0-TESTO COMPLETO.pdf - Fondazione Santa Lucia

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Borse di studio mento di questo parametro nei neuroni di controllo, che andava da valori più bassi a 5-6 DIV (20.08 + 11.3 pA/pF), a valori intermedi a 7-8 (28.23 + 12.4 pA/pF) e 9-10 DIV (31.73 + 16.4 pA/pF), fino a raggiungere valori massimi a 11-12 DIV (34.96 + 15.7 pA/pF). Tale incremento è stato osservato anche nelle cellule esposte per 48 ore alla microgravità simulata, ma la densità di corrente stimata non era mai paragonabile a quella delle cellule di controllo (Microgravità 5-6 DIV: 6.53 + 4.26 pA/pF, 7-8 DIV: 13.67 + 9.3 pA/pF, 9-10 DIV: 14.79 + 10.5 pA/pF, 11-12 DIV: 18.28 + 11.5 pA/pF). In questo studio infatti abbiamo riscontrato differenze significative tra le due popolazioni neuronali, ad ogni giorno di registrazione (p
Sezione II processi metabolici e in particolare anabolici, quali aumento delle masse muscolari e della forza. L’eccesso di aminoacidi ramificati, però, può essere dannoso. Il 60% di BCAA viene metabolizzato a livello extraepatico e in particolare nel tessuto muscolare, a differenza degli altri aminoacidi che sono totalmente metabolizzati a livello epatico. Alcuni degli intermedi che si formano durante il loro catabolismo (ad esempio l’acido chetonico a catena ramificata, BKCA) ad alte concentrazioni possono affaticare il sistema renale e diventare dannosi. È stato infatti dimostrato che nei ratti la somministrazione in cronico di BCAA attraverso la dieta (con un rapporto leucina: isoleucina: valina di 2.1:1:1.2) diventa tossica se la concentrazione supera i 10g per Kg di peso corporeo [Okazaki et al. (1989) Clin Rep 23: 1863-1903]. I BCAA che non vengono utilizzati a livello muscolare vengono immessi nuovamente nel circolo ematico, grazie al quale possono raggiungere e superare la barriera ematoencefalica. È stato dimostrato che i livelli di BCAA e degli intermedi del loro catabolismo sono altamente regolati in diverse aree del cervello e un loro accumulo può portare a disfunzioni cerebrali e indurre la morte neuronale [Navarro et al. (2008) Metab Brain Dis 23: 445-455]. L’obiettivo dello studio è stato quello di verificare se il trattamento prolungato di neuroni corticali con aminoacidi ramificati fosse in grado di modificarne le proprietà elettrofisiologiche. Materiali e metodi – I dati riportati sono stati ottenuti con esperimenti eseguiti su neuroni corticali di topo C57BL/6J in coltura primaria [Carunchio et al. (2007) Epilepsia 48: 654-662]. I neuroni corticali sono stati prelevati da embrioni di topo al 15° giorno di gestazione. La corteccia è stata rimossa da ciascun embrione e incubata con tripsina (0.025%) in PBS per 10 minuti a 37°C con CO 2 5%. Dopo la dissociazione meccanica i neuroni sono stati piastrati su vetrini precedentemente trattati con Poly-L-Lisina (10 microg/ml), e conservati in incubatore alla temperatura costante di 36°C e con una percentuale di CO 2 del 5%. Per studiare le proprietà elettriche dei neuroni corticali sono state effettuate registrazioni elettrofisiologiche a temperatura ambiente a partire dall’8°giorno in coltura, utilizzando la tecnica del patch-clamp in configurazione whole-cell e in modalità current clamp. Sono state confrontate le proprietà elettrofisiologiche di neuroni in condizioni di controllo o esposti in cronico ad elevate concentrazioni di aminoacidi ramificati. Nel terreno di coltura cellulare sono stati aggiunti 200 mM di Leucina (Leu), 200 mM Isoleucina (Ile) e 200 mM Valina (Val) (in rapporto 1:1:1) [Hutson et al. (1998) J Neurochem 71: 863-874], a partire dal primo giorno in coltura (1 DIV) fino al settimo (7 DIV). I dati sono stati analizzati utilizzando il software pClamp 9 (Axon Instruments) e Origin 6.1 (OriginLab Corporation) mentre l’analisi statistica è stata effettuata con il software SPSS 11.0 (LEAD Technologies, USA). Risultati – Dall’analisi dei dati sperimentali si è potuto constatare che il potenziale di riposo non risulta modificato nei neuroni trattati per 6 giorni con i BCAA, così come non vengono alterate le proprietà passive di membrana (Resistenza, Capacità, Tau). Per valutare le proprietà attive di mem- 126 2009
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FONDAZIONE SANTA LUCIA ISTITUTO DI
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Fondazione Santa Lucia Via Ardeatin
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TEL.13 - CLINICAL AND LABORATORY CR
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TEL.13 - Clinical and laboratory cr
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TEL.14 - MANIPULATION OF SEROTONIN
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UMD.1 - ANTI-STAPHYLOCOCCAL ACTIVIT
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UMD.1 - Anti-staphylococcal activit
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UMD.1 - Anti-staphylococcal activit
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UNITE.1 - IL SISTEMA ENDOCANNABINOI
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UNITE.1 - Il sistema endocannabinoi
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Finito di stampare nel mese di sett
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