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Borse di studio
scono sul processo di morte cellulare programmata. Esperimenti in vitro
hanno dimostrato che le vie di trasduzione del segnale mediate dagli endocannabinoidi
svolgono un ruolo protettivo sui neuroni in una serie di eventi cellulari
dannosi quali l’eccitotossicità, l’ischemia, lo stress ossidativo e la neuroinfiammazione.
Molti degli effetti protettivi sembrano essere mediati dall’attivazione
del recettore CB1, sebbene studi recenti vedano coinvolto anche il recettore
CB2. Poiché molti sono i dati riguardanti il ruolo dei recettori per gli
endocannabinoidi e delle cellule gliali dopo danno del SNC e, al contrario,
pochi quelli riguardanti la loro implicazione nei processi di morte cellulare, lo
scopo del presente lavoro è stato quello di analizzare l’espressione dei recettori
CB1-CB2 e l’attivazione della glia (microglia e astrociti) nei fenomeni di
neuroprotezione/neurodegenerazione dopo danno focale del sistema nervoso
centrale (emicerebellectomia).
Materiali e metodi – È stato utilizzato come paradigma sperimentale l’emicerebellectomia
chirurgica [Florenzano et al. (2002) Neuroscience 115(2): 425-
434; Viscomi et al. (2004) Neuroscience 123: 393-404] per indagare l’espressione
dei recettori CB1 e CB2 e gli effetti relativi alla loro modulazione nella
cascata di eventi che conduce alla degenerazione neuronale dei nuclei precerebellari
controlaterali all’area lesionata. A tale scopo, sono state utilizzate
delle sostanze farmacologiche note per essere, selettivamente, agoniste ed
antagoniste dell’attività dei recettori CB1 e CB2. Tali farmaci sono rispettivamente:
a) ACEA (agonista) e SR1 (antagonista), per CB1; b) JWH-015 (agonista)
e SR2 (antagonista), per CB2.
Dopo aver effettuato sugli animali un’emicerebellectomia chirurgica, gli
stessi sono stati suddivisi in 5 gruppi sperimentali secondo il trattamento cronico
effettuato: il primo gruppo è stato trattato con una soluzione salina
(HCb-Sal); il secondo gruppo con l’agonista del recettore CB1, ACEA (HCb-
ACEA); il terzo gruppo con l’antagonista del recettore CB1, SR1 (Hcb-SR1); il
quarto gruppo con l’agonista del recettore CB2, JWH-015 (Hcb-JWH); il
quinto gruppo con l’antagonista del recettore CB2, SR2 (Hcb-SR2). A 1, 3, 5 e
7 giorni dalla lesione, gli animali dei vari gruppi sono stati sottoposti a test
neurologico (NSS) per verificarne il recupero funzionale. Ad una settimana di
trattamento cronico con i farmaci, gli animali sono stati sacrificati e,
mediante le tecniche di immmunoistochimica, Western blotting e PCR quantitativa,
sono stati analizzati i nuclei precerebellari dell’oliva inferiore e dei
nuclei pontini controlaterali alla lesione.
Risultati – I risultati ottenuti hanno evidenziato, innanzitutto, che nel sistema
di neurodegenerazione utilizzato, l’espressione del recettore CB1, localizzata
nelle cellule neuronali in condizioni di controllo, rimaneva invariata anche
dopo la lesione. Al contrario, l’espressione del recettore CB2, completamente
assente in condizioni fisiologiche, veniva indotta dopo il danno assonale
senza trattamento farmacologico (Hcb-Sal), aumentava trattando gli animali
lesionati con l’agonista del recettore, JWH-015 (Hcb-JWH), e diminuiva, al
contrario, dopo trattamento con l’antagonista selettivo SR2 (Hcb-SR2). La
maggiore espressione del recettore CB2 nei neuroni precerebellari, inoltre, si
associava non solo con una maggiore sopravvivenza delle cellule neuronali al
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