Rapporto annuale 2007 - Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario ...

IRFMN
quelli ottenuti con HemoCue 201, uno strumento portatile automatizzato, che determina
l’albumina mediante metodica turbidimetrica altamente specifica.
Lo studio di comparazione ha indicato che il metodo nefelometrico sottostima i risultati rispetto
al metodo cromatografico, in particolare per livelli di escrezione di albumina inferiori a 50
g/min. L’analisi dei dati ha dimostrato che vi è un’alta correlazione tra i valori misurati con la
metodica nefelometrica convenzionale e con HemoCue 201. Analizzando i dati con il metodo di
Bland e Altman si è potuto stabilire che l’accordo tra i risultati ottenuti con le due metodiche
sussisteva in tutto l’intervallo di linearità dello strumento HemoCue 201 g/mL), che la
differenza media delle determinazioni effettuate con le due metodiche era di soli 3.2g/mL
anche se si poteva evidenziare una tendenza alla sovrastima dei valori di albumina da parte di
Hemocue 201 all’aumentare delle concentrazioni.
Analisi di Ficoll con metodica HPLC per la determinazione della clearance
frazionata in modelli animali
La valutazione della clearance frazionata di Ficoll derivatizzato con FITC è uno strumento
attendibile ed ottimale per determinare le proprietà di selettività della barriera capillare
glomerulare in modelli animali. A tal scopo, abbiamo utilizzato per la misurazione di FITC-
Ficoll una metodica in cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) sviluppata in
laboratorio.
La tecnica cromatografica si è dimostrata semplice ed affidabile e prevede l’iniezione di soli 5
l di matrice biologica (plasma o urina) in una colonna ad esclusione sterica TSK G4000
PWXL seguita dalla quantificazione di FITC-Ficoll mediante rivelatore a fluorescenza.
L’affidabilità, la precisione e la rapidità della metodica cromatografica utilizzata per la
determinazione della clearance frazionata di FITC-Ficoll permette di valutare in modo accurato
la clearance frazionata di FITC-Ficoll per raggi fino a circa 80 Angstrom.
La velocità di manipolazione del campione e la specificità del dosaggio hanno permesso il suo
utilizzo in uno studio condotto in ratti sottoposti a riduzione chirurgica della massa renale per
determinare l’effetto di statine a diverse dosi e in associazione con ACE inibitori
sull’emodinamica renale, sulle proprietà di permselettività della parete capillare glomerulare e
sulla funzione tubulare.
I risultati ottenuti hanno dimostrato che il metodo cromatografico sviluppato può essere
considerato come la tecnica di riferimento per le determinazioni di routine delle proprietà di
selettività della barriera capillare glomerulare in modelli animali.
Applicabilità di 13 modelli di predizione della funzione renale (GFR) in
pazienti con diabete di tipo 2
Circa il 25% - 40% dei pazienti diabetici è affetta da nefropatia diabetica ed il diabete stesso
rappresenta la maggiore causa di insufficienza renale cronica. La valutazione velocità di
filtrazione glomerulare riveste quindi un’importanza cruciale in questi pazienti, tuttavia la
misurazione del GFR determinando la clearance renale dell’inulina o quella plasmatica di mezzi
di contrasto risulta essere laboriosa e difficile da attuare nella pratica clinica. Anche la clearance
della creatinina non rappresenta uno strumento affidabile a causa sia del metabolismo variabile
che della secrezione tubulare di tale sostanza endogena. Per evitare questi problemi, come
alternativa sono state sviluppate numerose formule per stimare la funzione renale utilizzando
semplici parametri biochimici o dati demografici e antropometrici. Nonostante l’utilizzo diffuso
di queste formule, non è stata ancora valutata la bontà di tali modelli nello stimare la funzione
renale in pazienti con diabete di tipo 2. In 279 pazienti normoalbuminurici e in 134 soggetti
microalbuminurici arruolati nello studio BENEDICT e nello studio DEMAND abbiamo
comparato con il nostro standard di riferimento - la misura della clearance plasmatica dello
ioexolo - i valori ottenuti con 13 equazioni predittive di GFR.
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RAPPORTO ATTIVITA’ 2007