヌードマウス、ハムスター、ブタ、マウス 胎 児 の<br />
正 常 組 織 、 及 びヒトの 各 種 腫 瘍 組 織 スライドも 用 意 しています。<br />
ヒト、マウス、ラットの 正 常 、 腫 瘍 、その 他 疾 患 のパラフィン 包 埋 組 織 スライドを 販 売 しています。 品 番 が 付 けられ<br />
ており、メーカーのホームページでそれぞれの 商 品 と 在 庫 ロットの 状 況 を 確 認 でき、 包 装 形 態 の 写 真 もご 覧 にな<br />
れます。スライド5 枚 入 りで、 厚 さは4μmと10μmで 選 択 可 能 です。<br />
ヒト 正 常 組 織 とヒト 腫 瘍 組 織 のスライド 及 び 組 織 ブロックを 販 売 しています。パラフィン 包 埋 組 織 とOCT 包 埋 の<br />
凍 結 組 織 の 両 方 を 販 売 しています。14 万 点 以 上 の 組 織 を 保 有 しており、 全 ての 組 織 ブロックについて、ドナー<br />
のデータベースの 閲 覧 が 可 能 です。<br />
<br />
インフォームド・<br />
コンセントの 取 得<br />
(ヒト 組 織 )<br />
ウイルス<br />
チェック 項 目<br />
多 種 類 の 正 常 組 織 または 病 理 組 織 切 片 を 集 約 し、1 枚 のスライドガラスに 並 べてスポットした 商 品 です。タンパク 質 発 現 等 、1 枚 のアレイで 数 多 くの<br />
組 織 解 析 が 可 能 です。ここではコスモ・バイオの 取 扱 メーカーをご 紹 介 します。スポットされている 組 織 の 詳 細 情 報 や 位 置 情 報 等 は、 各 社 ホームペー<br />
ジでご 確 認 ください。 組 織 の 部 位 についてもお 選 びいただけます。またお 目 当 ての 商 品 が 見 つからない 場 合 は、コスモ・バイオまでお 問 い 合 わせく<br />
ださい。カタログにご 希 望 の 商 品 がない 場 合 には、カスタムアレイの 作 製 を 承 ります。ご 注 文 方 法 及 び 希 望 販 売 価 格 につきましては、コスモ・<br />
バイオホームページ 上 の 商 品 検 索 画 面 で 品 番 とメーカー 略 号 を 用 いてご 検 索 いただくか、コスモ・バイオ( 欄 外 参 照 )までお 問 い 合 わせください。<br />
取 得 済<br />
取 得 済<br />
取 得 済<br />
取 得 済<br />
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HIV、HBV、<br />
HCV<br />
HIV、HBV、<br />
HCV、HTLV<br />
HIV、HBV、<br />
HCV、HTLV<br />
ご 照 会<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
機<br />
器<br />
BioChain 社 <br />
(メーカー 略 号 :BCH)<br />
US Biomax 社 <br />
(メーカー 略 号 :BMX)<br />
OriGene 社 <br />
(メーカー 略 号 :ORG)<br />
Protein<br />
Biotechnologies 社 <br />
(メーカー 略 号 :PBT)<br />
Prosci 社 <br />
(メーカー 略 号 :PSC)<br />
Pantomics 社 <br />
(メーカー 略 号 :PTM)<br />
メーカー 名 製 品 ラインアップ アピールポイント・その 他<br />
ヒト 成 人 & 胎 児 の 正 常 凍 結 組 織 アレイ<br />
ヒト 腫 瘍 組 織 凍 結 アレイ<br />
● 凍 結 組 織 のアレイも 用 意<br />
多 種 間 (15 種 ) 比 較 用 の 凍 結 肝 臓 & 脳 組 織 アレイ<br />
● 凍 結 組 織 は、 全 てのロットのスライドでH&E 染 色 を 行 うことで 品 質 を 確 認<br />
FDAスタンダード 凍 結 組 織 アレイ<br />
●パラフィン 包 埋 切 片 はin situハイブリダイゼーションに 使 用 可 能<br />
凍 結 &パラフィン 包 埋 組 織 パネル(ヒト 成 人 、ヒト 疾 患 、サル 正 常 、マウス 正 常 ) ●ISOを 取 得 ( 番 号 :10004539 QM08)<br />
成 犬 の 正 常 凍 結 組 織 アレイ<br />
ヒト 成 人 ・ 胎 児 正 常 パラフィン 包 埋 組 織 アレイ<br />
ヒト 腫 瘍 組 織 アレイ(パラフィン 包 埋 組 織 )<br />
ヒトFDAスタンダードパラフィン 包 埋 組 織 アレイ<br />
マウス・ラット 正 常 パラフィン 包 埋 組 織 アレイ<br />
ヒト 正 常 ・ 腫 瘍 凍 結 組 織 アレイ<br />
その 他 動 物 凍 結 組 織 アレイ<br />
ヒトパラフィン 包 埋 組 織 マイクロアレイ( 正 常 ・ 腫 瘍 )<br />
ヒト 正 常 ・ 癌 組 織 マイクロアレイ(パラフィン 包 埋 組 織 )<br />
癌 タンパク 質 ライセートアレイ<br />
ヒト 腫 瘍 ・ 疾 患 組 織 マイクロアレイ<br />
多 種 間 (ヒト、マウス、ラット) 比 較 用 パラフィン 包 埋 組 織 アレイ<br />
ヒト 正 常 ・ 腫 瘍 ・ 疾 患 のパラフィン 包 埋 組 織 アレイ<br />
ヒト 正 常 ・ 腫 瘍 ・ 疾 患 組 織 マイクロアレイ<br />
マウス・ラット・サルの 正 常 組 織 アレイ<br />
● 凍 結 組 織 のアレイも 用 意<br />
●ヒトパラフィン 包 埋 切 片 を 用 いた 組 織 アレイは、46 種 類 の 異 なる 組 織 のものを<br />
ご 用 意<br />
● 全 ての 組 織 アレイは、 未 染 色 とH&E 染 色 の 両 方 のデータを 提 供 可 能<br />
●おすすめの 解 析 プロトコールをメーカーホームページで 公 開<br />
●その 月 の 組 織 アレイランキングをメーカーホームページで 公 開<br />
● 組 織 は 数 百 種 にものぼる 病 理 診 断 結 果 を 受 けた140,000 以 上 の 組 織 サンプ<br />
ルを 保 有 するOriGene Tissue Biorepositoryから 供 給<br />
●アレイの 位 置 情 報 やドナー 情 報 を 詳 細 にホームページで 紹 介<br />
●H&E 染 色 の 画 像 と 詳 細 な 病 理 レポート 付 き<br />
●IHCとin situハイブリダイゼーションに 使 用 可 能<br />
●アレイの 位 置 情 報 やドナー 情 報 をメーカーホームページで 紹 介<br />
● 疾 患 の 部 位 別 にメーカーホームページで 紹 介<br />
●IHCとin situハイブリダイゼーションに 使 用 可 能<br />
●おすすめのデータ 解 析 ソフトウェアをメーカーホームページにてご 紹 介<br />
●IHC、IF、ISH、FISH 用 を 用 意<br />
●ヒト、マウス、ラットの3 種 同 時 測 定 用 スライドを 用 意<br />
●IHC 用 には10μmの 厚 さを 推 奨<br />
● 組 織 アレイの 種 類 は300 以 上<br />
●アレイ 用 の 組 織 は、 注 文 後 にスライスして 用 意 するため、 高 品 質<br />
●メーカーホームページにて、 種 、 組 織 、 疾 患 の 種 類 で 取 り 扱 い 商 品 の 横 断 検 索<br />
が 可 能<br />
●IHCとISHベースのタンパク 質 またはRNAの 組 織 プロファイリングに 使 用 可 能<br />
8<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp
「Arf1&6 活 性 アッセイキット」 サイトスケルトン 社<br />
ゴルジ 体 を 介 する 小 胞 体 と 細 胞 膜 の 間 の 順 方 向 ・ 逆 方 向 の 輸 送 で 機 能 しているArf1と、エン<br />
ドサイトーシスやアクチン 細 胞 骨 格 リモデリングの 調 節 に 密 接 に 関 係 しているArf6の 活 性 を<br />
測 定 する、2 種 類 (G-LISA、プルダウン)のキットです。<br />
シグナル 伝 達<br />
P.10<br />
「StemBeads FGF2」 ステムカルチャー 社<br />
StemBeads FGF2は、 米 国 食 品 医 薬 品 局 (FDA)によって 承 認 されたPLGAポリマーに<br />
FGF2を 封 入 したもので、 一 定 量 のFGF2を3 日 間 安 定 して 放 出 することができます。<br />
細 胞 培 養 ・<br />
細 胞 工 学<br />
P.16<br />
「D-セリン 測 定 キット( 比 色 法 )」 コスモ・バイオ 株 式 会 社<br />
従 来 、 測 定 困 難 だったD-セリンを 簡 便 に 定 量 するキットです。D-セリンに 特 異 的 に 作 用 する<br />
新 規 酵 素 を 使 用 しています。<br />
バイオ<br />
メディカル<br />
P.19<br />
「DiSH キット」 エンゾ・ライフサイエンス 社<br />
新 技 術 によりハイブリドーマ 作 製 の 時 間 とコストを 節 減 する 画 期 的 な 商 品 です。ミエローマ<br />
融 合 パートナーに 改 良 を 加 えることで、マーカーを 発 現 させている 目 的 ハイブリドーマだけ<br />
を 標 識 することを 可 能 にしました。<br />
汎<br />
用<br />
P.20<br />
「Gene-TALER Custom TALEN and TALE-TFサービス」 ジーンコピア 社<br />
Transcription Activator-Like(TAL)エフェクターを 利 用 して 位 置 特 異 的 にゲノムを 編 集 する<br />
受 託 サービスです。TALエフェクターは、 酵 素 (TALEN)、 転 写 因 子 (TALE-TF) 及 びその 他 の<br />
機 能 性 ドメインとの 融 合 により、 染 色 体 の 標 的 配 列 を 特 異 的 に 認 識 ・ 結 合 し、 位 置 特 異 的 な<br />
遺 伝 子 編 集 (gene-editing)を 実 現 します。<br />
受<br />
託<br />
サービス<br />
P.23<br />
「 大 容 量 遺 伝 子 導 入 装 置 AgilePulseMAX」 バイオTX 社<br />
キュベットでのプロトコールでそのままスケールアップ(2〜5f)が 可 能 な 遺 伝 子 導 入 装 置<br />
です。<br />
機<br />
器<br />
P.24<br />
誌 面 スペースの 都 合 上 、ご 紹 介 できなかった 新 商 品 もたくさんあります。<br />
コーヒーブレークにぜひ、コスモ・バイオホームページ“ 商 品 の 最 新 情 報 ” 欄 をご 覧 ください。<br />
Cosmo Bio News No.98 9
[<br />
特<br />
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ル<br />
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胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
血 小 板 VASP/P2Y12アンタゴニスト 活 性 測 定 キット<br />
新 しいP2Y12アンタゴニスト 薬 の 開 発 、 検 証 に<br />
血 小 板 ADP のレセプター(P2Y12)のアンタゴニストである<br />
Thienopyridine 及 びそのアナログを、フローサイトメトリーでモニタ<br />
リング するため の キットです。<br />
ADPは 血 液 凝 固 において 重 要 な 因 子 の1つであり、ADPの 受 容 体 で<br />
あるP2Y1とP2Y12( 共 にGタンパク 質 結 合 受 容 体 )を 介 して 血 小 板 の 活<br />
性 化 を 促 します。P2Y1はADPによる 凝 固 反 応 に 重 要 な 役 割 を 果 たし、<br />
P2Y12は 凝 集 反 応 の 完 了 とさらなる 凝 集 の 引 き 金 となります。<br />
VASP( 血 管 拡 張 因 子 刺 激 リン 酸 化 タンパク 質 )は、 細 胞 内 血 小 板 タン<br />
パク 質 で、 基 本 状 態 ではリン 酸 化 されていません。VASPのリン 酸 化 は、<br />
cAMP 経 路 によって 調 節 されています。この 経 路 は、PGE1(プロスタグ<br />
ランジン1)によって 活 性 化 される( 図 1-1) 一 方 、 受 容 体 であるP2Y12<br />
を 介 してADPにより 阻 害 されます( 図 1-2)。 本 商 品 の 測 定 条 件 では、<br />
受 容 体 P2Y12の 阻 害 によりVASPがリン 酸 化 され、 逆 に 受 容 体 P2Y12<br />
が 活 性 化 されるとADPがPGE1の 働 きを 抑 制 し、VASP-Pを 非 リン 酸 化<br />
状 態 のVASPにします。PGE1により 誘 導 されるVASPのリン 酸 化 の 持<br />
続 を 測 ることで、ex vivoでのThienopyridineの 効 能 を 検 証 すること<br />
ができます( 図 1-3)。また、in vitroにおける 受 容 体 P2Y12のアンタゴ<br />
ニストの 効 果 を 検 証 することもできます。<br />
研 究 用<br />
平 均 蛍 光 強 度 値 (MFIc)から、 下 記 の 計 算 式 に 従 い、 血 小 板 反 応 性<br />
指 標 (PRI;platelet reactivity index)を 算 出 します。<br />
PRI=[(MFIc(PEG1)−MFIc(PEG1+ADP))/MFIc(PEG1)]×100<br />
MFIc(PEG1):PGE1のみ 存 在 下 のMFIc<br />
MFIc(PEG1+ADP):PGE1 及 びADP 存 在 下 のMFIc<br />
図 1 VASPのリン 酸 化 の 模 式 図<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
BioCytex SARL 略 号 BCT<br />
品 名 / 構 成 内 容 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
PLATELET VASP-FCM 7014 1 kit(10 test) ¥28,000 4<br />
● 希 釈 液 ● 固 定 試 薬 ●PGE1 ●PGE1+ADP ●VASP-Pモノクローナル 抗 体 ●ネガティブアイソタイプコントロール<br />
●FITC 標 識 染 色 試 薬 +カウンター 染 色 試 薬 (CD61-PE)<br />
血 小 板 GpIIb/IIIaレセプター 結 合 度 測 定 キット<br />
フローサイトメトリーでGpIIb/IIIaレセプターへの 結 合 度 を 測 定<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
GpIIb/IIIa 糖 タンパク 質 ( 抗 凝 集 物 質 )とそのレセプターとの 結 合 度 を<br />
フローサイトメトリーで 分 析 するキットです。 血 小 板 のGpIIb/IIIaレセプ<br />
ターのトータル 量 とフリー( 抗 凝 集 物 質 に 結 合 していないレセプター)の<br />
量 を 蛍 光 強 度 により 測 定 し、スタンダードカーブと 比 較 することで 算 出<br />
できます。<br />
血 小 板 GpIIIに 特 異 的 な2 種 類 のモノクローナル 抗 体 をサンプルに<br />
加 えて 染 色 し、フローサイトメトリーで 蛍 光 強 度 を 測 定 します。 蛍 光 強<br />
度 は、 血 小 板 表 面 に 結 合 したモノクローナル 抗 体 の 数 に 比 例 します。<br />
2 種 類 のモノクローナル 抗 体 を 使 用 することで、2つのパラメーター<br />
(GpIIb/IIIaレセプターのトータル 量 及 びフリーの 量 )を 同 時 に 定 量 で<br />
きます。<br />
図 1 校 正 用 ビーズの 分 析<br />
左 :FSとSSを 対 数 でプロット<br />
したサイトグラム。ビーズの<br />
メイン 群 (「CAL」で 表 した 部<br />
分 )に ゲ ート を セ ット す る 。<br />
右 : 左 図 の「CAL」 部 分 の 蛍 光<br />
ヒストグラム。3つの 蛍 光<br />
ピーク( 図 中 A、B、C)が3 種 類<br />
の 校 正 用 ビーズを 示 す。<br />
■ 表 1: 結 合 度 の 算 出 方 法<br />
図 2 サンプル( 全 血 )の 分 析<br />
左 :FSとSSを 対 数 でプロットし<br />
たサイトグラム。 血 小 板 が 他 の<br />
血 液 成 分 から 単 離 される( 図 中<br />
「PLT」 部 分 )。<br />
右 : 血 小 板 の 蛍 光 ヒストグラム。<br />
図 3 校 正 用 ビーズのスタン<br />
ダードカーブ( 例 )<br />
X 軸 :3 種 類 の 校 正 用 ビーズの<br />
MFI( 蛍 光 強 度 平 均 値 )<br />
Y 軸 :ビーズのモノクローナル 抗<br />
体 分 子 の 量 (ロットごとに 表 示 )<br />
抗 凝 集 物 質 のタイプ モノクローナル 抗 体 ペプチドまたはペプチド 模 倣 薬<br />
GpIIIa トータル MAb2 MAb1<br />
レセプターの フリー MAb1 MAb2<br />
量<br />
結 合 MAb2-MAb1 MAb1-MAb2<br />
結 合 比 (%) (MAb2-MAb1)/MAb2 x 100(MAb1-MAb2)/MAb1 x 100<br />
機<br />
器<br />
BioCytex SARL 略 号 BCT<br />
品 名 / 構 成 内 容 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
PLATELET GpIIb/IIIa Occupancy(total and free GpIIb/IIIa receptor) 7001 1 kit ¥38,500 4<br />
● 希 釈 液 (x10) ●ネガティブコントロール(マウスモノクローナル 抗 体 IgG)<br />
●MAb1 試 薬 ( 抗 GpIIIa(CD61)モノクローナル 抗 体 ) ●MAb2 試 薬 ( 抗 GpIIIa (CD61)モノクローナル 抗 体 )<br />
● 校 正 用 ビーズ 懸 濁 液 ( 既 知 量 のマウスIgGでコートされたビーズ) ● 染 色 試 薬 (FITC 標 識 抗 マウスIgGポリクローナル 抗 体 )<br />
10<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 しく 発 売 された 商 品 です。 今 後 の 注 目 商 品 です。 ベストセラー 商 品 です。 3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
デキストラマーパッケージ<br />
T 細 胞 研 究 用 デキストラマーをセットにしました<br />
本 商 品 は、 様 々な 臨 床 環 境 でのT 細 胞 の 抗 原 特 異 的 な 応 答 をモニターするためのデキストラマーを、 厳 選 してセットにしたものです。<br />
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特<br />
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■メラノーマデキストラマーコレクション1( 品 番 :RX01)/ 精 巣 癌 抗 原 デキストラマーコレクション1( 品 番 :RX02)<br />
メラノーマに 特 異 的 なCD8 + 細 胞 の 検 出 及 び 単 離 と 精 巣 癌 に 特 異 的 なCD8 + 細 胞 の 検 出 及 び 単 離 を 目 的 としたコレクションです。<br />
Immudex ApS 略 号 IMX<br />
デキストラマー(アレル/ペプチド 配 列 ) 抗 原<br />
包 装<br />
RX01<br />
RX02<br />
単 品 品 番<br />
HLA-A*0201/ELAGIGILTV-PE MART-1 25 test ─ WB2162-PE<br />
HLA-A*0201/ELAGIGILTV-APC MART-1 25 test ─ WB2162-APC<br />
HLA-A*0201/SLLMWITQV-PE NY-ESO-1 25 test 25 test WB3247-PE<br />
HLA-A*0201/SLLMWITQV-APC NY-ESO-1 25 test 25 test WB3247-APC<br />
HLA-A*0201/KVAELVHFL-PE MAGE-A3 25 test 25 test WB3497-PE<br />
HLA-A*0201/KVAELVHFL-APC MAGE-A3 25 test 25 test WB3497-APC<br />
HLA-A*0201/YMDGTMSQV-PE Tyrosinase 25 test ─ WB3245-PE<br />
HLA-A*0201/YMDGTMSQV-APC Tyrosinase 25 test ─ WB3245-APC<br />
HLA-A*0201/IMDQVPFSV-PE gp100 25 test ─ WB2158-PE<br />
HLA-A*0201/IMDQVPFSV-APC gp100 25 test ─ WB2158-APC<br />
HLA-A*0201/KVLEYVIKV-PE MAGE-A1 25 test 25 test WB3474-PE<br />
HLA-A*0201/KVLEYVIKV-APC MAGE-A1 25 test 25 test WB3474-APC<br />
HLA-A*0201/Negative Control-PE Nonsense 25 test 25 test WB2666-PE<br />
HLA-A*0201/Negative Control-APC Nonsense 25 test 25 test WB2666-APC<br />
■ウイルスデキストラマーコレクション1( 品 番 :RX03-PE、-APC、-FITC)<br />
免 疫 損 失 個 体 や 移 植 後 の 免 疫 状 態 のモニタリング、ワクチンテスト、ウイルス 特 異 的 なT 細 胞 応 答 プロファイルのためのコレクションです。<br />
下 記 デキストラマーのセットにそれぞれ、PE、APC、FITC 標 識 をしたものです。<br />
Immudex ApS 略 号 IMX<br />
デキストラマー(アレル/ペプチド 配 列 ) ウイルス 包 装 単 品 品 番<br />
HLA-A*0201/NLVPMVATV CMV 50 test WB2132 *<br />
HLA-A*0201/GLCTLVAML EBV 50 test WB2130 *<br />
