Rapporto annuale 2007 - Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario ...
Rapporto annuale 2007 - Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario ...
Rapporto annuale 2007 - Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario ...
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
IRFMN<br />
raccolto un numero importante <strong>di</strong> campioni ematici <strong>di</strong> soggetti anziani ultrasettantenni. In questi<br />
campioni si sta effettuando un’analisi genetica molto accurata per identificare possibili<br />
alterazioni geniche associabili alla longevità e/o a patologie legate all’invecchiamento con<br />
particolare riferimento alle demenze. L’obiettivo è <strong>di</strong> incrociare il genotipo/fenotipo con aspetti<br />
ambientali, lo stile <strong>di</strong> vita, la <strong>di</strong>eta, le con<strong>di</strong>zioni socio economiche e le patologie più <strong>di</strong>ffuse<br />
nell’età avanzata, alla ricerca <strong>di</strong> fattori <strong>di</strong> rischio e protettivi. Ad oggi i soggetti sono stati<br />
genotipizzati per ApoE, il cui allele E4 è un fattore <strong>di</strong> rischio per le demenze ma anche per altre<br />
patologie e per sirt-1, un gene che co<strong>di</strong>fica per un componente della famiglia delle sirtuine<br />
associato alla longevità in <strong>di</strong>versi modelli sperimentali. Sono emerse in<strong>di</strong>cazioni interessanti ma<br />
è necessario incrociare i dati ottenuti con i <strong>di</strong>versi parametri a <strong>di</strong>sposizione per elaborare delle<br />
ipotesi utili per futuri approfon<strong>di</strong>menti.<br />
Malattie da prioni: stu<strong>di</strong> in vitro<br />
Le encefalopatie spongiformi (ES) sono malattie neurodegenerative <strong>di</strong> origine spora<strong>di</strong>ca o<br />
genetica ma anche trasmissibili, hanno manifestazioni cliniche e neuropatologiche <strong>di</strong>fferenti ma<br />
invariabilmente caratterizzate dall’accumulo cerebrale <strong>di</strong> una forma alterata della proteina prion<br />
(PrPsc). ES sono malattie rare ma la possibile trasmissione <strong>di</strong> una forma bovina della malattia<br />
(BSE) all'uomo ha creato grande allarme sanitario prima in Inghilterra e poi in tutta Europa.<br />
Come è noto PrPsc oltre ad essere coinvolta nella patogenesi della malattia è anche componente<br />
essenziale dell’agente infettivo. Nel laboratorio si sono sviluppati <strong>di</strong>versi progetti per<br />
comprendere il meccanismo molecolare che associa la presenza della PrPsc allo sviluppo del<br />
processo neurodegenerativo. Sono stati stu<strong>di</strong>ati gli effetti biologici <strong>di</strong> pepti<strong>di</strong> omologhi a larghe<br />
porzioni della proteina prion e in particolare del peptide PrP 82-146 sintetizzato originariamente<br />
nel Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica e Chimica delle Proteine. Questo peptide, omologo ad un<br />
frammento <strong>di</strong> PrP ritrovato nei depositi cerebrali in pazienti con ES, si struttura in foglietti beta<br />
e ha attività neurotossica. Oltre agli effetti indotti dall’applicazione <strong>di</strong> pepti<strong>di</strong> alle cellule si sono<br />
indagati i meccanismi intracellulari potenzialmente coinvolti nei fenomeni neurodegenerativi<br />
associati alle ES <strong>di</strong> produrre PrP nelle forme native o con mutazioni associate alle forme<br />
familiari <strong>di</strong> ES<br />
Malattie da prioni: stu<strong>di</strong> in vivo<br />
Da qualche anno il laboratorio è dotato delle strutture necessarie per lo scrapie sperimentale, gli<br />
animali da esperimento, topi e criceti, sono inoculati con omogenato <strong>di</strong> tessuto cerebrale infetto.<br />
I criceti, dopo l’inoculo cerebrale, sviluppano la malattia entro 60-70 giorni e muoiono entro 90-<br />
100 giorni. L’analisi istopatologica dell’encefalo <strong>di</strong> questi animali mette in evidenza i depositi<br />
<strong>di</strong> PrPsc, il danno neuronale, la gliosi e la caratteristica spongiosi a livello corticale e talamico.<br />
L’attività anti-amiloidogenica delle tetracicline è stata testata anche in questo contesto<br />
sperimentale. Dopo gli esperimenti ex.vivo in cui l’inoculo veniva trattato con tetracicline prima<br />
<strong>di</strong> essere inoculato, in collaborazione con il Laboratorio <strong>di</strong> Biochimica e Chimica delle Proteine<br />
sono stati trattati criceti inoculati con doxiciclina intramuscolo ottenendo degli effetti sulla<br />
sopravvivenza degli animali. Nello stesso modello sperimentale altre molecole sono attualmente<br />
allo stu<strong>di</strong>o per verificarne la capacità curativa.<br />
Oltre allo scrapie sperimentale nel laboratorio sono presenti <strong>di</strong>verse linee transgeniche<br />
sviluppate dal dr. Chiesa che esprimono sequenze mutate <strong>di</strong> proteina prion associate a forme<br />
familiari <strong>di</strong> TSE. Questi animali, nella forma omozigote, sviluppano con <strong>di</strong>versi gra<strong>di</strong> <strong>di</strong> gravità<br />
aspetti clinici riconducibili alle patologie a cui le mutazioni sono associate. Da un punto <strong>di</strong> vista<br />
neuropatologico alcune linee presentano un danno cerebellare molto evidente a carico delle<br />
cellule granulari, mentre nelle altre aree cerebrali non ci sono evidenti alterazioni. Nel tessuto<br />
cerebrale è presente una forma <strong>di</strong> proteina scrapie parzialmente resistente alla <strong>di</strong>gestione con<br />
proteasi K e insolubile, con caratteristiche simili a PrPsc. Le caratteristiche <strong>di</strong> queste forme<br />
proteiche sono interme<strong>di</strong>e tra la forma patologica e quella fisiologica noralmente presente nel<br />
tessuto cerebrale.<br />
95<br />
RAPPORTO ATTIVITA’ <strong>2007</strong>