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Borse di studio
trollo del movimento. Tuttavia, nonostante i chiari deficit motori presenti
in questi topi, non sono state riscontrate alterazioni nella distribuzione e
nella quantità relativa del trasportatore della dopamina (DAT), né nei siti
di legame dei recettori dopaminergici D1 e D2 [Balcioglu et al. (2007) J
Neurochem 102(3): 783-788].
Obiettivi e metodi – Alla luce di queste evidenze, per la discordanza tra fenotipo
motorio e apparente normalità dei recettori dopaminergici, l’obiettivo di
questo progetto è stato quello di indagare ulteriormente lo stato funzionale
dei recettori D1 e D2 striatali in condizioni di stimolazione fasica. A tal scopo,
sono state studiate le funzioni in vitro ed in vivo dei recettori dopaminergici
D1 e D2 nei topi transgenici esprimenti la proteina umana mutata DYT1 (topi
hMT), ritenuti questi un valido modello murino per studiare questa patologia
genetica [Sharma et al. (2005) J Neurosci 25: 5351-5355; Zhaoet al. (2008)
Exp Neurol 210: 719-730].
Inalterata funzionalità del recettore D2 presinaptico – Nel modello animale
caratterizzato dall’espressione della proteina umana mutata DYT1 è stata
studiata la funzionalità del recettore dopaminergico D2 (D2R), indagando la
sua abilità nel controllo della trasmissione dopaminergica, del firing e della
sintesi di dopamina (DA). I test comportamentali eseguiti per studiare la
risposta motoria all’agonista D2R quinpirolo hanno dimostrato nei topi
mutanti una riduzione dell’attività locomotoria comparabile a quella del
gruppo di controllo (hWT). Similmente, gli studi di elettrofisiologia hanno
mostrato un intatto funzionamento del D2R in entrambi i genotipi. Infine,
esperimenti di biochimica, tesi ad indagare la funzionalità D2R nel controllo
della sintesi di DA, hanno rivelato un aumento comparabile tra topi
mutanti e controlli nella fosforilazione della Tirosina Idrossilasi (TH)
indotta dall’antagonista aloperidolo. Tali risultati, in accordo con i dati di
elettrofisiologia e comportamento, dimostrano chiaramente le inalterate
proprietà autorecettoriali nei topi hMT.
Deficitarie funzioni del recettore D2 postsinaptico nei topi hMT – Successivamente,
è stata indagata la funzionalità del D2R postsinaptico striatale, riscontrando
alterazioni nei topi hMT. Esperimenti di elettrofisiologia hanno rivelato
in tali topi l’assenza di Depressione a Lungo Termine (LTD), anche in
seguito a pretrattamento con l’agonista D2R quinpirolo. Studi di comportamento,
volti ad indagare la risposta catalettica indotta dall’aloperidolo attraverso
il blocco del D2R postsinaptico, hanno mostrato una risposta ridotta nei
topi hMT, rispetto ai controlli hWT.
Considerando il ruolo del D2R nel comportamento motorio, è stata inoltre
analizzata la locomozione spontanea di questi topi che effettivamente si
mostravano leggermente meno attivi rispetto ai controlli.
Infine è stata indagata la funzionalità del recettore D1 (D1R), senza però
rilevare alcuna significativa differenza tra i genotipi né nel comportamento
motorio D1R-dipendente, né nei livelli di fosforilazione di GluR1 sulla Ser845
nello striato.
Ridotta efficacia del recettore D2 postsinaptico nel legame con le proteine Gi/Go
nei topi hMT – Per chiarire le basi molecolari della ridotta attività postsinap-
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