HLA-A*0201/GILGFVFTL Influenza 50 test WB2161 *<br />
HLA-A*0201/LLMWEAVTV BK virus 50 test WB2687 *<br />
HLA-A*0201/Negative Control Neg. control 50 test WB2666 *<br />
* 単 品 品 番 の 末 尾 には、 標 識 により-PE、-APC、-FITCが 付 きます。<br />
■CMVデキストラマーコレクション1( 品 番 :CMV-PACK-PE、-APC、-FITC)<br />
CMV 免 疫 状 態 のモニタリング、CMV 特 異 的 ワクチンテスト、CMV 特 異 的 T 細 胞 応 答 プロファイルのためのコレクションです。<br />
下 記 デキストラマーのセットにそれぞれ、PE、APC、FITC 標 識 をしたものです。<br />
Immudex ApS 略 号 IMX<br />
デキストラマー(アレル/ペプチド 配 列 ) 抗 原 包 装 単 品 品 番<br />
HLA-A*0101/VTEHDTLLY pp50 50 test WA2131 *<br />
HLA-A*0201/NLVPMVATV pp65 2 x 50 test WB2132 *<br />
HLA-A*0301/KLGGALQAK IE-1 50 test WC2197 *<br />
HLA-A*2402/QYDPVAALF pp65 50 test WF2133 *<br />
HLA-B*0702/RPHERNGFTVL pp65 50 test WH2135 *<br />
HLA-B*0702/TPRVTGGGAM pp65 50 test WH2136 *<br />
HLA-B*0801/ELRRKMMYM pp65 50 test WI2137 *<br />
HLA-B*3501/IPSINVHHY pp65 50 test WK2138 *<br />
General/Negative Control Nonsense 3 x 50 test NI3233 *<br />
* 単 品 品 番 の 末 尾 には、 標 識 により-PE、-APC、-FITCが 付 きます。<br />
■EBVデキストラマーコレクション1( 品 番 :RX05-PE、-APC、-FITC)<br />
EBV 免 疫 状 態 のモニタリング、EBV 特 異 的 ワクチンテスト、EBV 特 異 的 T 細 胞 応 答 プロファイルのためのコレクションです。<br />
下 記 デキストラマーのセットにそれぞれPE、APC、FITC 標 識 をしたものです。<br />
Immudex ApS 略 号 IMX<br />
デキストラマー(アレル/ペプチド 配 列 ) ウイルス 包 装 単 品 品 番<br />
HLA-A*0201/GLCTLVAML BMLF-1 50 test WB2130 *<br />
HLA-B*3501/HPVGEADYFEY EBNA-1 50 test WK2145 *<br />
HLA-B*0702/RPPIFIRRL EBNA-3A 50 test WH2166 *<br />
HLA-B*0801/FLRGRAYGL EBNA-3A 50 test WI2147 *<br />
General/Negative Control Nonsense 50 test NI3233 *<br />
* 単 品 品 番 の 末 尾 には、 標 識 により-PE、-APC、-FITCが 付 きます。<br />
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用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
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ビ<br />
ス<br />
Immudex ApS 略 号 IMX<br />
各 キットに 含 まれているデキストラマーは 単 品 でも 販 売 しています。 単 品 では3 種 類 のサイズ(50、150、150テスト)をご 用 意 しています。<br />
希 望 販 売 価 格 は、コスモ・バイオ 商 品 取 扱 代 理 店 または、コスモ・バイオ( 欄 外 参 照 )までお 問 い 合 わせください。<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 11
[<br />
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染<br />
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達<br />
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培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
Arf1&6 活 性 アッセイキット<br />
Arf1とArf6の 活 性 を 測 定 する2 種 類 (G-LISA、プルダウン)のキット<br />
ゴルジ 体 を 介 する 小 胞 体 と 細 胞 膜 の 間 の 順 方 向 ・ 逆 方 向 の 輸 送 で 機<br />
能 しているArf1( 図 1)と、エンドサイトーシスやアクチン 細 胞 骨 格 リモ<br />
デリングの 調 節 に 密 接 に 関 係 しているArf6( 図 2)は、 共 にGTPaseスー<br />
パーファミリーのサブファミリーに 属 するADPリボシル 化 因 子 (Arf)で<br />
す。 哺 乳 類 にはArfアイソフォームがArf1〜Arf6と6つありますが、Arf1<br />
とArf6が 研 究 対 象 の 中 心 となっています。<br />
今 回 、Arf1とArf6を 測 定 するためのキットとして、G-LISAアッセイと<br />
プルダウンアッセイの 2つのキットをご 紹 介 します。G-LISAアッセイで<br />
は、 活 性 型 Arf1とArf6に 選 択 的 に 結 合 するエフェクタータンパク 質 で<br />
コートした96ウェルプレートを 用 い、ELISA 技 術 を 用 いて 定 量 化 します。<br />
プルダウンアッセイでは、GTP 結 合 型 Arf1とArf6に 特 異 的 に 結 合 する<br />
エフェクタータンパク 質 GGA3(Golgi-localized γ-ear containing,<br />
Arf-binding protein 3)の、Arf1とArf6のタンパク 質 結 合 ドメイン<br />
(PBD)を 利 用 します。 着 色 したセファロースビーズと 共 有 結 合 させた<br />
GGA3-PBDでプルダウンし、ウェスタンブロットにより 活 性 型 Arf1-GTP<br />
とArf6-GTPを 定 量 することが 可 能 です。<br />
構 成 内 容<br />
図 1 ゴルジ 体 の 小 胞 形 成 期 において、Arf1がアクチンの 組 み 立 てを 調 節<br />
Arf1 及 びArf6は 他 のGTPaseと 同 様 に 不 活 性 なGDP 結 合 型 と 活 性 を 持 つGTP 結 合 型 を 循 環 する。GTP/GDP<br />
結 合 型 のサイクルは、GAPs 及 びGEFsにより 調 節 される。<br />
図 2 Arf6の 細 胞 周 辺 での 膜 輸 送 及 びアクチン 細 胞 骨 格 再 編 成 に 関 連 する 機 能<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
汎<br />
用<br />
【G-LISAアッセイ】( 品 番 :BK132、BK133)<br />
●96ウェル Arf-GTP 結 合 プレート(8ウェルごとの12ストリップに 分 割<br />
できます)<br />
● 抗 Arf 抗 体<br />
●HRP 標 識 二 次 抗 体<br />
●Arfコントロールタンパク 質 ( 恒 常 的 活 性 型 Arf)<br />
● 細 胞 溶 解 バッファー<br />
● 洗 浄 バッファー<br />
● 抗 原 提 示 バッファー<br />
● 抗 体 希 釈 バッファー<br />
●HRP 検 出 試 薬 A、B<br />
●HRP 停 止 溶 液<br />
●Precision Red advanced タンパク 質 アッセイ 試 薬 ( 品 番 :<br />
ADV02)<br />
●プロテアーゼ 阻 害 剤 カクテル( 品 番 :PIC02)<br />
図 3 ARNOによるArf 活 性 化 実 験 例 (Dr. Lorraine Santy (Penn State University) 提 供 )<br />
MDCK 細 胞 にアデノウイルスベクターを 導 入 。<br />
左 :コントロールベクター<br />
中 央 :E156K 変 異 myc 標 識 ARNOタンパク 質 をコードしたベクター<br />
右 : 野 生 型 myc 標 識 ARNOタンパク 質 をコードしたベクター<br />
ARNOタンパク 質 は、 抗 myc 一 次 抗 体 (9e10) 及 びCY2 標 識 二 次 抗 体 で 緑 色 に 染 色 し、F-アクチンをローダミン<br />
ファロイジンで 赤 色 に 染 色 した。 野 生 型 のARNOタンパク 質 を 発 現 させた 細 胞 には 糸 状 仮 足 が 認 められた( 右 図<br />
の 矢 印 )が、 触 媒 不 活 性 型 のARNO 変 異 タンパク 質 を 発 現 させた 細 胞 ではこのような 細 胞 の 突 出 は 認 められな<br />
かった( 中 央 )。<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
【プルダウンアッセイ】( 品 番 :BK032-S、BK033-S)<br />
●GGA3-PBD ビーズ ( 品 番 :GGA05)<br />
●Arfモノクローナル 抗 体 ( 品 番 :ARF01またはARF06)<br />
●His 標 識 Arfタンパク 質<br />
●GTPγS( 非 加 水 分 解 性 のGTPアナログ)( 品 番 :BS01)<br />
●GDP<br />
● 細 胞 溶 解 バッファー<br />
● 洗 浄 バッファー<br />
●ローディングバッファー<br />
● 停 止 バッファー<br />
●プロテアーゼ 阻 害 剤 カクテル( 品 番 :PIC02)<br />
●DMSO<br />
図 4 Arf6 G-LISA アッセイ 例<br />
MDCK 細 胞 を2 時 間 培 養 (Activated: 組 織 培 養 プレートに 接 着 、Control: 懸 濁 )し、ライセートを 調 製 した。ライ<br />
セートを12.5b、6.25b、3.1b 使 用 し、G-LISAアッセイ( 品 番 :BK133)を 行 い、490nmにおける 吸 収 を 測 定 し<br />
た。データはバックグラウンドを 差 し 引 いた 値 。<br />
図 5 Arf1 プルダウンアッセイ 例<br />
上 :MDCK 細 胞 ライセート(500b)をGDPもしくはGTPγSと 共 にプル<br />
ダウンアッセイ( 品 番 :BK032-S)を 行 った。<br />
下 :C2C12 細 胞 ライセート(500b)を20bのGGA3-PBDビーズと 共<br />
にインキュベートし、プルダウンアッセイ( 品 番 :BK032-S)を 行 った。<br />
(FBS: 未 処 理 、SF: 血 清 飢 餓 で1 時 間 処 理 した 細 胞 )<br />
ビーズサンプルは、20e のサンプルバッファーに 再 懸 濁 し、4〜20%<br />
SDS-PAGEゲルで 分 離 した。PVDFに 転 写 し、Arf1 抗 体 でプローブした<br />
後 、 化 学 発 光 で 検 出 した。<br />
機<br />
器<br />
Cytoskeleton, Inc. 略 号 CYT<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Arf1 G-LISA Activation assay Kit BK132 96 assay ¥190,000 4<br />
Arf1 Pulldown Activation assay Kit BK032S 20 assay ¥113,000 4<br />
Arf6 G-LISA Activation assay Kit BK133 96 assay ¥190,000 4<br />
Arf6 Pulldown Activation assay Kit BK033S 20 assay ¥113,000 4<br />
GGA3-PBD Beads GGA05A 1 x 500 B ¥95,000 4<br />
GGA05B 3 x 500 B ¥245,000 4<br />
12<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 しく 発 売 された 商 品 です。 今 後 の 注 目 商 品 です。 ベストセラー 商 品 です。 3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
スルホトランスフェラーゼ( 硫 酸 基 転 移 酵 素 ) 活 性 測 定 キット<br />
ラジオアイソトープの 使 用 なしで 簡 単 に 活 性 を 測 定<br />
基 質 として3-リン 酸 アデノシン-5-リン 酸 硫 酸 塩 (PAPS、<br />
3'-phosphoadenosine-5'-phosphosulfate)を 使 用 する 全 てのス<br />
ルホトランスフェラーゼの 酵 素 活 性 を 測 定 するキットです。まずスル<br />
ホトランスフェラーゼによりPAPSから 硫 酸 基 が 硫 酸 基 受 容 体 へ 転 移<br />
し、PAP(3'-phosphoadenosine-5'-phosphate)へ 変 換 されます。<br />
次 にCoupling Phosphatase 3(IMPAD1、 脱 リン 酸 化 酵 素 )により<br />
PAPから 無 機 リン 酸 を 遊 離 させ、 遊 離 された 無 機 リン 酸 をマラカイトグ<br />
リーンで 検 出 します。<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
<br />
組<br />
<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
構 成 内 容<br />
●Coupling Phosphatase 3(IMPAD1 リコンビナント マウス)<br />
●3’-phosphoadenosine-5’-phosphate(PAP)<br />
●ホスファターゼ バッファー 3<br />
●ホスファターゼ スタンダード<br />
●マラカイトグリーン 試 薬 A & B<br />
キットに96ウェルプレート、スルホトランスフェラーゼ、PAPS( 品 番 :<br />
ES019、¥33,000) 及 びAcceptor substrate 等 は 含 まれていません。<br />
別 途 ご 用 意 ください。<br />
R&D Systems 社 製 品 以 外 のPAPSを 使 用 する 場 合 は、 精 製 を 行 ってく<br />
ださい。 特 にPAP、ナトリウムイオン、リチウムイオンの 存 在 はアッセイ<br />
に 影 響 を 与 える 可 能 性 があります。<br />
シアル 酸 トランスフェラーゼ 活 性 測 定 キット<br />
シアル 酸 転 移 酵 素 の 活 性 を 簡 単 測 定<br />
図 1 スルホトランスフェラーゼ 活 性 アッセイの 原 理<br />
【 参 考 文 献 】<br />
B. Prather. et al., Anal. Biochem., 423(1), 86-92(2002).<br />
図 2<br />
N-アセチルグルコサミンを 硫 酸 基 受 容 体 として 使 用 し、 組 換 え<br />
体 マウスCHST7(スルホトランスフェラーゼ)( 品 番 :5108-<br />
ST)の 酵 素 活 性 を 本 商 品 を 用 いて 測 定 した。 反 応 はPAPS 及 び<br />
Coupling Phosphatase 3の 存 在 下 で 行 った。<br />
R&D Systems Inc. 略 号 RSD<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Universal Sulfotransferase Activity Kit EA003 1 kit(2 x 96 well plate) ¥99,000 5<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
アクセプター 基 質 に 関 係 なく 全 てのシアル 酸 トランスフェラーゼの<br />
酵 素 活 性 を 測 定 するキットです。シアル 酸 トランスフェラーゼ 反 応 で 生<br />
じるリン 酸 化 ヌクレオチド(CMP、cytidine 5’-monophosphate)を、<br />
5'-ヌクレオチド 分 解 酵 素 であるCD73をカップリングホスファターゼと<br />
して 用 いて 無 機 リン 酸 を 遊 離 させ、 遊 離 された 無 機 リン 酸 をマラカイト<br />
グリーンで 検 出 します。<br />
汎<br />
用<br />
特 長<br />
● 全 てのシアル 酸 トランスフェラーゼに 適 用 可 能<br />
● 非 放 射 性<br />
● 分 離 ステップの 時 間 を 短 縮<br />
●シアル 酸 トランスフェラーゼ 反 応 を 正 確 に 分 析<br />
●ハイスループット 分 析 に 対 応<br />
図 1 シアル 酸 トランスフェラーゼ 活 性 アッセイの 原 理<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
構 成 内 容<br />
●カップリングホスファターゼ2(CD73ヒトリコンビナント)<br />
●CMP(cytidine 5’-monophosphate)<br />
●ホスファターゼ バッファー 2<br />
●ホスファターゼ スタンダード<br />
●100mM MnCl2<br />
●マラカイトグリーン 試 薬 A&B<br />
図 2 ST6シアル 酸 トランスフェラーゼ 活 性 の 測 定<br />
マウスリコンビナント2/ST6GALNAC2( 品 番 :6468-<br />
GT)の、CMP-Neu5Acからasialofetuin への Neu5Ac<br />
(シアル 酸 )の 転 移 活 性 を 本 キットで 測 定 した。<br />
R&D Systems Inc. 略 号 RSD<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Sialyltransferase Activity Kit EA002 1 kit(2 x 96 well plate) ¥99,000 5<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 13
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
<br />
組<br />
<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
λプロテインホスファターゼ<br />
リン 酸 化 Ser、Thr、Tyrに 対 して 活 性 を 持 ちます<br />
λプロテインホスファターゼは、Mn 2+ 依 存 性 タンパク 質 脱 リン 酸 化<br />
酵 素 で、リン 酸 化 されたセリン、スレオニン、チロシンに 対 して 活 性 を 持<br />
ちます( 一 部 のリン 酸 化 ヒスチジンにも 活 性 を 持 ちます)。バクテリオ<br />
ファージλのORF221オープンリーディングフレームによる221アミ<br />
ノ 酸 の 製 品 です。この 酵 素 はバナジウム 酸 塩 イオンにより 阻 害 され、<br />
50mM EDTA 存 在 下 で65℃で1 時 間 過 熱 することでも 失 活 します。<br />
特 長<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
●リコンビナントバクテリオファージλ(E.coliで 発 現 )<br />
● 純 度 95% 以 上 (SDS-PAGE)。プロテアーゼ、DNase、RNaseフリー。<br />
● 約 400,000ユニットタンパク 質 /f<br />
品 番 :SC-200312(100,000ユニット/0.25f)<br />
品 番 :SC-200312A(20,000ユニット/0.05f)<br />
※1ユニットは、30℃、pH7.5で、1 分 間 あたり1nmolのp-ニトロフェニ<br />
ルリン 酸 を 加 水 分 解 する 単 位<br />
構 成 内 容<br />
図 1 ウェスタンブロットによるFAKのリン 酸 化 解 析<br />
【サンプル】<br />
レーンA、D:コントロール(293T 細 胞 ライセート)( 品 番 :SC-117752)<br />
レーンB、E:ヒトFAKをトランスフェクトした293T 細 胞 ライセート( 品 番 :SC-114600)<br />
レーンC、F:λプロテインホスファターゼ 処 理 したヒトFAKをトランスフェクトした293T 細 胞 ライセート<br />
【 抗 体 】<br />
レーンA、B、C:p-FAK(Tyr-577)-R 抗 体 ( 品 番 :SC-16665-R)<br />
レーンD、E、F:FAK(C-903) 抗 体 ( 品 番 :SC-932)<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
●λプロテインホスファターゼ(50 mM Tris-HCl、pH7.5、0.1mM<br />
EGTA、0.01% BRIJ 35、50% グリセロール 溶 液 入 り)<br />
●λプロテインホスファターゼバッファー(10×)(500mM HEPES、<br />
pH7.5、1mM EGTA、50mMジチオスレイトール、0.1% BRIJ 35)<br />
●MnCl2 溶 液 (20×)<br />
Santa Cruz Biotechnology, Inc. 略 号 SCB<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Lambda Phosphatase SC-200312 100,000 unit(0.25 F) ¥91,000 6<br />
SC-200312A 20,000 unit(0.05 F) ¥23,000 6<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
オートファジーインヒビター 3-メチルアデニン<br />
細 胞 内 消 化 の 研 究 に!<br />
3-メチルアデニン(3-MA)はクラスIII PI 3-キナーゼの 阻 害 剤 であ<br />
り、 細 胞 透 過 性 のオートファジー 阻 害 剤 として 用 いられます。 隔 離 膜<br />
の 成 長 阻 害 により、 小 脳 顆 粒 細 胞 を 守 ります。また3-MAは、 同 じクラ<br />
スIII PI 3-キナーゼの 阻 害 剤 であるLY 294002( 品 番 :SC-201426)<br />
やWortmannin( 品 番 :SC-3505) 等 とは 全 く 異 なり、3-MAで 処 理<br />
