Solo testo.pdf - Fondazione Santa Lucia

Neuroscienze sperimentali
finata caratterizzazione della struttura primaria e delle modificazioni post-traduzionali
delle proteine analizzate è operata mediante analisi per frammentazione
dei peptidi proteolitici. mediante nano cromatografia liquida accoppiata
ad analizzatori ibridi ESI-Q-TOF (Q-TOF Ultima, Micromass-Waters) e analisi
dei decadimenti post sorgente (PSD) su strumenti MALDI-TOF-MS (Reflex IV,
Bruker-Daltonik). Nella analisi di metaboliti questo gruppo di studio si dedica
sia alla investigazione di famiglie di metaboliti quali composti solforati e acidi
grassi poli-insaturi, che alle analisi multivariate di metabonomica. Queste
ultime vengono svolte su di una piattaforma tecnologica operante su di uno
strumento di massa ad alta risoluzione (ibrido TOF) accoppiato ad un sistema
microHPLC così da ottimizzare la sensibilità delle indagini.
Attualmente abbiamo sviluppato una metodica che permette lo studio di
circa 2000 differenti composti estratti da siero e la ricostruzione di analisi
multivariate per la discriminazione dei gruppi clinici. Inoltre esperimenti di
LC-MS/MS operanti in modalità MRM su strumenti a triplo quadrupolo e
SIM GC-MS permetteranno di estendere queste indagini ad una larga gamma
di composti. La caratterizzazione strutturale dei nuovi potenziali marcatori
verrà operata mediante ricostruzione dei profili di frammentazione su banche
dati di riferimento (NIST/EPA/NIH 280.000 composti, Wiley 360.000 composti).
Queste indagini verranno complementate dalla verifica delle ipotesi
molecolari ottenute mediante l’impiego di modelli cellulari in-vitro ed ex-vivo.
Questi ultimi derivanti da modelli murini (es. APPsw) transgenici e non disponibili
per le sindromi neurodegenerative di interesse. Linee cellulari provenienti
da tumori solidi di derivazione neuroectodermica quali neuroblastoma
(SH-5YSY) saranno particolarmente impiegate sia per la valutazione delle
ipotesi molecolari derivanti dall’indagine clinica che per lo sviluppo di modelli
farmacologici delle sindromi investigate. Queste indagini vedranno il pieno
impiego di tutte le tecnologie di proteomica e metabonomica precedentemente
discusse.
Per la raccolta dei campioni clinici il gruppo si avvarrà oltre che dei
reparti di degenza della Fondazione Santa Lucia, dei centri di assistenza sanitaria
con i quali sono già attivi progetti in collaborazione:
– Clinica Neurologica (Direttore Prof. G. Bernardi), Policlinico di Tor Vergata,
Dipartimento di Neuroscienze dell’Università di Tor Vergata, Roma
– Dipartimento di Medicina di Laboratorio (Direttore Prof. G. Federici),
Policlinico di Tor Vergata, Università di Tor Vergata, Roma,
– Clinica Neurologica (Direttore Prof. D. Gambi), Ospedale Universitario
SS. Annunziata, Università “ G. D’Annunzio ”, Chieti.
C.2.19 – Patologie neurodegenerative e recettori purinergici
(Cinzia Volonté)
Descrizione
Diverse proprietà dell’ATP lo rendono una molecola ideale per trasmettere
segnali cellula-cellula: le piccole dimensioni, la capacità di diffondere
2006 483