した 細 胞 はマンノース-6-リン 酸 /インスリン 様 成 長 因 子 IIレセプター<br />
(MPR300)の 特 異 的 な 再 分 布 を 引 き 起 こしますが、エンドソームやリ<br />
ソソーム 小 胞 の 成 長 は 引 き 起 こさずに、インヒビターとして 働 きます。<br />
特 長<br />
● 純 度 :≧95%<br />
● 外 観 : 白 色<br />
● 分 子 量 :149.15 ● 分 子 式 :C 6H7N5<br />
●CAS 番 号 :5142-23-4 ● 形 状 : 固 体<br />
● 溶 解 性 :DMSO:10c/f、 水 :5c/f、DMF:10c/f、 <br />
95%エタノール、1N NaOH( 加 熱 ):30c/f<br />
図 1<br />
機<br />
器<br />
Santa Cruz Biotechnology, Inc. 略 号 SCB<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Autophagy Inhibitor, 3-MA SC-205596 50 C ¥19,000 4<br />
14<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 しく 発 売 された 商 品 です。 今 後 の 注 目 商 品 です。 ベストセラー 商 品 です。 3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
アルコールアッセイキット<br />
サンプル 中 の 第 1 級 アルコールを 酵 素 反 応 で 定 量<br />
本 商 品 は、 酵 素 反 応 及 び 酸 化 反 応 により 過 酸 化 水 素 を 発 生 させ、 比 色<br />
プローブまたは 蛍 光 プローブと 反 応 させることで、 第 1 級 アルコールを<br />
測 定 するためのキットです。96ウェルマイクロタイタープレートフォーマ<br />
ットを 用 いて、 様 々なサンプル 中 のアルコール 濃 度 を 定 量 的 に 測 定 でき<br />
ます。<br />
【 検 出 感 度 】<br />
比 色 キット:30μM(0.0001%w/v)<br />
蛍 光 キット:15μM(0.00007%w/v)<br />
※ 本 キットはエタノール 以 外 の 各 種 第 1 級 エタノールも 検 出 します。 各<br />
アルコールは、それぞれ 個 別 の 検 出 感 度 、 反 応 比 率 ( 表 1)を 示 します。<br />
■ 表 1: 各 種 アルコールの 反 応 比 率<br />
アルコール 基 質<br />
反 応 比 率<br />
メタノール 1<br />
プロパルギルアルコール 0.9<br />
エタノール 0.82<br />
プロパノール-2-ene 0.81<br />
n-ブタノール 0.67<br />
2-クロルエタノール 0.66<br />
n-プロパノール 0.43<br />
2-メトキシエタノール 0.4<br />
2-シアノエタノール 0.3<br />
イソブタノール 0.21<br />
図 1 比 色 キット( 品 番 :STA-620)の 標 準 曲 線<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
<br />
組<br />
<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
構 成 内 容<br />
ブランク、スタンダード、 未 知 試 料 合 わせて100 回 分 の 試 薬 を 含 み<br />
ます。<br />
●エタノールスタンダード<br />
●アッセイバッファー(10×)<br />
● 酵 素 混 合 液 (100×)<br />
● 比 色 プローブまたは 蛍 光 プローブ<br />
図 2 蛍 光 キット( 品 番 :STA-621)の 標 準 曲 線<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
Cell Biolabs, Inc. 略 号 CBL<br />
品 名 検 出 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Alcohol Assay Kit 比 色 STA-620 100 assay ¥66,000 6<br />
蛍 光 STA-621 100 assay ¥66,000 6<br />
過 酸 化 水 素 アッセイキット<br />
高 感 度 、 簡 単 操 作 です!<br />
汎<br />
用<br />
過 酸 化 水 素 は 酸 化 還 元 経 路 の 一 部 であり、 酸 化 分 子 の 2 電 子 還 元 、<br />
もしくはスーパーオキシドアニオンラジカルの 1 電 子 還 元 によって 生 じ<br />
ます。また 強 力 な 酸 化 体 であり、 系 の 酸 化 状 態 を 明 らかにするために<br />
も、 正 確 な 濃 度 測 定 が 必 要 となります。<br />
本 商 品 は、 過 酸 化 水 素 の 濃 度 を、 迅 速 かつ 高 感 度 に 定 量 します。アッ<br />
セイは、キシリノールオレンジと 第 二 鉄 ( 過 酸 化 物 に 依 存 する 二 価 鉄 イ<br />
オンの 酸 化 により 生 じる)の 複 合 体 の 形 成 に 基 づいています。この 反<br />
応 を 比 色 測 定 で 定 量 化 することで、15ng/fの 過 酸 化 物 まで 検 出 が 可<br />
能 です。1,000ng/fまでの 範 囲 で 直 線 性 が 得 られます。<br />
特 長<br />
● 過 酸 化 水 素 を 高 感 度 に 定 量<br />
● 検 出 感 度 :15ng/f<br />
● 簡 単 操 作 、 比 色 分 析 アッセイ<br />
構 成 内 容<br />
● 試 薬 A:ソルビトール、キシリノールオレンジの 水 溶 液<br />
● 試 薬 B:1% 第 一 鉄 アンモニウム 硫 酸 塩 14% 硫 酸 溶 液<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
National Diagnostics 略 号 NDS<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Hydrogen Peroxide Assay Kit CL-204 1 kit ¥29,000 4<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 15
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
<br />
組<br />
<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
汎<br />
用<br />
ヒト 内 皮 前 駆 細 胞<br />
再 生 医 療 分 野 で 注 目 !<br />
ヒト 内 皮 前 駆 細 胞 は 胎 児 血 管 芽 細 胞 と 似 た 性 質 を 示 します。これらの<br />
前 駆 細 胞 は 骨 髄 で 生 成 され、 血 管 内 へ 遊 走 して 様 々な 成 熟 血 管 内 皮 細<br />
胞 への 分 化 能 を 持 ちます。<br />
バイオチェーン 社 のヒト 内 皮 前 駆 細 胞 は4 継 代 した 凍 結 保 存 細<br />
胞 で、 上 皮 細 胞 と 同 様 の 形 態 を 保 持 しています( 図 1)。CD146、<br />
KDR、CD133、CD34 抗 原 の 発 現 、フォン・ヴィレブランド 因 子 (von<br />
Willebrand factor)の 免 疫 染 色 、LDL 取 り 込 み 能 、レクチン 結 合 能 、 管<br />
形 成 、 遊 走 性 等 で 特 徴 付 けられています。<br />
ドナーは HIV-1、HBV、HCV 陰 性 の 結 果 を 得 られています。 詳 細 なド<br />
ナー 情 報 も 提 供 可 能 です。<br />
図 1<br />
内 皮 前 駆 細 胞 の 形 態 。4 継 代 目 、100 倍 。<br />
図 2<br />
抗 フォン・ヴィレブランド 因 子 ポリクローナル 抗 体<br />
( 赤 色 )を 用 いた 内 皮 前 駆 細 胞 の 免 疫 染 色 図 。 核<br />
は 青 色 (DAPI)で 染 色 。4 継 代 目 、400 倍 。<br />
図 3 内 皮 前 駆 細 胞 (4 継 代 目 )の 発 現 マーカー<br />
確 認 試 験<br />
3×10 2<br />
個 (CD133)または1×10 2 個 (CD34)の<br />
細 胞 を 用 いてRT-PCRを 行 った(40サイクル)。<br />
GAPDHの 発 現 をコントロールとして 用 いた。<br />
図 4<br />
内 皮 前 駆 細 胞 はDil-Ac-LDL の 取 り 込 み( 赤 )と<br />
FITC-Ulex-Lactinへの 結 合 ( 緑 )で 陽 性 である。<br />
核 は 青 (DAPI)で 染 色 。4 継 代 目 、400 倍 。<br />
マニュアル<br />
1. 内 皮 前 駆 細 胞 の 調 製 (Growth Mediumとしては、 品 番 :Z7030003<br />
を 用 いることをおすすめします。)<br />
1EPOC Growth Medium Supplimentを 室 温 に 戻 します。<br />
2EPOC Growth Medium Suppliment(25f)を 全 て EPC<br />
Basal Medium(500f)( 品 番 :Z7030004)の 容 器 へ 移 し、<br />
EPC Growth Medium を 調 製 します。バイオチェーン 社 の EPC<br />
Growth Medium は 抗 生 物 質 を 含 みませんが、コンタミが 懸 念 さ<br />
れる 場 合 には 追 加 しても 構 いません。<br />
3 使 用 前 にはEPC Growth Mediumを37℃で 保 温 します。<br />
2. 凍 結 細 胞 の 融 解 方 法<br />
1EPC Growth Mediumを37℃で 保 温 します。<br />
2 凍 結 したバイアルの 外 側 を70%エタノールで 拭 き 取 り、ウォーター<br />
バス 内 で 凍 結 細 胞 を 融 解 させます。<br />
3EPC Growth Medium を 培 養 容 器 に 加 えます。 無 菌 的 に 細 胞 懸<br />
濁 液 を 培 養 容 器 に 加 えます。バイアルを 1f の Growth Medium<br />
ですすぎ、 洗 液 を 細 胞 に 加 えます。 細 胞 の 播 種 数 は 10,000〜<br />
12,500cells/cm 2 をおすすめします。<br />
437℃、5%CO 2 の 加 湿 インキュベーター 内 で 細 胞 を 培 養 します。 翌<br />
日 、medium を 交 換 し、その 後 は 1 日 後 に 交 換 を 行 います。 成 功 す<br />
れば 小 石 のような 形 態 になり、2〜3 日 で 細 胞 数 が 倍 増 します。<br />
3. 細 胞 の 継 代 培 養 方 法<br />
190%のconfluenceに 到 達 した 頃 が 継 代 培 養 のタイミングです。<br />
2PBS、0.05%トリプシン/EDTAとEPC Growth Mediumを37℃で<br />
保 温 します。<br />
3PBSで 細 胞 を 洗 浄 します。<br />
4トリプシン/EDTA 溶 液 で、 細 胞 の90%が 剥 がれるまで 保 温 します。<br />
5トリプシン/EDTAの 体 積 の1/10 量 のFBSを 追 加 してトリプシンを<br />
中 和 します。<br />
6 細 胞 を15fのコニカルチューブに 入 れ 替 え、 室 温 、150×aで 遠 心<br />
します。<br />
7 上 清 を 取 り 除 き、2fのGrowth Mediumで 再 懸 濁 します。<br />
8 細 胞 数 をカウントし、10,000〜12,500/cm 2 となるように、 新 し<br />
い 培 養 容 器 に 移 します。<br />
937℃、5%CO 2 の 加 湿 インキュベーターで 細 胞 を 保 温 し、medium<br />
を 毎 日 交 換 します。<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
図 5<br />
内 皮 前 駆 細 胞 の 管 形 成 。 内 皮 前 駆 細 胞 をマトリ<br />
ゲル 上 で 培 養 して 管 様 の 構 造 物 を 形 成 させた<br />
(40 倍 )。<br />
BIOCHAIN INSTITUTE INC. 略 号 BCH<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Cryopreserved EPOC(Endothelial Progenitor Outgrowth Cells) Z7030001 1 vial (>5 x 10 5 cells/1 F) ¥100,000 7<br />
機<br />
器<br />
関 連 商 品<br />
BIOCHAIN INSTITUTE INC. 略 号 BCH<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
EPOC Growth Medium Z7030003 500 F ¥25,000 4 5<br />
EPOC Basal Medium Z7030004 500 F ¥14,000 4<br />
EPOC Growth Medium Suppliment Z7030005 25 F ¥15,000 5<br />
EPOC Freezing Medium Z7030006 50 F ¥12,000 5<br />
16<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 しく 発 売 された 商 品 です。 今 後 の 注 目 商 品 です。 ベストセラー 商 品 です。 3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
血 球 分 離 溶 液 LymphoprepとLymphoprep チューブ<br />
遠 心 分 離 で 全 血 からのヒト 単 核 球 (リンパ 球 、 単 球 )の 分 離<br />
回 収 率 が 高 く、 本 来 の 形 態 を 維 持 したリンパ 球 が 得 られます!<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
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シ<br />
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ン<br />
in situハ<br />
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組<br />
<br />
【Lymphoprep】<br />
Lymphoprep は、Sodium diatrizoateとFicoll®( 赤 血 球 凝 集 物<br />
質 )の 無 菌 調 製 済 み 溶 液 です。 抗 凝 固 処 理 及 び 線 維 素 除 去 血 液 から、<br />
ヒトリンパ 球 をワンステップで 分 離 できます。 分 離 したリンパ 球 は、 細<br />
胞 障 害 試 験 、リンパ 球 培 養 試 験 に 使 用 できます。<br />
性 状<br />
● 密 度 :1.077±0.001a/f<br />
● 浸 透 圧 :290±15mOsm<br />
●エンドトキシン:
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
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組<br />
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シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
StemBeads FGF2<br />
ヒトiPS 細 胞 ・ES 細 胞 培 養 の 培 地 交 換 頻 度 を 減 らせます!<br />
StemBeads FGF2は、FGF2 依 存 性 幹 細 胞 のためのより 効 率 的 な 培<br />
養 方 法 を 提 供 する、 画 期 的 な 成 長 因 子 サプリメントです。 従 来 、ES/iPS<br />
細 胞 の 未 分 化 状 態 を 維 持 するために、 線 維 芽 細 胞 増 殖 因 子 -2(FGF2)<br />
が 用 いられていますが、この 方 法 では、FGF2 添 加 のために 毎 日 培 地 交<br />
換 を 行 う 必 要 があります。 本 商 品 は 米 国 食 品 医 薬 品 局 (FDA)によって<br />
承 認 されたPLGAポリマーにFGF2を 封 入 したもので、 一 定 量 の FGF2<br />
を3 日 間 安 定 して 放 出 することができます。ご 使 用 の 培 地 へ 添 加 するこ<br />
とで 培 地 交 換 頻 度 を 減 らすことが 可 能 です。<br />
顕 微 鏡 観 察 では、 黒 い 球 状 の 形 態 が 確 認 できます( 図 1)。 細 胞 を 傷 付<br />
けることはありません。<br />
図 2 培 養 時 のFGF2レベル<br />
左 :ヒトES 細 胞 培 養<br />
右 :マウス 神 経 幹 細 胞 培 養<br />
通 常 の 溶 解 型 FGF2 添 加 培 養 では、 最 初 の24 時 間 で 培 地 からほとんどFGF2が 消 費 される( 赤 線 )が、 本 品 を 使 用<br />
した 場 合 は、3 日 間 一 定 の 割 合 でFGF2を 放 出 し、FGF2レベルを 維 持 した( 青 線 )。<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
特 長<br />
● 培 地 交 換 の 頻 度 を 最 大 67% 減 少 ( 一 定 量 のFGF2を3 日 間 安 定 して<br />
放 出 )<br />
● 培 地 コストを 節 減<br />
● 自 発 的 な 分 化 を 抑 える 高 品 質 の 培 養 が 可 能<br />
● 条 件 変 更 不 要 、 現 在 ご 使 用 の 培 地 に 添 加 するだけで 使 用 可 能<br />
使 用 方 法<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
●ご 使 用 いただく 際 には、チューブの 底 に 固 まったビーズを 混 合 して 懸<br />
濁 させてください。<br />
●1f の 成 長 培 地 あたり7.5e のビーズを 添 加 するだけでご 使 用 いた<br />
だけます。<br />
● 培 養 を 維 持 するには、3 日 おきに 培 地 を 交 換 してください。<br />
汎<br />
用<br />
図 3 ヒトES 細 胞 培 養 の 未 分 化 性 の 維 持<br />
ヒトES 細 胞 をMEFフィーダー 上 で、 本 商 品 を 使 用 して3 日 間 おきに 培 地 交 換 しながら1カ 月 培 養 し、 溶 解 型 FGF2<br />
添 加 培 地 を 毎 日 交 換 した 場 合 と 比 較 した。<br />
A、B:FACSによるタンパク 質 解 析 C:qRT-PCRによるRNA 解 析<br />
( 青 : 溶 解 型 FGF2 添 加 、 赤 :StemBeads FGF2 添 加 )<br />
両 者 のタンパク 質 プロファイルは 類 似 し、 幹 細 胞 の 傾 向 を 示 した(A)が、StemBeads FGF2 使 用 時 の 方 が<br />
NANOGの 発 現 が 著 しく 増 加 し、 分 化 マーカーであるSOX17、Brachyuryの 発 現 は 減 少 した(C)。<br />
D、E、F: 培 養 前 後 の 核 型 比 較<br />
培 養 前 (D) 及 び 培 養 後 ( 溶 解 型 FGF2 添 加 (E)、StemBeads FGF2 添 加 (F))の 核 型 は、いずれも 異 常 は 見 られ<br />
なかった。<br />
G、H、I: 免 疫 染 色<br />
1カ 月 後 の 培 養 細 胞 を 免 疫 染 色 したところ、 両 方 の 培 養 条 件 で、コロニーの 外 観 、 多 能 性 マーカーOCT4・<br />
NANOGの 発 現 は 同 様 の 結 果 を 示 した。 図 はStemBeads FGF2 使 用 時 の 培 養 細 胞 (G:DAPI、H:OCT4、<br />
I:NANOG、スケールバー=50μm)。<br />
図 1 StemBeads FGF2<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
図 4 神 経 幹 細 胞 の 未 分 化 性<br />
マウス 神 経 幹 細 胞 をFGF2 未 添 加 ( 水 色 )、 溶 解 型 FGF2 添 加 ( 青 )、StemBeads FGF2 添 加 ( 赤 )の 条 件 で1 週 間 培<br />
養 した。StemBeads FGF2 使 用 の 培 養 では、 未 添 加 、 溶 解 型 FGF2 添 加 と 比 較 して、 前 駆 細 胞 (ネスチン+)が 増 加<br />
し、 神 経 に 分 化 した 細 胞 (TUJI+)が 減 少 した(スケールバー=50μm)<br />
機<br />
器<br />
Stem Culture Incorporated 略 号 STC<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
StemBeads FGF2 SB500 3 F ¥56,000 4<br />
!<br />
上 記 の 他 にも、 実 験 例 やQ&Aをコスモ・バイオホームページ( 欄 外 参 照 )で 紹 介 しています。サイト 内 検 索 でご 確 認 ください。(キーワード:StemBeads)<br />
18<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 しく 発 売 された 商 品 です。 今 後 の 注 目 商 品 です。 ベストセラー 商 品 です。 3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
D-セリン 測 定 キット( 比 色 法 )<br />
従 来 測 定 困 難 だったD-セリンを 比 色 法 にて 簡 便 定 量<br />
脳 神 経 、 食 品 分 野 の 新 規 バイオマーカーです!<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
<br />
組<br />
<br />
アミノ 酸 の 光 学 異 性 体 の 1 つである「L-アミノ 酸 」は、タンパク 質 を<br />
構 築 するほか、シグナル 分 子 等 としても 重 要 な 生 理 的 役 割 を 担 ってい<br />
ます。 一 方 、もう1つの 光 学 異 性 体 である「D-アミノ 酸 」については、 細<br />
菌 の 細 胞 壁 ペプチドグリカンの 構 成 成 分 等 、ごくわずかな 例 を 除 いて<br />
生 理 作 用 は 知 られておらず、 特 に 真 核 生 物 での 役 割 は 存 在 しないもの<br />
と 考 えられていました。しかし 近 年 の 分 析 技 術 の 進 展 により、 哺 乳 類<br />
をはじめとする 真 核 生 物 にもD-セリンやD-アスパラギン 酸 、D- アラ<br />
ニン 等 、 様 々な 遊 離 D- アミノ 酸 が 存 在 し、これらが 特 定 の 生 理 機 能 を<br />
有 することが 明 らかにされてきました。<br />
その1つである「D-セリン」は、 脳 内 に 遊 離 の 状 態 で 存 在 し、 記<br />
憶 や 学 習 等 、 脳 の 高 次 機 能 に 関 わるN-メチル-D-アスパラギン 酸<br />
(NMDA) 受 容 体 のコアゴニストとして 作 用 します。そのため、D- セ<br />
リンの 動 態 は 様 々な 神 経 疾 患 と 関 連 することが 示 唆 されています。<br />
例 えばアルツハイマー 病 患 者 の 血 液 や 筋 萎 縮 性 側 索 硬 化 症 (ALS) 患<br />
者 の 脊 髄 中 のD-セリン 濃 度 は、 健 常 者 と 比 べて 有 意 な 差 があると 報<br />
告 されています。また 生 理 的 意 義 はいまだ 解 明 されていませんが、 尿<br />
中 にも 高 濃 度 のD-セリンが 含 まれていることが 知 られています。<br />
D-アミノ 酸 の 定 量 は、 従 来 ジアステレオマーへ 誘 導 体 化 した 後 に<br />
高 速 液 体 クロマトグラフィーやガスクロマトグラフィーで 分 析 する<br />
のが 一 般 的 でした。しかし、これらの 方 法 は 高 価 な 機 器 類 と 煩 雑 な 操<br />
作 を 必 要 とするため、 多 検 体 の 同 時 解 析 を 行 うのに 適 したものでは<br />
ありませんでした。<br />
本 商 品 は、 名 古 屋 大 学 大 学 院 吉 村 徹 教 授 らによって 同 定 された D-<br />
セリンに 特 異 的 に 作 用 する 新 規 酵 素 D-Serine dehydratase from<br />
Saccharomyces cerevisiae(DsdSC)を 使 用 して、 尿 サンプル 等 を<br />
対 象 に 比 色 法 にて 簡 便 にD-セリンを 定 量 するキットです。<br />
図 1 測 定 原 理<br />
図 2 検 量 線<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
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オ<br />
メ<br />
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ル<br />
■ 操 作 法<br />
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汎<br />
用<br />
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受<br />
託<br />
サ<br />
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ビ<br />
ス<br />
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コスモ・バイオ 株 式 会 社 略 号 CSR<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
D-Serine Chrometric Assay Kit CT-DSC-K01 1 kit ¥60,000 5<br />
本 商 品 は、 名 古 屋 大 学 大 学 院 生 命 農 学 研 究 科 吉 村 徹 教 授 からのライセンス 品 です。<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 19
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
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シ<br />
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達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
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オ<br />
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デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
NEXTflex 16S V4 Amplicon-Seqキット<br />
微 生 物 rRNAのV4 領 域 の 増 幅 用 キット<br />
本 商 品 は、 微 生 物 16SリボソームRNA(rRNA) 遺 伝 子 の 4 番 目 の<br />
超 可 変 性 領 域 (V4ドメイン)の 増 幅 ライブラリを 調 製 するために 設 計<br />
されたキットです。 調 製 したライブラリは、カスタムシーケンスリード<br />
プライマー 及 びカスタムインデックスプライマーを 用 いることで、<br />
Illumina®HiSeq 2000/1000 及 び MiSeqプラットフォームに 適 用 す<br />
ることができます。 特 殊 な16S V4プライマーは、リードプライマー 領 域<br />
と、 独 自 の12 塩 基 対 のバーコードドメインを 配 列 した、フローセル 結 合 ド<br />
メインを 含 みます。ビーズベースのPCRクリーンアップ 工 程 は、 複 数 の<br />
サンプルを 同 時 に 処 理 できます。<br />
必 要 な 操 作 は、カスタムPCRプライマーを 用 いたPCR 増 幅 と、PCRク<br />
リーンアップの 2 工 程 のみです。クリーンアップの 回 数 を 制 限 すること<br />
で、ダウンストリームシーケンス 用 に 高 収 率 での 回 収 が 可 能 です。<br />
系 統 学 用 の 有 用 なツールで、 微 生 物 群 全 体 もしくは 個 々の 分 類 群 の<br />
研 究 や 個 体 群 の 変 動 のモニタリングに 最 適 です。<br />
特<br />
長<br />
● 迅 速 :2 時 間 でライブラリが 調 製 可 能<br />
● 簡 単 :2ステッププロトコール<br />
● 少 量 サンプル:インプットに 必 要 なサンプル 量 は50ng<br />
● 高 回 収 率<br />
●フレキシブルバーコードオプション:4、12、24、48のユニークなプラ<br />
イマーバーコード<br />
● 自 動 化 -liquid handlerに 適 応 可<br />
●Illumina®HiSeq 2000/1000 及 びMiSeqプラットフォームに 対 す<br />
る 機 能 検 証 済 み<br />
図 1 サンプル 調 製 のフローチャート<br />
図 2<br />
2%アガロースゲル<br />
A:E.Coli ゲノムDNA 250ng<br />
B: 分 子 量 マーカー<br />
C: 本 キットによるPCR 生 成 物 (30サイクル、50ngのE.Coli ゲノムDNAをインプット)<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
構 成 内 容<br />
●NEXTflex DNA PCR マスターミックス<br />
●NEXTflex 16S V4 Foreard プライマー(5μM)<br />
●NEXTflex 16S V Reverse プライマーバーコード(5μM)<br />
品 番 :4201-01(バーコード1〜4)<br />
品 番 :4201-02(バーコード1〜12)<br />
品 番 :4201-03(バーコード1〜24)<br />
品 番 :4201-04(バーコード1〜48)<br />
● 再 懸 濁 バッファー<br />
●ヌクレアーゼフリー 水<br />
●カスタムシーケンスリードプライマー1、2(100μM)<br />
●カスタムインデックスリードプライマー(100μM)<br />
「2013 次 世 代 シーケンシングカタログ」<br />
好 評 配 布 中 !<br />
バイオオー 社 の 次 世 代 シーケンシング 用<br />
サンプル 調 製 キットのカタログです。<br />
● 対 応 機 種 :<br />
Illumina 社 Solexa、GAIIx、<br />
HiSeq2000、MiSeq Ion torrent 5500<br />
SOLiD、SOLiD 4<br />
●ラインアップ:<br />
<br />
<br />
<br />
DNA-Seq、ChIP-Seq、Bisulfite-Seq、Methyl-Seq、<br />
RNA-Seq、Small RNA-Seq、Directional RNA-Seq、<br />
PCR-free DNA-Seq<br />
DNAであれば 最 大 96 種 類 、RNAであれば 最 大 48 種 類 のバー<br />
コードをご 用 意 しています。<br />
コスモ・バイオホームページ 上 の“カタログ 請 求 ” 欄 よりご 請 求<br />
ください。<br />
<br />
機<br />
器<br />
Bioo Scientific Corporation 略 号 BIO<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
NEXTflex 16S V4 Amplicon-Seq Kit(with 4 barcodes) 4201-01 16 rxn ¥52,000 5<br />
NEXTflex 16S V4 Amplicon-Seq Kit(with 12 barcodes) 4201-02 48 rxn ¥122,000 5<br />
NEXTflex 16S V4 Amplicon-Seq Kit(with 24 barcodes) 4201-03 96 rxn ¥232,000 5<br />
NEXTflex 16S V4 Amplicon-Seq Kit(with 48 barcodes) 4201-04 192 rxn ご 照 会 5<br />
20<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 しく 発 売 された 商 品 です。 今 後 の 注 目 商 品 です。 ベストセラー 商 品 です。 3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
FcRブロッキング 試 薬<br />
非 特 異 的 な 結 合 をブロック!フローサイトメトリー 用<br />
ヒトの 単 球 及 びマクロファージの 定 常 領 域 (Fc)のレセプターをブロッ<br />
クするように 開 発 されている、FcRブロッキング 試 薬 です。IgGの 受 容 体<br />
(FcγRI、CD64)に 対 して 高 い 親 和 性 を 持 ちますが、 本 商 品 は 抗 CD64<br />
抗 体 ではないため、 抗 体 との 併 用 が 可 能 です。 本 商 品 を 使 用 すること<br />
で、 抗 体 とそのターゲットとの 親 和 性 が 増 加 し、 抗 体 と 蛍 光 色 素 の 非 特<br />
異 的 な 結 合 を 防 ぐことができます。IFN-γもしくはG-CSFを 投 与 された<br />
検 体 由 来 の 細 胞 や、 急 性 炎 症 にかかりやすい 検 体 由 来 の 細 胞 において<br />
は、イムノグロブリンFcレセプター(FcR)が 上 方 制 御 されることから 非<br />
特 異 的 な 結 合 が 多 く 見 受 けられるため、 特 に 有 効 です。<br />
pH7.2の20mM PBS、0.09%アジ 化 ナトリウム 溶 液 2f(400test 分 )<br />
としてご 提 供 致 します。<br />
図 1 正 常 ヒト 末 梢 血 液 のCD16のPE 染 色 の 蛍 光 プロファイル<br />
本 商 品 使 用 ( 黄 色 と 緑 )、 本 商 品 不 使 用 ( 赤 と 青 )<br />
IMMUNOSTEP, S.L. 略 号 ISP<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格<br />
Fc Blocking Reagent FCR-2ML 400 test(2 F) ¥29,000<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
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染<br />
色<br />
イ、<br />
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グ<br />
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達<br />
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培<br />
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胞<br />
工<br />
学<br />
遺 伝 子 組 換 えヒイロチャワンタケレクチン<br />
L-フコース 特 異 的 レクチン<br />
遺 伝 子 組 換 え 技 術 で 製 造 したヒイロチャワンタケレクチン(AAL,<br />
recombinant)です。ヒイロチャワンタケレクチンの 安 定 供 給 が 可 能 と<br />
なりました。 天 然 キノコ 由 来 のAALと 同 じ 特 異 性 を 有 しています。<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
レクチンでの 糖 鎖 分 離 例<br />
AAL, recombinantを 固 定 化 した 担 体 をHPLCカラムに 充 填 し、フ<br />
コース 結 合 様 式 の 異 なる 蛍 光 標 識 化 糖 鎖 の 分 離 溶 出 を 行 いました。 結<br />
果 、フコース 結 合 様 式 の 違 いで 糖 鎖 の 溶 出 時 間 が 異 なり、 結 合 の 強 さ<br />
はFucα1-6 >> Fucα1-3 > Fucα1-4 > Fucα1-2であることを 確 認<br />
しました。この 結 果 は、 天 然 キノコ 由 来 のAALと 同 じです(その 他 の 手 法<br />
( 例 :キャピラリー 電 気 泳 動 法 )でも、 天 然 キノコ 由 来 AALと 同 じ 結 果 を<br />
得 て い ま す )。<br />
汎<br />
用<br />
カラム:AAL, recombinant-HPLC カラム(0.46×15cm)<br />
移 動 相 A:10mM 酢 酸 アンモニウム<br />
移 動 相 B:20mM フコース/ 移 動 相 A 混 液<br />
濃 度 勾 配 :0(4 分 )-100(14 分 )-100(18 分 )% 移 動 相 B 段 階 勾 配<br />
流 速 :0.5f/ 分<br />
温 度 :25℃<br />
検 出 : 蛍 光 (Ex:320nm、Em:400nm)<br />
サンプル:10pmol PA- 糖 鎖<br />
図 1<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
株 式 会 社 J-オイルミルズ 略 号 JOM<br />
品 名 標 識 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Aleuria aurantia Lectin(AAL) 非 標 識 J101-R 1 C ¥20,000 4<br />
Biotin J201-R 1 C ¥20,000 4<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 21
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
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組<br />
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グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
バ<br />
イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
DiSH キット<br />
新 技 術 によりハイブリドーマ 作 製 の 時 間 とコストを 節 減<br />
Abeome 社 のDiSH(Direct Selection of Hybridomas) 技 術 は、<br />
使 用 目 的<br />
高 アフィニティの 抗 体 を 産 生 するハイブリドーマを 選 択 するために、 改 良<br />
を 重 ねたものです。 遺 伝 子 工 学 技 術 によりミエローマ 融 合 パートナーに ハイブリドーマの 作 製 及 び、 蛍 光 もしくは 磁 気 によるセレクションが<br />
改 良 を 加 えることで、マーカーを 発 現 させている 目 的 ハイブリドーマだ 可 能 な キットです 。<br />
けを 標 識 することを 可 能 にしました。ハイブリドーマは 一 度 標 識 されれ ●マウスモノクローナルハイブリドーマの 作 製 、セレクション、クロー<br />
ば、 数 時 間 で 何 十 万 もの 細 胞 の 中 から、FACSや 磁 気 分 離 により 単 離 す ニング<br />
ることができます。また、 本 キットで 作 製 するハイブリドーマは、 抗 原 特 ● 細 胞 株 の 開 発<br />
異 的 な 抗 体 を 分 泌 するだけでなくハイブリドーマ 表 面 にも 抗 体 を 発 現 し<br />
ます。どちらの 方 法 でも、リンパ 球 の 採 取 からはじめのスクリーニングま<br />
構 成 内 容<br />
で、 平 均 で16 日 (14〜18 日 )で 完 了 します。<br />
●Sp2abミエローマパートナー 細 胞<br />
●PEG<br />
DiSHキットフローチャート<br />
●PCM(Prefusion Medium)<br />
1 目 的 抗 原 で 免 疫 したマウスからリンパ 球 を 採 取 します。<br />
●WCM(Wash Medium)<br />
2B 細 胞 をミエローマ 細 胞 Sp2ab(Igα 及 びIgβを 発 現 )と 融 合 させ、 特 ●FCM(Fusion Medium)<br />
異 的 なイムノグロブリンを 分 泌 ・ 表 面 発 現 するハイブリドーマを 作 製 ●AbeoClone Medium<br />
します。<br />
●RCM(Recovery Medium)<br />
●ECM(Expansion Medium)<br />
< 磁 気 ビーズによる 分 離 方 法 ><br />
3 磁 気 標 識 を 用 いて 抗 原 特 異 的 ハイブリドーマを 単 離 します。<br />
4 上 清 をAbeoCloneのメディウムで10〜14 日 間 培 養 します。<br />
510 日 後 、 上 清 を 分 析 して 分 泌 された 抗 体 ( 目 に 見 えるコロニー)を 確<br />
認 します。<br />
<br />
3 抗 原 特 異 的 ハイブリドーマを、 蛍 光 活 性 化 セルソーター(FACS)によ<br />
って、 単 一 細 胞 に 選 別 します。<br />
496ウェルプレートに 細 胞 を 移 し、10 日 後 抗 原 特 異 的 抗 体 の 有 無 を 分<br />
析 します。<br />
5 必 要 に 応 じ、 目 的 のハイブリドーマを 増 幅 します。<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
機<br />
器<br />
Enzo Life Sciences, Inc. 略 号 ENZ<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
DiSH Kit A Hybridoma Selection and Cloning Kit ENZ-71001-0001 1 kit(For fusion of 1x10 8 total lymphocytes) ¥131,000 5 7<br />
アプリケーション 例 “Anti-hESC mAb Hesca-2 Binds to a Glycan Epitope Commonly Found on Carcinomas”をコスモ・バイオホームページ( 欄 外 参 照 )で 紹 介 しています。<br />
!<br />
“サイト 内 検 索 ”でご 確 認 ください。(キーワード:DiSH)<br />
22<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 しく 発 売 された 商 品 です。 今 後 の 注 目 商 品 です。 ベストセラー 商 品 です。 3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
Gene-TALER Custom TALEN and TALE-TFサービス<br />
位 置 特 異 的 にゲノム 編 集 できる 次 世 代 遺 伝 子 改 変 技 術 !<br />
概 要<br />
2 【TALENサービス】<br />
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
ブ<br />
リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
シ<br />
ョ<br />
ン<br />
in situハ<br />
<br />
組<br />
<br />
ゲノム 編 集 (Genome Editing)とは、Transcription Activator-Like<br />
Effector Nucleases(TALEN) 等 の 技 術 により 遺 伝 子 特 異 的 な 破 壊 や<br />
レポーター 遺 伝 子 のノックイン 等 を 行 う 新 しい 遺 伝 子 改 変 技 術 です。<br />
Transcription Activator-Like(TAL)エフェクターは、 酵 素 (TALEN)、<br />
転 写 因 子 (TALE-TF) 及 びその 他 の 機 能 性 ドメインとの 標 的 配 列 特 異<br />
的 な 融 合 により、 位 置 特 異 的 な 遺 伝 子 編 集 ツールを 作 成 するために<br />
利 用 されています。これらの 融 合 タンパク 質 は 染 色 体 の 標 的 配 列 を<br />
特 異 的 に 認 識 ・ 結 合 し、ノックアウト、ノックイン(ドナープラスミドを<br />
含 む)、 改 変 、 活 性 化 、 抑 制 等 の 遺 伝 子 編 集 (gene-editing)を 実 現 し<br />
ます。3 塩 基 を 認 識 するジンクフィンガーと 異 なり、TALエフェクター<br />
ドメインは1 塩 基 を 認 識 するためどのような 配 列 であっても 標 的 とする<br />
ことが 可 能 です。<br />
TALエフェクターは、Xanthomonas が 植 物 に 感 染 するときに 分<br />
泌 されるタンパク 質 で、これらのタンパク 質 は、 約 34 アミノ 酸 残 基 か<br />
らなる 中 央 リピートドメインを 介 して 宿 主 植 物 のプロモーター 配 列<br />
を 認 識 し、 結 合 することで 植 物 遺 伝 子 の 発 現 を 活 性 化 することがで<br />
きます。 各 リピート 領 域 の 12 番 目 と13 番 目 のアミノ 酸 残 基 が 非 常<br />
に 可 変 性 が 高 く、この2つのアミノ 酸 残 基 と 標 的 配 列 内 のDNA 塩 基<br />
との 間 で 単 純 な 一 対 のコードができます( 例 :NI=A、HD=C、NG=<br />
T、NN=G or A)。<br />
1 【TALエフェクターカスタムサービス】<br />
TALEN、TALE-TF、その 他 TALエフェクターベースのターゲットゲ<br />
ノム 修 飾 ツールに 対 する、 設 計 、 製 造 、 検 証 のカスタムサービスについ<br />
て、 下 記 の 通 りご 選 択 いただけます。<br />
TALENは、Fok1ヌクレアーゼと 融 合 したDNA 結 合 ドメインを 含 んで<br />
います。TALEとFok1 融 合 体 がホモダイマーになり2つのターゲットサ<br />
イトが 結 合 する( 図 2)とFok1 が 活 性 化 し、DNAを 切 断 します。TALEN<br />
が 誘 導 するDNA 切 断 は 部 位 特 異 的 な 二 本 鎖 切 断 ですが、これを 修 復 す<br />
るのが 細 胞 の 修 復 機 構 である 非 相 同 性 末 端 結 合 (non-homologous<br />
end joining、NHEJ)による 切 断 部 位 でのDNAの 再 結 合 & 欠 損 修 復 、ま<br />
たは 外 因 性 の 二 本 鎖 DNAフラグメントの 相 同 組 換 えによるゲノムの 非<br />
相 同 性 末 端 結 合 部 位 の 導 入 です。TALENは、 安 定 した 修 飾 ヒトES 細 胞<br />
の 作 製 、iPS 細 胞 クローンの 誘 導 、ノックアウト 生 物 (ラット、 線 虫 、ゼブラ<br />
フィッシュ 等 )の 作 製 等 の 用 途 に 使 用 されています。<br />
図 1 TALENデザインの 模 式 図<br />
図 2 TALENのターゲット 配 列 ( 大 文 字 部 分 。 小 文 字 部 分 は 切 断 部 位 )<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
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イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
特 長<br />
●あらゆる 細 胞 のあらゆる 遺 伝 子 をターゲット 可 能<br />
● 配 列 特 異 性 が 高 いゲノムターゲットサイト<br />
●フレキシブルなTALEN、TALE-TF、その 他 TALエフェクターのデザイン<br />
●ご 利 用 いただくサービス 内 容 を 選 択 可 能 ( 表 1)<br />
●セルフリーまたはセルベースの 機 能 検 証 も 対 応<br />
■ 表 1:ご 提 供 可 能 なサービスの 種 類<br />
Genome-<br />
TALER<br />
Engineer<br />
Genome-<br />
TALER<br />
Value<br />
Genome-<br />
TALER<br />
Premium<br />
Genome-<br />
TALER<br />
Project<br />
TAL エフェクターデザイン ○ ○ ○ ─<br />
TAL エフェクター 作 製 &<br />
シーケンシング<br />
○ ○ ○ ─<br />
エピソーマルレベル<br />
TALエフェクター 機 能 検 証 :<br />
in vitro cleavage or<br />
─ ○ ○ ─<br />
surrogate reporter assay<br />
染 色 体 レベル<br />
TALエフェクター 機 能 検 証<br />
─ ─ ○ ─<br />
追 加 作 業 または<br />
カスタマイズサービス<br />
─ ─ ─ ○<br />
納 期 3 週 間 〜 4〜6 週 間 8〜9 週 ご 照 会<br />
図 3 eGFP 発 現 のノックダウン<br />
EX-EGFP-Lv105プラスミドとTALENプラスミドを 共 トランスフェクトし、48 時 間 後 eGFPの 発 現 を 観 察 した。<br />
3 【TALE-TF カスタムサービス】<br />
TALエフェクターのもう1つの 応 用 は、DNA 結 合 ドメインを 転 写 活<br />
性 化 ドメインに 融 合 させることによる、 標 的 遺 伝 子 の 転 写 活 性 化 もし<br />
くは 転 写 抑 制 です。TALE-TFは、 真 核 細 胞 中 で 遺 伝 子 の 発 現 を 選 択<br />
的 に 調 節 できるツールです。VP64 転 写 アクチベーターに 融 合 させた<br />
TALEのDNA 結 合 ドメインを 含 みます。<br />
図 4 TALE-TFデザインの 模 式 図<br />
汎<br />
用<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
図 5 TALE-TFのターゲットサイト<br />
受 託 サービスの 詳 細 は、コスモ・バイオ 受 託 担 当 までお 問 い 合 わせください。<br />
GeneCopoeia, Inc.<br />
略 号 GCP<br />
Email:jutaku@cosmobio.co.jp<br />
機<br />
器<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 23
[<br />
特<br />
集<br />
]<br />
織<br />
染<br />
色<br />
イ、<br />
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リ<br />
ダ<br />
イ<br />
ゼ<br />
ー<br />
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ョ<br />
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in situハ<br />
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組<br />
<br />
大 容 量 遺 伝 子 導 入 装 置 「AgilePulseMAX」<br />
サンプルボリューム5Fまでの 効 率 の 良 い 遺 伝 子 導 入 が 可 能<br />
構 成 内 容<br />
シ<br />
グ<br />
ナ<br />
ル<br />
伝<br />
達<br />
●AgilePulseMAX 遺 伝 子 導 入 装 置<br />
● 大 容 量 チャンバーキット( 品 番 :BTX47-0010)<br />
●キュベット 用 セーフティースタンド( 品 番 :BTX47-0203)<br />
●CytoporationMedium T( 品 番 :BTX47-0002)<br />
●ユーザーマニュアル<br />
細<br />
胞<br />
培<br />
養<br />
・<br />
細<br />
胞<br />
工<br />
学<br />
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イ<br />
オ<br />
メ<br />
デ<br />
ィ<br />
カ<br />
ル<br />
汎<br />
用<br />
特<br />
長<br />
●キュベットでのプロトコールでそのままスケールアップ(2〜5f)が<br />
可 能<br />
●CytoporationMediumの 使 用 により 導 入 効 率 の 向 上 が 可 能<br />
●タッチスクリーン 操 作 による、 使 いやすいユーザーインターフェース<br />
●2 種 類 のパルスを 使 用 することで 高 い 生 存 率 を 維 持 しつつ、 高 い 導<br />
入 効 率 を 実 現<br />
● 大 容 量 チャンバーの 使 用 により、2〜5f のサンプルに 対 してエレク<br />
トロポレーションを 実 施 することが 可 能 です。<br />
BTX 略 号 BXD<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格<br />
AgilePulseMAX 遺 伝 子 導 入 システム BTX47‐0200 1 unit ¥3,000,000<br />
関 連 商 品<br />
大 容 量 遺 伝 子 導 入 用 バッファーです。<br />
● 真 核 細 胞 の 遺 伝 子 導 入 に 至 適 化 ● 生 理 的 pH・ 最 適 な 浸 透 圧<br />
● 高 導 入 効 率 ・ 高 生 存 率<br />
● 低 伝 導 率 による 発 熱 抑 制<br />
BTXpress Cytoporation®Media T & T4<br />
● 細 胞 種 に 応 じて2 種 類 から 選 択 可 能<br />
● 動 物 成 分 不 含 有<br />
●RNase/DNaseフリー<br />
図 1 大 容 量 チャンバーキット<br />
BTX 略 号 BXD<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格<br />
BTXpress CytoporationMedia T BTX47‐0002 500 F ¥33,000<br />
BTXpress CytoporationMedia T4 BTX47‐0003 500 F ¥33,000<br />
■ 仕 様<br />
電 圧 設 定<br />
パルス 幅<br />
パルス 間 隔<br />
インターフェース<br />
データ 出 力<br />
外 形 寸 法<br />
重 量<br />
50〜1200 V<br />
50〜1200 V<br />
50 μs〜10 ms<br />
タッチスクリーン、フットスイッチ(オプション)<br />
USB フラッシュメモリー<br />
32(W)x 40(D)x 20(H)cm<br />
11.3 kg<br />
品 番 BTX47-0002 BTX47-0003<br />
品 名 Cytoporation®Media T Cytoporation®Media T4<br />
浸 透 圧<br />
270〜290 mOsm/L<br />
電 気 伝 導 度 0.08 mS/cm 3.45 mS/cm<br />
pH 7.2<br />
RNase/DNase<br />
検 出 限 界 以 下<br />
エンドトキシン < 0.25 EU/F<br />
滅 菌<br />
フィルター 滅 菌<br />
関 連 商 品<br />
ElectroBuffer kit<br />
受<br />
託<br />
サ<br />
ー<br />
ビ<br />
ス<br />
機<br />
器<br />
エレクトロポレーション 時 の 細 胞 の 外 傷 を 抑 えると 共 に、 細 胞 膜 が 不 安 定 化 した 後 の 回 復 ・ 増 殖 を 促 すための 必 須 栄 養<br />
素 を 供 給 します。 導 入 効 率 、 生 存 率 が 改 善 されます。 一 連 の 試 薬 が 入 ったキットで、 使 いやすいのも 特 長 です。<br />
Cell Projects Ltd. 略 号 CLP<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格<br />
Electrobuffer kit EB-110 1kit ¥35,000<br />
細 菌 、 酵 母 、 昆 虫 、 植 物 、または 哺 乳 類 細 胞 へのエレクトロポレーションに 最 適 なキュベットです。<br />
Cell Projects Ltd. 略 号 CLP<br />
品 名 品 番 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格<br />
1mm キュベット 赤 キャップ EP-101 50 pc ¥15,000<br />
1mm キュベット(ロング 電 極 ) 赤 キャップ EP-201 50 pc ¥15,000<br />
2mm キュベット 青 キャップ EP-102 50 pc ¥15,000<br />
2mm キュベット(ロング 電 極 ) 青 キャップ EP-202 50 pc ¥15,000<br />
4mm キュベット(ロング 電 極 ) 緑 キャップ EP-104 50 pc ¥15,000<br />
滅 菌 済 みディスポキュベット プラスチックピペット 付 PP-101 50 pc ¥2,600<br />
!<br />
関 連 商 品<br />
キュベット<br />
全 て 研 究 用 、ガンマ 線 滅 菌 済 みです。<br />
※ 遺 伝 子 導 入 装 置 「AgilePulseMAX」には、ロング 電 極 ( 品 番 :EP-201、EP-202、EP-104)のご 使 用 を 推 奨 します。<br />
24<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp
研 究 室 の<br />
ホープ<br />
vol.<br />
56<br />
東 京 大 学 大 学 院 新 領 域 創 成 科 学 研 究 科 メディカルゲノム 専 攻<br />
疾 患 蛋 白 質 工 学 分 野 津 本 研 究 室 博 士 課 程 2 年<br />
松 長 遼 さん<br />
生 命 分 子 の 相 互 作 用 を 読 み 解 く 精 密 解 析 から<br />
ものづくりのヒントが 見 えてくる<br />
松 長 さんが 現 在 取 り 組 んでいるテーマは、 環 境 に 応 答 して 直<br />
列 につながるタンパク 質 (Protein Shackle)の 設 計 だ。 当 初 、<br />
津 本 教 授 から 与 えられたテーマは、レンサ 球 菌 線 毛 の 重 合 を 促<br />
す 酵 素 の 機 能 解 析 だったが、 線 毛 を 構 成 するSpy0128に 分 子 内<br />
イソペプチド 結 合 という 特 殊 な 結 合 があることからヒントを 得 、<br />
「 酵 素 を 使 わず 自 然 につながるタンパク 質 分 子 で、 繊 維 状 のナノ<br />
材 料 がつくれるのではないか」と 仮 説 を 立 てた。<br />
試 行 錯 誤 の 結 果 、 分 子 内 で 結 合 を 形 成 する“タグ”の 部 分 を、<br />
結 合 ポケットの 外 側 に 付 け 替 えることで 分 子 間 結 合 が 起 こり、<br />
タンパク 質 が 鎖 状 につながることを 確 認 。この 機 能 を、ペプチド<br />
の“ 蓋 ”を 使 い、 酸 化 ・ 還 元 環 境 に 応 じて 制 御 するという 革 新 的 な<br />
方 法 を 編 み 出 すまで、さらに1 年 を 要 した。<br />
電 子 工 作 キットでラジオをつくったり、パソコンを 自 分 で 組 み<br />
立 ててつくるなど、もともとものづくりが 大 好 きな 松 長 さんだ<br />
が、 当 初 、 解 析 に 対 しては 苦 手 意 識 を 持 っていたという。しかし、<br />
今 回 の 開 発 は「 解 析 に 注 力 するこの 研 究 室 でなければできな<br />
かった」と 語 る。「 他 のタンパク 質 の 相 互 作 用 解 析 に 取 り 組 む 仲<br />
間 から、 数 多 くのヒントをもらいました。 解 析 からものづくりの 発<br />
想 が 生 まれてくるんですね」。<br />
息 抜 きは 通 学 時 の 読 書 。 電 子 書 籍 リーダーの 購 入 がきっかけ<br />
で、ジャンルを 問 わず 様 々な 本 を 読 むようになった。「 特 に 好 きな<br />
のは 長 編 ミステリです。 伏 線 がきれいに<br />
つながって『こうなるのか!』と 思 う 瞬 間 が<br />
楽 しいですね」。 物 語 に 夢 中 になるうち<br />
に、 頭 の 切 り 替 えができる。それ 以 外 の<br />
時 間 は、 不 思 議 なほど 研 究 に 熱 中 してい<br />
るという 松 長 さん。 目 標 は、 解 析 ともの<br />
づくりの 架 け 橋 となるような 研 究 者 だ。<br />
津 本 研 究 室<br />
東 京 大 学 医 科 学 研 究 所<br />
疾 患 プロテオミクスラボラトリー<br />
専 門 は 生 命 分 子 解 析 学 。 研 究 室 では、 抗 体 ・ 受 容 体 ―リガンド 相 互 作 用 やシグナル 伝 達 系<br />
タンパク 質 相 互 作 用 を 中 心 に、 結 晶 構 造 解 析 や 熱 力 学 的 解 析 を 駆 使 し、 分 子 間 相 互 作 用 の<br />
精 密 解 析 を 行 っている。また、シャペロン 様 活 性 を 持 つアミノ 酸 を 加 えることにより、タンパ<br />
ク 質 立 体 構 造 を 安 定 化 させる 革 新 的 な 技 術 を 開 発 。これらの 成 果 が 評 価 され、2012 年 、 津<br />
本 教 授 は 日 本 学 術 振 興 会 賞 を 受 賞 した。 研 究 室 メンバーは、 同 じ 解 析 手 法 を 用 いながら<br />
各 々が 独 立 したテーマを 扱 っているため、 研 究 領 域 は 広 い。「 互 いを 認 め 合 いながら、 自 分<br />
をどう 生 かすか 各 々が 考 えるようになれば、 研 究 室 内 の 役 割 も、おのずと 適 材 適 所 に 決 まっ<br />
ていきます。すると、 全 てがうまく 回 っていく。そうなるまで 待 つのは 忍 耐 がいりますが<br />
( 笑 )」。メンバーの 数 々の 受 賞 歴 からも、その 活 躍 ぶりがうかがえる。ここで 芽 吹 いた 知 の<br />
種 が、 今 後 も 次 々と 花 開 いていくことだろう。<br />
津 本 浩 平 教 授<br />
研 究 室 の 皆 さん<br />
Cosmo Bio News No.98 25
新 規 抗 体 商 品 のご 案 内<br />
ここに 掲 載 しております 商 品 はごく 一 部 です。コスモ・バイオホームページ 上 “ 商 品 検 索 ”をご 利 用 ください。<br />
抗 体 名 略 号 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格<br />
A<br />
Anti ABCG8 ABV H00064241-B01P 500 B ¥192,000<br />
Anti Aconitase AGR AS09 521 100 E ¥69,000<br />
Anti Aldh7A1 ABG AJ1002C 100 E ¥66,000<br />
Anti Aldolase B ABG AJ1024B 100 E ¥66,000<br />
Anti AMZ1 SCB SC-163681 200 B ¥51,000<br />
Anti ANKRD37 ABG AP19439B 0.1 C ¥42,000<br />
Anti Anoctamin-2 ALO ACL-012 50 E ¥43,000<br />
Anti APLN PGI 11497-1-AP 150 E ¥68,000<br />
Anti AQP4 PGI 16473-1-AP 150 E ¥68,000<br />
B<br />
Anti B7-H4 ABG AJ1073A 100 E ¥66,000<br />
Anti Bad ABG AJ1074A 100 E ¥66,000<br />
Anti Bag-1 ABG AJ1075A 100 E ¥66,000<br />
Anti Bag-2 ABG AJ1076A 100 E ¥66,000<br />
Anti BANK1 SCB SC-133358 100 B ¥51,000<br />
Anti BCLP SCB SC-137312 200 B ¥51,000<br />
Anti BEST3 ABV H00144453-B01P 500 B ¥192,000<br />
Anti Bid ABG AJ1099A 100 E ¥66,000<br />
Anti Bim ABG AJ1100A 100 E ¥66,000<br />
Anti BOLA2/2B SCB SC-163747 200 B ¥51,000<br />
C<br />
Anti C1orf133 SCB SC-163854 200 B ¥51,000<br />
Anti C2orf49 SCB SC-137342 100 B ¥51,000<br />
Anti C4orf35 SCB SC-136595 200 B ¥51,000<br />
Anti CaMKK2 BET A304-009A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti CD7 RSD AF7579 100 B ¥75,000<br />
Anti CDX2 ABG AJ1181A 100 E ¥66,000<br />
Anti CENP-A ABG AJ1182A 100 E ¥66,000<br />
Anti Cortisol WLS WLS-A90462GE01 50 B ¥55,000<br />
Anti COTL1 RSD AF7865 100 B ¥75,000<br />
Anti CUL4A/B ABG AJ1207B 100 E ¥66,000<br />
Anti Cyclin D1 WLS WLS-A90585RA01 100 B ¥88,000<br />
D<br />
Anti Dengue NS1 ICS MNS1-55A-3-Z 0.1 C ¥34,000<br />
Anti DGKa NOR MUB2009P 100 B ¥67,000<br />
Anti DLL1 SIN 11635-R306 100 B ¥48,000<br />
E<br />
Anti E2-Crimson ORG TA180085 100 E ¥69,000<br />
Anti EDF-1 BET A304-039A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti Edg6 RKL 600-401-I18 100 B ¥66,000<br />
Anti EDNRB BRT ORB5103 200 B ¥65,000<br />
Anti ENG ORG CF506170 100 B ¥124,000<br />
Anti EP58 SCB SC-292974 200 B ¥51,000<br />
Anti Erbin RSD AF7866 100 B ¥75,000<br />
Anti ERCC1 RSD 4424-AMC-100 100 E ¥74,000<br />
Anti Estradiol WLS WLS-A90461HU01 100 B ¥90,000<br />
F<br />
Anti FAF1 SCB SC-292983 200 B ¥51,000<br />
Anti FGFR1 ABG AP19436B 0.1 C ¥42,000<br />
Anti FoxD3 RSD MAB5090 100 B ¥51,000<br />
G<br />
Anti gamma-Tubulin CAC NM-MA-003 100 E ¥40,000<br />
Anti GLG1 RSD AF7879 100 B ¥75,000<br />
Anti Glis1 RSD AF7618 100 B ¥75,000<br />
Anti Glu-Tubulin APO 67-ABC0101 300 B ¥173,000<br />
H<br />
Anti HAGH ABG AM2159A 0.1 F ¥42,000<br />
Anti HBA1 ABV H00003039-B01P 500 B ¥192,000<br />
Anti HBB ABV H00003043-M12 100 B ¥47,000<br />
Anti HDC ABV H00003067-B01P 500 B ¥192,000<br />
Anti HDLBP ABV H00003069-B01P 500 B ¥192,000<br />
Anti Hemopexin WLS WLS-A91986HU01 50 B ¥50,000<br />
Anti HIC2 LSP LS-C155056-100 100 B ¥86,000<br />
Anti Histone H3 AGR AS10 710 100 E ¥80,000<br />
Anti HLA-DP LET H260 50 B ¥20,000<br />
Anti HLA-DQ LET H262 50 B ¥20,000<br />
Anti HLA-DR LET H261 50 B ¥20,000<br />
I<br />
Anti IL-2 R α RSD MAB51561 100 B ¥51,000<br />
Anti IL6ST RPK RAA25066 1 C ご 照 会<br />
J<br />
Anti Junctophilin-3 SCB SC-292970 200 B ¥51,000<br />
L<br />
Anti LEUTX SCB SC-247442 X 200 B ¥51,000<br />
Anti LIPM SCB SC-247451 200 B ¥51,000<br />
Anti Lipocalin-15 SCB SC-247460 200 B ¥51,000<br />
Anti LOC729468 SCB SC-324078 200 B ¥51,000<br />
Anti Lplunc1 PMB 30429 0.1 C ¥53,000<br />
Anti LR3 IGF-I GRO MAO1 100 B ¥94,000<br />
Anti LYPD6B ABG AM2160A 0.1 F ¥42,000<br />
M<br />
Anti MAGE-A1 SBS M4880 0.1 F ¥44,000<br />
抗 体 名 略 号 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格<br />
Anti MARCO RSD AF7586 100 B ¥75,000<br />
Anti Matrilin-1 RSD MAB7878 100 B ¥51,000<br />
Anti mBanana ORG TA180031 100 E ¥69,000<br />
Anti mcherry ORG TA180028 100 E ¥69,000<br />
Anti MCPIP1 RSD MAB7875 100 B ¥51,000<br />
Anti MESP1 BRT ORB3359 100 B ¥60,000<br />
Anti Mitofusin 1 RSD AF7880 100 B ¥75,000<br />
Anti Mitofusin 2 RSD AF7884 100 B ¥75,000<br />
Anti mKate ORG TA180091 100 E ¥69,000<br />
Anti MRCKγ SCB SC-324138 200 B ¥51,000<br />
Anti MS4A5 SCB SC-137610 200 B ¥51,000<br />
Anti mStrawberry ORG TA180039 100 E ¥69,000<br />
Anti MSUT2 BET A303-993A 0.1 C ¥63,000<br />
N<br />
Anti NBN ORG CF801220 100 B ¥124,000<br />
Anti NFATp/NFATc2 IGL 0112-02 20 B ¥85,000<br />
Anti NFKBIB AIO R1348-1 100 E ¥47,000<br />
Anti NUP93 BET A303-979A 0.1 C ¥63,000<br />
O<br />
Anti OAZ BET A304-018A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti ORM1 PGI 16439-1-AP 150 E ¥68,000<br />
P<br />
Anti PAIP2 ATG ATGA0234 100 E ¥33,000<br />
Anti Paralemmin 2 SCB SC-133352 200 B ¥51,000<br />
Anti PCNA ORG CF800915 100 B ¥124,000<br />
Anti PDZK1 SCB SC-292971 200 B ¥51,000<br />
Anti PGS1 SCB SC-136800 200 B ¥51,000<br />
Anti PIAS1 ABG AJ1609A 100 E ¥66,000<br />
Anti PIKFyve RSD AF7885 100 B ¥75,000<br />
Anti PIWIL3 LSP LS-C115923-500 500 B ¥279,000<br />
Anti PLEKHA5 SCB SC-292948 200 B ¥51,000<br />
Anti Plexin D1 RSD MAB4160 100 B ¥51,000<br />
Anti PolD1 BET A304-007A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti PRCP RSD AF7164 100 B ¥75,000<br />
Anti PSAP SCB SC-292968 200 B ¥51,000<br />
R<br />
Anti Rab11-FIP3 SCB SC-292964 200 B ¥51,000<br />
Anti RAB20 PGI 11616-1-AP 150 E ¥68,000<br />
Anti RanBP17 BET A303-994A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti Rap1GAP ABG AJ1678A 100 E ¥66,000<br />
Anti Ras RSD MAB3429-100 100 B ¥51,000<br />
Anti Reelin WLS WLS-A92775RA01 100 B ¥97,000<br />
Anti RelB ABG AJ1685B 100 E ¥66,000<br />
Anti Rest ABG AJ1686A 100 E ¥66,000<br />
Anti Rheb ABG AJ1687A 100 E ¥66,000<br />
Anti RIOK2 SCB SC-136838 200 B ¥51,000<br />
Anti RNF180 SCB SC-137731 200 B ¥51,000<br />
Anti R-Spondin 1 WLS WLS-A81171RA01 50 B ¥68,000<br />
Anti RTN4 PGI 10950-1-AP 150 E ¥68,000<br />
Anti Rubella 1-6 BDN GB9524 1 C ¥63,000<br />
Anti Rubella 2-6 BDN GB9525 1 C ¥63,000<br />
S<br />
Anti SAE1 LSP LS-C108720-500 500 B ¥237,000<br />
Anti Sec13 BET A303-980A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti SERPINC1 PGI 16414-1-AP 150 E ¥68,000<br />
Anti Siglec-7 SRT MCA5782GA 0.1 C ¥47,500<br />
Anti sMtCK SCB SC-292981 200 B ¥51,000<br />
Anti SNAP29 RSD AF7869 100 B ¥75,000<br />
Anti STING RKL 600-401-I20 100 B ¥66,000<br />
Anti SULT1A1 SIN 11658-R029 100 B ¥48,000<br />
T<br />
Anti TCEB2 BET A304-008A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti Tenrl SCB SC-136922 200 B ¥51,000<br />
Anti TMX1 BET A304-040A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti TOLLIP AIO R1331-2 100 E ¥47,000<br />
Anti TP73 ORG CF506470 100 B ¥124,000<br />
Anti Transgelin RSD AF7886 100 B ¥75,000<br />
Anti TRIM61 SCB SC-136943 200 B ¥51,000<br />
Anti TSPAN1 PGI 16058-1-AP 150 E ¥68,000<br />
V<br />
Anti Valproic Acid BDN G55508M 1 C ¥128,000<br />
Anti VIM ORG CF801221 100 B ¥124,000<br />
X<br />
Anti XPF RSD 4422-AMC-100 100 E ¥74,000<br />
Z<br />
Anti ZAP3 BET A304-038A 0.1 C ¥63,000<br />
Anti ZNF276 ABG AP19434C 0.1 C ¥42,000<br />
Anti ZNF410 ABG AP19435B 0.1 C ¥42,000<br />
Anti ZsGreen1 ORG TA180002 100 E ¥69,000<br />
Anti ZsYellow1 ORG TA180004 100 E ¥69,000<br />
α 、β<br />
Anti α Fodrin ABG AJ1025A 100 E ¥66,000<br />
Anti β-Tubulin-III ABG AJ1098B 100 E ¥66,000<br />
26<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
シトルリン 化 フィブリノーゲン 抗 体<br />
多 発 性 硬 化 症 、 関 節 リウマチ、 紅 斑 性 狼 瘡 等 の 研 究 に<br />
フィブリノーゲンは、 肝 臓 で 産 生 されるタンパク 質 で、 凝 血 により 出<br />
血 を 止 める 役 割 を 持 っています。 関 節 リウマチ 患 者 の 患 部 関 節 では、<br />
フィブリノーゲンがPAD(ペプチジルアルギニンデイミナーゼ)により<br />
脱 イミノ 化 (アルギニンからシトルリンへの 変 換 )を 受 けています。シ<br />
トルリンはアミノ 酸 ですが、DNAにコードされたアミノ 酸 ではないた<br />
め、 通 常 のタンパク 質 合 成 ではタンパク 質 中 に 組 み 込 まれることはあ<br />
りません。しかし、いくつかのタンパク 質 は、シトルリンを 含 んでいる<br />
ことが 知 られています。ミエリン 塩 基 性 タンパク 質 (MBP)、フラジェ<br />
リン、 一 部 のヒストンタンパク 質 等 は、 正 常 の 状 態 でシトルリンを 含 み<br />
ますが、フィブリン、ビタミン 等 のタンパク 質 は、 細 胞 死 や 組 織 炎 症 の<br />
間 に 脱 イミノ 化 を 受 けます。<br />
関 節 リウマチ 患 者 の 大 多 数 ( 少 なくとも80%)が、シトルリンを 含 む<br />
タンパク 質 に 対 する 免 疫 応 答 を 起 こしています。この 免 疫 応 答 の 原<br />
因 はまだわかっていませんが、シトルリンを 含 むタンパク 質 ・ペプチド<br />
に 対 する 抗 体 反 応 の 検 出 が、 関 節 リウマチの 診 断 ・ 研 究 に 重 要 になっ<br />
てきています。<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
図 1 免 疫 ブロット 結 果<br />
シトルリン 化 フィブリノーゲン 抗 体 ( 品 番 :MQR 1.101)を 用 いて、 免 疫 ブロットを 行<br />
った。<br />
左 のレーン:ヒトフィブリノーゲン(シグマ 社 品 番 :F4883)<br />
右 のレーン:ウサギPAD2(シグマ 社 品 番 :P4874)で 脱 イミノ 化 したヒトフィブリノー<br />
ゲン<br />
ModiQuest Research B.V. 略 号 MDQ<br />
品 名 交 差 種 免 疫 動 物 アイソタイプ クローン 精 製 適 用 品 番 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Anti Citrullinated Fibrinogen MS, HU Mouse IgG1 3D1 プロテインA 精 製 ELISA, IB, IHC MQ 13.101 ¥161,000 5<br />
MS, HU Mouse IgG1 20B2 プロテインA 精 製 ELISA, IB, IHC MQ 13.102 ¥161,000 5<br />
MS, HU Mouse IgG1 4.19 プロテインA 精 製 ELISA MQ 13.103 ¥161,000 5<br />
MS, HU Mouse IgG1 23H2 プロテインA 精 製 ELISA, IHC MQ 13.104 ¥161,000 5<br />
MS, HU Mouse IgG2a, κ 3F2 プロテインA 精 製 ELISA, IB, IP, IHC MQR 1.101 ¥223,000 5<br />
HU Mouse IgG1 1F11 プロテインA 精 製 ELISA, IB, IP, IHC MQR 2.101 ¥223,000 5<br />
20Sプロテアソーム 特 異 的 認 識 モノクローナル 抗 体<br />
免 疫 電 子 顕 微 鏡 にも 適 用 可 能 なクローンを3 種 エントリー<br />
26Sプロテアソームは 真 核 細 胞 において、ユビキチンを 介 したタン<br />
パク 質 分 解 メカニズムの 鍵 を 握 る 物 質 であり、その 構 成 体 の1つであ<br />
る20Sプロテアソームはプロテアーゼ 活 性 を 有 し、タンパク 質 分 解 の<br />
中 枢 的 な 役 割 を 担 うとされています。20Sプロテアソームはαとβの<br />
二 種 のサブユニットで 構 成 され、αとβの 各 1〜7 分 子 がαββαの 順 に<br />
筒 状 に 積 み 重 なった 構 造 をとることが 知 られています。コスモ・バイ<br />
オ 抗 体 ブランドCACでは、20Sプロテアソームの 特 定 のサブユニット<br />
を 認 識 するモノクローナル 抗 体 3 種 の 販 売 を 開 始 致 しました。これら<br />
の 抗 体 は 免 疫 電 子 顕 微 鏡 での 解 析 により、プロテアソーム 内 のサブ<br />
ユニットの 局 在 を 検 出 することも 可 能 です。<br />
提 供 者 : 静 岡 大 学 理 学 部 生 物 科 学 科 教 授 徳 元 俊 伸 先 生<br />
<br />
<br />
図 2 クローンGC3αを 用 いたマウス 精 子 中 のプロテアソームにおける 局 在 解 析 ( 免 疫 電 子 顕 微 鏡 )<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
図 3 クローンGC4/5を 用 いた20Sプロテアソームにおけるα2サブユニットの 検 出<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
図 1 クローンGC3α、GC3β、GC4/5を 用 いた 精 製 26プロテアソームにおけるサブユニットの 局 在 解 析<br />
コスモ・バイオ 株 式 会 社 略 号 CAC<br />
品 名 免 疫 動 物 クローン 適 用 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Anti 20S proteasome(GC3α) Mouse GC3α IEM, WB, IHC SZU-PS-M01 100 E(1 C/F) ¥50,000 5<br />
Anti 20S proteasome(GC3β) Mouse GC3β WB SZU-PS-M02 100 E(1 C/F) ¥50,000 5<br />
Anti 20S proteasome(GC4/5) Mouse GC4/5 WB, IEM SZU-PS-M03 100 E(1 C/F) ¥50,000 5<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 27
新 規 抗 体 商 品 のご 案 内<br />
ここに 掲 載 しております 商 品 はごく 一 部 です。コスモ・バイオホームページ 上 “ 商 品 検 索 ”をご 利 用 ください。<br />
形 質 細 胞 様 樹 状 細 胞 の 研 究 用 モノクローナル 抗 体<br />
樹 状 細 胞 に 特 化 した 抗 体 メーカーからの 高 品 質 抗 体 !<br />
形 質 細 胞 様 樹 状 細 胞 (pDC;plasmacytoid dendritic cells)は、<br />
ウイルス 感 染 に 対 抗 する 主 要 な 番 人 であると 考 えられています。<br />
pDCの 前 駆 体 は、 主 に1 型 インターフェロン(IFN)を 産 生 し、 自 然 免 疫<br />
と 適 応 免 疫 を 結 び 付 ける 独 特 の 能 力 を 持 っています。 病 原 体 の 刺 激<br />
に 応 答 して1 型 IFNを 大 量 に 産 生 した 後 、ナイーブ T 細 胞 を 刺 激 する<br />
能 力 を 持 つ 樹 状 細 胞 (DC)に 分 化 し、 適 応 免 疫 の 応 答 を 調 節 します。<br />
pDCは、IFN 産 生 を 専 門 とする 細 胞 として、 他 の 免 疫 細 胞 の 機 能 以 外<br />
に、いくつかの 疾 病 の 発 病 も 調 節 しています。<br />
pDCは、2つの 細 胞 内 トールライクレセプター(TLR)、TLR7 及 び<br />
TLR9(それぞれssRNA 及 びCpG DNAモチーフを 認 識 する)により、<br />
病 原 体 関 連 分 子 パターン(PAMPs)を 認 識 することで、 病 原 体 に 対 す<br />
る 免 疫 応 答 において 重 要 な 役 割 を 果 たします。TLR の 作 動 により、 特<br />
にMyD88 及 びIRAK4 分 子 を 含 むシグナル 経 路 を 介 して 高 レベルの<br />
1 型 IFN( 主 にIFNα、IFNβ)の 分 泌 が 誘 導 されます。<br />
ヒトpDCは、 細 胞 表 面 マーカーとしてCD123、CD303、ニューロ<br />
ピリン1/CD304を 発 現 しますが、CD11c( 通 常 のDCに 発 現 )、CD4<br />
( 単 球 に 発 現 )を 発 現 しません。また、マウスの pDCである<br />
B220 high Ly6C high CD11c low 細 胞 では、BST-2( 間 質 骨 髄 抗 原 -2)が 高<br />
度 に 発 現 しています。<br />
デンドリティクス 社 は、pDC の 研 究 に 有 用 なヒト、マウス、イヌのモ<br />
ノクローナル 抗 体 をご 提 供 致 します。<br />
【CD303(BDCA-2)】<br />
pDCで 特 異 的 に 発 現 し、C 型 レクチンのデ<br />
クチン -2 ファミリーに 属 します。このファミ<br />
リーのメンバー(DCIR、デクチン-2、CD303<br />
等 )は、 複 数 のmRNAの 発 現 が 知 られているこ<br />
とから、 複 数 のタンパク 質 アイソフォームが 存<br />
在 する 可 能 性 が 示 唆 されています。<br />
【CD123】<br />
正 常 pDC 及 び 白 血 病 pDCでは、IL3-Rα/<br />
CD123を 発 現 し、IL-3の 存 在 下 でT 細 胞 の 増<br />
殖 を 誘 導 します。IL3-Rα 鎖 の 過 剰 発 現 は、 白<br />
血 病 の 表 現 型 の 発 生 の 一 因 である 可 能 性 が<br />
あります(I. Treilleux, et al. Clin Cancer<br />
Res.(2004))。107D2.08クローンは、ヒト<br />
pDCでマウスを 免 疫 して 得 られた 抗 体 です。<br />
【MyD88】<br />
全 てのTLR(TLR3を 除 く) 及 びIL1-Rに 結 合<br />
する 一 般 的 なアダプタータンパク 質 で、NF-κ<br />
Bを 活 性 化 させます。<br />
ヒト 組 織 凍 結 切 片 のCD303 抗 体 によるIHC 染 色<br />
左 : 扁 桃 腺 ( 品 番 :DDX0042)(クローン:110H7)<br />
中 央 : 脾 臓 ( 品 番 :DDX0040))(クローン:108H10)<br />
右 : 扁 桃 腺 ( 品 番 :DDC0045)(クローン:109B8)<br />
【BST-2(CD317)】<br />
B220 high Ly6C high CD11c low のマウスpDC<br />
で 高 く 発 現 しています。120G8クローンは、<br />
BST-2を 認 識 する 抗 体 です。<br />
CD123 抗 体 ( 品 番 :DDX0300)(クローン:107D2.08)のIHC 染 色<br />
左 :ヒト 扁 桃 腺 凍 結 切 片<br />
右 :ヒト 乳 癌 パラフィン 包 埋 切 片<br />
【IRAK-4】<br />
IL-1R 関 連 キナーゼ(IRAKs)ファミリーに 属<br />
し、Toll/IR-1R(TIR)ファミリーメンバーのシ<br />
グナル 経 路 の 媒 介 に 重 要 な 役 割 を 果 たします。<br />
MyD88 抗 体 の 使 用 例<br />
左 :ヒトHCT116 細 胞 株 サイトメトリー( 品 番 :DDX1400)(クローン:<br />
603E10.05)<br />
右 :ヒトHeLa 細 胞 ( 品 番 :DDX1401)(クローン:603E10.06)<br />
【TLR7】<br />
<br />
<br />
pDCは、TLR7 + で、 多 量 のIFN 産 生 による 活<br />
性 化 に 応 答 します。66H3クローンは、ヒト<br />
TLR7をトランスフェクトした 真 核 生 物 細 胞 で、<br />
マウスを 免 疫 して 得 られました。<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
マウス 脾 臓 凍 結 切 片 の BST-2 抗 体 ( 品 番 :DDX0390)(クローン:<br />
120G8)によるIHC 染 色<br />
ヒト 扁 桃 腺 凍 結 切 片 の IRAK-4 抗 体 ( 品 番 :DDX0340)(クローン:<br />
6F8)によるIHC 染 色<br />
<br />
TLR7 抗 体 ( 品 番 :DDX0500)(クローン:66H3)の 使 用 例<br />
左 :イヌ 細 胞 フロー サイトメトリー<br />
右 :ヒト 扁 桃 腺 凍 結 切 片 IHC 染 色<br />
Dendritics SAS 略 号 DDS<br />
品 名 クローン 種 由 来 交 差 種 免 疫 動 物 標 識 適 用 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Anti CD303 108H10.03 HU HU, MS MS AlexaFluor-488 FC DDX0040A488-50 50 B ¥8,0000 5<br />
Anti CD303 124B3.13 HU HU, MS, RAT MS Biotin IHC DDX0043B-50 50 B ¥73,000 5<br />
Anti BDCA-2/CD303 108H10.03 HU HU MS Unlabeled WB, IHC, FC, Inhibition DDX0040P-50 50 B ¥64,000 5<br />
Anti Basophil 212H6.16 HU HU MS AlexaFluor-488 FC DDX0300A488-50 50 B ¥49,000 5<br />
Anti IL3R α/ CD123 107D2.08 HU HU MS Biotin IP DDX0300B-50 50 B ¥46,000 5<br />
Anti IL3R α/ CD123 107D2.08 HU HU MS Unlabeled WB, IHC(p), FC, IP DDX0300P-50 50 B ¥39,000 5<br />
Anti IRAK4 6F8 HU HU MS AlexaFluor-488 IF DDX0340A488-50 50 B ¥8,0000 5<br />
Anti IRAK4 6F8 HU HU MS Biotin IHC DDX0340B-50 50 B ¥73,000 5<br />
Anti IRAK4 6F8 HU HU MS Unlabeled IHC, ICFC DDX0340P-50 50 B ¥64,000 5<br />
Anti pDC/IPC 120G8.04 MS MS, CAN, FEL RAT AlexaFluor-488 FC DDX0390A488-50 50 B ¥8,0000 5<br />
Anti pDC/IPC 120G8.04 MS MS, CAN, FEL RAT Biotin FC DDX0390B-50 50 B ¥73,000 5<br />
Anti pDC/IPC 120G8.04 MS MS, CAN, FEL RAT Unlabeled IHC, FC, in vivo use DDX0390P-50 50 B ¥64,000 5<br />
Anti pDC/IPC 120G8.04 MS ─ RAT Unlabeled IHC, FC, in vivo use DDX0390HD01 1 C ¥197,000 5<br />
Anti Neuropilin 211H6.01 HU ─ MS AlexaFluor-488 FC DDX0440A488-50 50 B ¥8,0000 5<br />
Anti Neuropilin 211H6.01 HU ─ MS Biotin IHC(f), FC, IP DDX0440B-50 50 B ¥73,000 5<br />
Anti Neuropilin 211H6.01 HU HU MS Unlabeled IHC, FC, IP DDX0440P-50 50 B ¥64,000 5<br />
Anti TLR7 66H3 HU HU MS Unlabeled IHC(f), FC DDX0500P-50 50 B ¥64,000 5<br />
Anti Myd88 603E10.05 HU HU MS Unlabeled ICFC DDX1400P-50 50 B ¥64,000 5<br />
28<br />
Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
Epi-Plus® 抗 体<br />
バリデーション 済 みChIP 用 抗 体<br />
Epi-Plus® 抗 体 は、エピジェネティック 研 究 において 最 もバリデーションされた 抗 体 です。 全 てのEpi-Plus® 抗 体 は、ペプチドアレイを 用 いたドッ<br />
トブロット、ウェスタンブロット、ChIP、ICCについてバリデーション 済 みです。ロックランド 社 で 作 製 した 特 定 のエピジェネティック 修 飾 (Epi-<br />
SynH3、Epi-SynH4)を 伴 う 全 長 合 成 ヒストンH3、H4を 用 いて、Epi-Plus® 抗 体 の 正 確 なQCを 行 っています。<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
図 1 ヒストンH4リン 酸 化 セリン1 抗 体 ( 品 番 :600-401-I96)とH4ペプチ<br />
ドを 用 いたドットブロット<br />
リン 酸 化 セリン1 有 / 無 H4ペプチドに 対 するHS41p 抗 体 (パネルAの 抗 体<br />
量 :0.5μg、パネルBの 抗 体 量 :0.1μg)<br />
(1)(4)H4, 1-15, 未 修 飾 (2)(5)H4, 1-15 S1P (3)(6)H4, 1-24, 未<br />
修 飾<br />
<br />
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<br />
<br />
図 2 ヒストンH4リン 酸 化 セリン1 抗 体 ( 品 番 :600-401-I96)を 用 いたChIPアッ<br />
セイ<br />
図 3 H4S1p 抗 体 ( 品 番 :600-401-I96)とFITC( 緑 )を 用 いた<br />
HeLa 細 胞 のICC 結 果<br />
DAPI( 青 )とDylight 594( 赤 )を 用 いて、 核 酸 とα-チューブリン<br />
を 染 色 した。<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
図 4 ヒストンH3トリメチルリジン4 抗 体 ( 品 番 :600-401-I59)と、 特 定<br />
のリジン 残 基 におけるKMe3 修 飾 を 含 むH3あるいはH4ペプチド<br />
を 用 い たドットブロット<br />
<br />
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<br />
図 5 ヒストンH3トリメチルリジン4 抗 体 ( 品 番 :600-401-I59)を 用 いたChIP<br />
アッセイ<br />
図 6 ヒストンH4モノメチルアルギニン3 抗 体 ( 品 番 :NB21-<br />
2011)とFITC( 緑 )を 用 いたHeLa 細 胞 のICC 結 果<br />
DAPI( 青 )を 用 いて 核 酸 を 染 色 した。<br />
■ メチル 化 Rockland Immunochemicals, Inc. 略 号 RKL<br />
品 名 適 用 品 番 希 望 販 売 価 格<br />
Anti Histone H3, Monomethyl Lys4 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I57 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Dimethyl Lys4 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I58 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys4 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I59 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Asym-dimethyl WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I67 ¥73,000<br />
Arg8<br />
Anti Histone H3, Sym-dimethyl<br />
WB, ChIP 600-401-I68 ¥73,000<br />
Arg8<br />
Anti Histone H3, Monomethyl Lys9 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I69 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Dimethyl Lys9 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I70 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys9 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I71 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Asym-dimethyl WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I77 ¥73,000<br />
Arg17<br />
Anti Histone H3, Monomethyl Lys18 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I78 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Dimethyl Lys18 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I79 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys18 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I80 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Sym-dimethyl WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I85 ¥73,000<br />
Arg2, Dimethyl Lys4<br />
Anti Histone H3, Monomethyl Lys36 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I86 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Dimethyl Lys36 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I87 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Dimethyl Lys37 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I91 ¥66,000<br />
Anti Histone H3, Monomethyl Lys56 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I93 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys56 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I94 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys79 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I95 ¥73,000<br />
Anti Histone H4, Monomethyl Arg3 * WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I97 ¥73,000<br />
Anti Histone H4, Monomethyl Lys20 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-J01 ¥73,000<br />
Anti Histone H4, Dimethyl Lys20 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-J02 ¥73,000<br />
■ アセチル 化 Rockland Immunochemicals, Inc. 略 号 RKL<br />
品 名 適 用 品 番 希 望 販 売 価 格<br />
Anti Histone H3, acetyl Lys4 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I60 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, acetyl Lys9 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I72 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, acetyl Lys9/Lys14 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I73 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, acetyl Lys18 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I81 ¥66,000<br />
Anti Histone H4, phospho Ser1 * WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I96 ¥73,000<br />
Anti Histone H4, acetyl Lys5 * WB, IHC, ChIP 600-401-I98 ¥73,000<br />
Anti Histone H4, acetyl Lys8 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I99 ¥73,000<br />
■ 二 重 修 飾 Rockland Immunochemicals, Inc. 略 号 RKL<br />
品 名 適 用 品 番 希 望 販 売 価 格<br />
Anti Histone H3, Dimethyl Lys4, WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I55 ¥73,000<br />
phospho Thr3<br />
Anti Histone H3, acetyl Lys4, WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I56 ¥66,000<br />
phospho Thr3<br />
Anti Histone H3, Monomethyl Lys4, WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I61 ¥73,000<br />
phospho Thr6<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys4, WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I62 ¥73,000<br />
phospho Thr6<br />
Anti Histone H3, phospho Thr6, WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I64 ¥73,000<br />
Monomethyl Lys9<br />
Anti Histone H3, phospho Thr6, WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I65 ¥73,000<br />
Dimethyl Lys9<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys9, WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I66 ¥73,000<br />
phospho Thr6<br />
Anti Histone H3, Trimethyl Lys27,<br />
phospho Ser28<br />
WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I84 ¥73,000<br />
■リン 酸 化 Rockland Immunochemicals, Inc. 略 号 RKL<br />
品 名 適 用 品 番 希 望 販 売 価 格<br />
Anti Histone H3, phospho Thr6 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I63 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, phospho Thr11/ WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I75 ¥73,000<br />
Ser10<br />
Anti Histone H3, phospho Thr11 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I76 ¥73,000<br />
Anti Histone H3, phospho Ser28 WB, IHC, IF, ChIP 600-401-I83 ¥73,000<br />
!<br />
上 記 商 品 は 全 て 免 疫 動 物 がRabbit、 包 装 50b、 貯 蔵 温 度 は−20℃です。 交 差 種 はHU, MS, RAT, CHK, Caenorhabditis elegans, XEN, Drosophila, Plant(*の 商 品 の 交 差 種 はHU, MS, RAT)です。<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 29
新 規 抗 体 商 品 のご 案 内<br />
ここに 掲 載 しております 商 品 はごく 一 部 です。コスモ・バイオホームページ 上 “ 商 品 検 索 ”をご 利 用 ください。<br />
BRAF V600E 突 然 変 異 特 異 抗 体<br />
研 究 用<br />
癌 で 高 頻 度 に 変 異 が 認 められるBRAFのV600E 変 異 を 特 異 的 に 検 出<br />
セリン/スレオニンキナーゼであるB-raf(BRAF)は、Rafファミリー<br />
のメンバーです。BRAFは、 細 胞 シグナルを 調 節 する 役 割 を 持 ち、 多 く<br />
のヒトの 癌 において 変 異 が 認 められます。BRAF の V600E 変 異 は、<br />
BRAFの 変 異 の 中 でも 大 多 数 を 占 め、メラノーマ、 甲 状 腺 乳 頭 癌 、 多<br />
形 黄 色 星 状 細 胞 腫 、ランゲルハンス 細 胞 組 織 球 症 、 境 界 型 卵 巣 癌 、 神<br />
経 節 膠 腫 、 結 腸 直 腸 癌 、 毛 様 細 胞 性 星 状 細 胞 腫 で 検 出 されています。<br />
近 年 、 多 くの 癌 ( 結 腸 直 腸 癌 、 甲 状 腺 癌 、 脳 腫 瘍 、 非 ホジキンリンパ<br />
腫 等 )に 対 する 診 断 、 予 後 、 患 者 の 予 知 及 び 治 療 のために、V600E 変<br />
異 をテストできるアプリケーションが 研 究 されています。 癌 における<br />
このような 変 異 検 出 の 必 要 性 に 対 応 するため、Spring Bioscience<br />
社 が、BRAF V600E 突 然 変 異 特 異 抗 体 を 開 発 しました。これらの 商<br />
品 は、BRAF の 変 異 を 特 異 的 に 検 出 できるIHC 抗 体 として、 商 業 ベー<br />
スで 始 めてバリデートされたものです。<br />
図 1<br />
図 2 本 商 品 で 染 色 したヒト 結 腸 癌 のV600E 変 異<br />
【ご 注 意 】<br />
スプリング バイオサイエンス 社 では、Ventana Discovery XT 全 自 動 染 色 システム 用 に 最 適 化 したプロトコー<br />
ルにて 本 抗 体 による 染 色 結 果 が 得 られておりますが、その 他 システム 用 には 本 抗 体 を 最 適 化 しておりません。<br />
前 処 理 及 び 脱 パラフィン 操 作 の 条 件 に 敏 感 な 抗 体 であるため、 他 のシステムまたはプロトコールでは 結 果 が<br />
得 られない 可 能 性 がありますので、あらかじめご 了 承 のうえ、お 買 い 求 めください。<br />
Spring Bioscience 略 号 SBS<br />
品 名 交 差 種 適 用 免 疫 動 物 (クローン) 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Anti BRAF V600E Human WB, IHC(p) Mouse(VE1) E19290 0.1 F ¥88,000 4<br />
E19292 0.5 F ¥220,000 4<br />
E19294 1 F ご 照 会 4<br />
関 連 商 品<br />
BRAF V600E 抗 体 の 希 釈 には、Spring Bioscience 社 Antibody Diluent Vの 使 用 をおすすめしています。<br />
Spring Bioscience 略 号 SBS<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Antibody Diluent V ADV-060 60 F ¥5,000 4<br />
ADV-125 125 F ¥10,000 4<br />
BRD4 抗 体<br />
エピジェネ 研 究 用 抗 体<br />
ブロモドメインタンパク 質 4(BRD4;Bromodomain-containing<br />
protein 4)は、クロマチン 結 合 タンパク 質 であるブロモドメインを2<br />
つ 持 っており、アセチル 化 リジンと 特 異 的 に 相 互 作 用 します。BRD4<br />
は、クロマチンアダプターであり、アセチル 化 されたクロマチンと 結 合<br />
することが 知 られています。もともとは、 有 糸 分 裂 染 色 体 と 結 合 する<br />
ことから、MCAP( 有 糸 分 裂 染 色 体 結 合 タンパク 質 )として 認 識 されて<br />
いました。BRD4は、Mediator 複 合 体 やP-TEFb 複 合 体 等 のいくつか<br />
の 転 写 複 合 体 とも 結 合 し、 転 写 コファクターとして 機 能 すると 考 えら<br />
れています。<br />
図 2 免 疫 組 織 化 学 によるヒト・マウスBRD4の 検 出<br />
サンプル:ヒト 乳 癌 ( 左 ) 及 びマウス 扁 平 上 皮 癌 ( 右 )のFFPE 切 片<br />
抗 体 :BRD4 抗 体 ( 品 番 :A301-985A)<br />
検 出 : 免 疫 染 色 用 アクセサリーキット( 品 番 :IHC-101)によるDAB 染 色<br />
図 1 ウェスタンブロット(A) 及 び 免 疫 沈 降 (B)によ<br />
るヒトBRD4の 検 出<br />
サンプル:HeLa 細 胞 ライセート<br />
ウェスタンブロット 抗 体 :BRD4 抗 体 ( 品 番 :A301-<br />
985A)<br />
図 3 Proximity Ligation Assay(PLA)での 使 用 例 ( 品 番 :A301-985A)<br />
青 :DAPI 核 染 色 、 緑 :ファロイジン 染 色 細 胞 質 F-アクチン、 赤 :PLA 陽 性 シグナル<br />
※PLAは 抗 体 をペアで 使 用 する 必 要 があります。ペアとしてPLAに 使 用 できる 抗 体 については、PLA 商 品 情 報<br />
(http://www.cosmobio.co.jp/product/antibody/antibody/bet_20120824.asp?entry_id=9750)<br />
をご 参 照 ください。<br />
免 疫 沈 降 抗 体 :BRD4 抗 体 ( 品 番 :A301-985A) 及<br />
びBL5483(BRD4の 上 流 エピトープを 認 識 する)<br />
検 出 : 化 学 発 光<br />
Bethyl Laboratories, Inc. 略 号 BET<br />
品 名 交 差 種 免 疫 動 物 適 用 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
Anti BRD4 Human Rabbit WB, IP, PLA, IHC, IF A301-985A 0.02 C(0.1 F at 0.2 C/F) ¥56,000 4<br />
Anti BRD4 Human, Mouse Rabbit IHC(P), IF IHC-00396 0.1 F ¥72,000 4<br />
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Cosmo Bio News No.98<br />
http://www.cosmobio.co.jp
新 規 ELISA 商 品 のご 案 内<br />
3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
PAD 活 性 アッセイキット<br />
多 発 性 硬 化 症 、 関 節 リウマチ 等 の 研 究 に<br />
本 商 品 は、 細 胞 または 組 織 ライセート 中 のPAD 酵 素 (ペプチジルア<br />
ルギニンデイミナーゼ:タンパク 質 中 のアルギニン 残 基 を 脱 イミノ 化<br />
してシトルリンに 変 換 する 酵 素 )の 活 性 を 測 定 するためのELISAキット<br />
です。 抗 脱 イミノ 化 アルギニンモノクローナル 抗 体 を 用 いて 測 定 しま<br />
す。リコンビナントPAD 酵 素 と 組 み 合 わせて 使 用 することで、PAD 阻<br />
害 分 析 を 行 うこともできます。<br />
構 成 内 容<br />
●アルギニンを 含 むペプチドでコートした96ウェルELISAプレート<br />
( 各 ストリップ 中 の 最 後 のウェルは、ポジティブコントロールとして<br />
脱 イミノ 化 されたアルギニンを 含 むペプチドでコートされています)<br />
●マウスPAD 酵 素 (スタンダード)<br />
● 脱 イミノ 化 バッファー<br />
●HRP 標 識 抗 脱 イミノ 化 アルギニンモノクローナル 抗 体<br />
<br />
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操 作 概 要<br />
1 事 前 に96ウェルプレートに 脱 イミノ 化 バッファーを 加 え、プレートを<br />
37℃で30 分 間 プレインキュベートします(プレートの 平 衡 化 を 行 い<br />
ま す )。<br />
2 プレート 上 の 液 を 捨 て、 氷 上 に 配 置 します( 脱 イミノ 化 バッファーも<br />
氷 上 に 配 置 します)。<br />
3 サンプルのライセートとスタンダード 用 の PAD 酵 素 を、 冷 却 した 脱<br />
イミノ 化 バッファーで 希 釈 します。<br />
4 3で 調 製 したサンプルとスタンダードを 氷 上 でプレートに 加 えます。<br />
5 プレートを75 分 間 、37℃の 加 湿 チャンバー 内 でインキュベートし<br />
ます。<br />
6 プレートを 洗 浄 バッファー(PBS+0.05%Tween-20、キットに 含 ま<br />
れません)で 洗 浄 します。<br />
7 HRP 標 識 抗 脱 イミノ 化 アルギニンモノクローナル 抗 体 を1%BSA<br />
入 りの 洗 浄 バッファーで 希 釈 し、ウェルに 分 注 します。<br />
8 プレートを37℃の 加 湿 チャンバー 内 で、1 時 間 インキュベートし<br />
ます。<br />
9 プレートを 洗 浄 バッファーで 洗 浄 します。<br />
10 TMB 基 質 (キットに 含 まれません)をウェルに 加 え、 青 色 になるまで<br />
室 温 でインキュベートします。<br />
11 2M 硫 酸 を 加 え、 反 応 を 停 止 させます。<br />
12 450nmの 吸 光 度 を 測 定 します。<br />
<br />
図 1 PAD 酵 素 活 性<br />
アルギニンを 含 むぺプチドでコートされたプレートに、 様 々な 濃 度 のヒトリコンビナントPAD 酵 素 を 添 加 した。<br />
酵 素 濃 度 の 増 加 に 伴 い、 検 出 されるシトルリンペプチドの 量 が 増 加 した。また、EDTA の 添 加 により、カルシウム<br />
イオンが 枯 渇 し、PAD 酵 素 の 活 性 が 抑 制 された。<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
図 2 組 織 ライセート 中 のPAD 活 性<br />
マウスの 各 種 組 織 中 の PAD 活 性 を、EDTA 添 加 有 (カルシウム 不 含 有 コントロール)、 無 (カルシウム 含 有 )の 条<br />
件 で 測 定 した。<br />
ModiQuest Research B.V. 略 号 MDQ<br />
品 名 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
PAD enzyme ELISA Kit MQ17.101 96 assay ¥248,000 5 6<br />
関 連 商 品<br />
リコンビナントPAD 酵 素<br />
● 単 位 の 定 義 :1ユニットは、55℃、pH7.2で、1 時 間 あたり、BAEE(ベン<br />
ゾイルL-アルギニンエチルエステル;PAD 酵 素 の 基 質 )から1hmol<br />
のN-α-ベンゾイルシトルリンエチルエステルを 生 成 する 単 位<br />
● 活 性 :PAD 活 性 アッセイキット( 品 番 :MQ-17.101)を 用 いて、シグ<br />
マアルドリッチ 社 製 のウサギ 骨 格 筋 PADの 活 性 と 比 較 して 算 出<br />
●Hisタグ:Ni-ビーズによる 精 製 済 み<br />
ModiQuest Research B.V. 略 号 MDQ<br />
品 名 種 由 来 品 番 包 装 希 望 販 売 価 格 貯 蔵<br />
PAD4 Mouse MQ16.103 2 unit ¥223,000 6<br />
図 3<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 31
新 規 ELISA 商 品 のご 案 内<br />
3 室 温 保 存 44℃ 保 存 5−20℃ 保 存 6−70℃ 保 存 7 液 体 窒 素 −196℃ 保 存<br />
セルベースELISAキット<br />
無 処 理 の 細 胞 から 直 接 定 性 分 析 ができます<br />
セルベースELISAは、 前 処 理 を 行 っていない 細 胞 から 直 接 目 的 物 質<br />
を 定 性 分 析 することができます。96ウェルプレートを 用 いるので、 目<br />
的 タンパク 質 の 活 性 化 物 質 や 阻 害 剤 等 の 影 響 の 検 討 を、 簡 便 にラー<br />
ジスケールで 分 析 できます。 細 胞 の 前 処 理 が 必 要 ないため、 目 的<br />
タンパク 質 のロスは 最 少 限 で 済 みます。<br />
下 記 12の 分 野 のキットをご 用 意 しています。<br />
●アポトーシス ● 結 合 試 験<br />
● 細 胞 接 着 、 細 胞 ジャンクション、 細 胞 骨 格<br />
● 細 胞 周 期<br />
● 酵 素<br />
● 膜<br />
● 代 謝<br />
● 血 漿 、 血 清<br />
●シグナル 伝 達<br />
● 幹 細 胞<br />
● 転 写<br />
●その 他<br />
特<br />
長<br />
●ライセートの 調 製 不 要<br />
●ターゲットタンパク 質 のロスは 最 少 限<br />
● 接 着 細 胞 と 浮 遊 細 胞 の 両 方 で 使 用 可 能<br />
●1ウェルにつき、5,000 細 胞 あれば 検 出<br />
● 得 られた 値 を 正 規 分 布 に 変 換 し、ウェル 間 比 較 分 析 が 可 能<br />
( 定 量 はできません)<br />
■ 表 1<br />
セルベースELISA<br />
サンドイッチELISA<br />
適 用 サンプル 無 処 理 の 細 胞 抗 原 を 含 む 液 体<br />
適 用 細 胞 種 浮 遊 細 胞 、 接 着 細 胞<br />
体 液 、 血 漿 、 血 清 、<br />
細 胞 培 養 上 清 、 細 胞 ライセート 等<br />
抗 原 ー 抗 体 反 応 細 胞 質 ゾル 内 試 薬 混 合 液 内<br />
検 出 方 法 比 色 分 析 比 色 分 析<br />
アプリケーション 定 性 分 析 定 量 分 析<br />
Assay Biotechnology Company Inc.<br />
略 号 ASY<br />
詳 細 はコスモ・バイオホームページ 上 の“ 商 品 検 索 ”でご 確 認 いただくか、コスモ・バイオ( 欄 外 参 照 )までお 問 い 合 わせください。<br />
(キーワード:セルベースELISA)<br />
VeriKine IFN-α Serum ELISAキット<br />
霊 長 類 のIFN-α 用 のサンドイッチELISAキット<br />
インターフェロン(IFN)α 遺 伝 子 ファミリーは、1つの 染 色 体 中 の 複<br />
数 の 異 なった 遺 伝 子 で 構 成 され、これらのタンパク 質 は、 病 原 体 に 対<br />
する 暴 露 に 応 答 してほとんどの 体 細 胞 から 生 産 、 分 泌 されます。マカ<br />
ク 属 のカニクイザルとアカゲザルは、Toll 様 受 容 体 アンタゴニストの<br />
暴 露 に 応 答 してIFN-α 遺 伝 子 サブタイプを 生 産 することが 近 年 示 さ<br />
れました (1) 。 本 キットは、 血 清 もしくは 培 地 中 のNHP IFN-αを 測 定 す<br />
るため の キットです 。<br />
新 興 感 染 症 (Emerging Infectious Disease:EID)だけでなく、<br />
自 然 免 疫 、 適 応 免 疫 、 薬 力 学 (PD)、IFNを 促 進 または 阻 害 する 分 子 の<br />
免 疫 毒 性 学 モデル 研 究 の、さらなる 進 展 が 期 待 できます。<br />
【 参 考 文 献 】<br />
(1)L. Schramm. et al. High-Throughput Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction<br />
Array for Absolute and Relative Quantification of Rhesus Macaque Types I, II and III Interferon<br />
and Their Subtypes. Journal of Interferon & Cytokine Research. 32, 407-415(2012).<br />
構 成 内 容<br />
●プレコートマイクロタイタープレート<br />
●カニクイザル・アカゲザルのIFN-αスタンダード(10,000/pg/f)<br />
●プレートシール ● 洗 浄 液 (10×)<br />
●スタンダード 希 釈 液 ●サンプルバッファー<br />
● 濃 縮 抗 体<br />
● 濃 縮 HRP 標 識<br />
● 濃 縮 希 釈 液<br />
●TMB 基 質<br />
● 停 止 溶 液<br />
特<br />
長<br />
● 高 感 度 ( 検 出 感 度 :25pg/f)<br />
● 優 れた 再 現 性 (CV
キャンペーン 情 報<br />
詳 細 はコスモ・バイオホームページ 上 “キャンペーン 情 報 ” 欄 をご 覧<br />
ください。http://www.cosmobio.co.jp/campaign<br />
■デュアルシステムズ 社 (DSB)<br />
分 子 間 相 互 作 用 キット10%OFFキャンペーン<br />
期 間 2013 年 4 月 30 日 ( 火 )〜6 月 28 日 ( 金 )<br />
酵 母 Two-hybridシステムによる 分 子 間 相 互 作 用 解 析 を 専 門 とする<br />
デュアルシステムズ 社 の 酵 母 タンパク 質 間 相 互 作 用 解 析 キットと<br />
cDNAを10%OFFでご 提 供 致 します。<br />
【 対 象 商 品 】<br />
● 膜 タンパク 質 :DUALmembraneシステム<br />
● 核 タンパク 質 :SUALhunterシステム<br />
● 細 胞 質 内 のタンパク 質 :DUALhybridシステム<br />
コスモ・バイオ 新 カタログ 紹 介<br />
コスモ・バイオより、 下 記 新 カタログを 発 刊 しました。ご 要 望<br />
がございましたらコスモ・バイオ 商 品 取 扱 代 理 店 、またはコスモ・<br />
バイオホームページ 上 カタログ 請 求 欄 よりご 請 求 ください。<br />
AAAS 発 行 Science Signalingの 日 本 語 ページの<br />
運 営 、 及 び 日 本 語 ダイジェスト 版 発 行 のお 知 らせ<br />
コスモ・バイオでは、AAAS( 米 国 科 学 振 興 協 会 )との 共 同 事<br />
業 として、 世 界 に 発 表 された、シグナル 伝 達 関 連 の 最 新 の 情 報<br />
「Science Signaling」を 毎 週 、 日 本 語 Web 版 としてお 届 けしてい<br />
ます。コスモ・バイオのホームページ(www.cosmobio.co.jp)<br />
からご 覧 いただけます。また、 年 に 数 回 、Science Signalingの 日<br />
本 語 ダイジェスト 版 を 発 行 しています。こちらも、コスモ・バイオ<br />
ホームページの“カタログ 請 求 ”よりご 請 求 いただけます。<br />
Japanese Scientists in Science 2013<br />
━ サイエンス 誌 に 載 った 日 本 人 研 究 者 ━<br />
コスモ・バイオは、AAASに 協 賛 し、AAASの<br />
日 本 での 活 動 の 一 環 として、2012 年 度 に<br />
“Science”に 論 文 が 掲 載 された 日 本 人 研 究<br />
者 ・グループをご 紹 介 する 冊 子 「2013 年 版<br />
Japanese Scientists in Science 2012 ─<br />
サイエンス 誌 に 載 った 日 本 人 研 究 者 」を 配 布 し<br />
ています。<br />
機 器 ガイド2013-2014 年 版<br />
学 会 展 示 会 出 展 のお 知 らせ<br />
コスモ・バイオでは、 下 記 の 学 会 展 示 会 に 出 展 を 予 定 しております。<br />
学 会 にご 参 加 の 折 には、ぜひお 気 軽 にブースにお 立 ち 寄 りください。<br />
普 段 は 見 過 ごしている“ 何 か”が 見 つかるかもしれませんよ……。<br />
学 会 名 日 程 会 場<br />
第 7 回 日 本 エピジェネティクス<br />
研 究 会 年 会<br />
日 本 組 織 培 養 学 会<br />
第 86 回 大 会<br />
第 102 回<br />
日 本 病 理 学 会 学 術 総 会<br />
コスモ・バイオが 取 り 扱 う 機 器 ( 器 具 を 含 む)の<br />
製 品 ガイド2013-2014 年 版 です。<br />
掲 載 内 容<br />
●ChIPアッセイや 次 世 代 シーケンス 用 サンプル 作<br />
製 にも 活 躍 する「バイオラプター」<br />
●SDS-PAGE 後 のゲルから 質 量 分 析 向 けのタンパ<br />
ク 質 を 効 率 よく 抽 出 できる 電 気 溶 出 装 置 「GPR-<br />
800」<br />
● 高 性 能 、 低 価 格 、そしてスタイリッシュなデザインの「ゲル 撮 影 装 置 」<br />
●シートイルミネーション 方 式 を 採 用 した 高 解 像 度 高 速 マクロ3Dイメー<br />
ジング 装 置 、LaVision 社 「Ultramicroscope」<br />
●1 枚 用 、 最 大 5 枚 用 、 最 大 240 枚 用 (オプション 使 用 時 )の3 機 種 が 揃<br />
い、ますます 充 実 した「バーチャルスライド 作 製 装 置 」<br />
その 他 、 様 々な 研 究 目 的 に 向 けた 多 数 の 機 器 を 掲 載 しています。<br />
5 月 30 日 ( 木 )〜31 日 ( 金 ) 奈 良 県 新 公 会 堂<br />
5 月 30 日 ( 木 )〜31 日 ( 金 )<br />
6 月 6 日 ( 木 )〜8 日 ( 土 )<br />
産 業 技 術 総 合 研 究 所<br />
つくばセンター<br />
ロイトン 札 幌 、<br />
さっぽろ 芸 文 館<br />
メーカー 新 カタログ 紹 介<br />
下 記 メーカーが 新 カタログを 発 刊 しました。ご 要 望 がございまし<br />
たらコスモ・バイオ 商 品 取 扱 代 理 店 、またはコスモ・バイオホーム<br />
ページ 上 カタログ 請 求 欄 よりご 請 求 ください。<br />
サイトスケルトン 社<br />
ミニカタログ2013<br />
CYT<br />
細 胞 骨 格 関 連 の 研 究 試 薬 を 得 意 とするサイトス<br />
ケルトン 社 の2013 年 ミニカタログです。<br />
様 々な 蛍 光 で 標 識 されたチューブリン・アクチン<br />
試 薬 は、 標 識 の 手 間 がかからず、 様 々なアプリケー<br />
ションにご 利 用 いただけます。その 他 、 従 来 からの 売 れ 筋 である、 低 分 子<br />
量 Gタンパク 質 の 活 性 を 簡 単 にELISAベースで 測 定 できる「G-LISA®」 活<br />
性 測 定 キットにもご 注 目 ください。<br />
今 年 注 目 の 新 商 品 は 下 記 の2 商 品 です。<br />
1Arf1 & Arf6 G-LISA® 活 性 アッセイキット<br />
2Arf1 & Arf6 活 性 アッセイBiochem キット<br />
スプリングバイオサイエンス 社<br />
2013 年 カタログ SBS<br />
スプリングバイオサイエンス 社 は 癌 研 究 分 野 を 得 意<br />
とする、 高 品 質 の 抗 体 メーカーです。バイオマーカー<br />
となるタンパク 質 を 独 自 に 選 別 し、 組 織 中 のタンパク<br />
質 発 現 を 評 価 するのに 効 果 的 な 抗 体 を 開 発 していま<br />
す。IHCやその 他 のアプリケーションに 利 用 できる、 高 感 度 ・ 高 親 和 性 の<br />
ウサギモノクローナル 抗 体 (SPクローン)とその 技 術 力 を 用 いて 作 製 した<br />
ポリクローナル 抗 体 をぜひ 一 度 お 試 しください。<br />
お 問 い 合 わせ 先 :TEL. 03-5632-9610 FAX. 03-5632-9619 E-mail. mail@cosmobio.co.jp<br />
Cosmo Bio News No.98 33
キャンペーン 情 報<br />
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5 月 30 日 ( 木 )〜31 日 ( 金 ) 奈 良 県 新 公 会 堂<br />
5 月 30 日 ( 木 )〜31 日 ( 金 )<br />
6 月 6 日 ( 木 )〜8 日 ( 土 )<br />
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1Arf1 & Arf6 G-LISA® 活 性 アッセイキット<br />
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スプリングバイオサイエンス 社<br />
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Cosmo Bio News No.98 33
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