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Sezione III: Linea di ricerca corrente C
fosforilazioni intracellulari e sull’attività di release a valle. La ricerca viene
integrata con indagini immuno-istochimiche, tese a convalidare la presenza
dei recettori specifici per NT (in particolare il sottotipo NTS1, sensibile a
SR48692 e SR142948), e la loro distribuzione sia in termini di “ regionalizzazione
” (predominanza nei settori laterodorsali del GP) che di “ co-localizzazione
” (con parvalbumina e/o CHAT).
Dati preliminari suggeriscono che NT (ed il frammento attivo 8-13) producono
una ampia inibizione delle calciche ad alta soglia (media -23%),
senza desensitizzazione e con meccanismo relativamente voltaggio-indipendente.
L’effetto è abolito dalla pre-incubazione in basse dosi micromolari di
NEM, a suggerire il coinvolgimento delle G-proteine, e dalla conotossina
GVIA, a conferma che la modulazione riguarda la subunità alfa del canale
tipo N.
La dose-risposta dell’effetto osservato ci dà una IC 50 intorno ai 900 nM, se
si considera in toto la popolazione delle cellule GP registrate. Quando si cerca
di contestualizzare la modulazione al sottotipo esaminato, si verifica che l’inibizione
NT-mediata sembra prevalere in neuroni medio-piccoli, parvalbumino-negativi.
A prescindere dal fenotipo in termini isochimici o morfologici,
va sottolineato che l’azione di NT occlude (non è additiva) con quella dell’agonista
GABA-b baclofen (Stefani A., Spadoni F. et al.(1999) Eur J Neurosci 11:
3995-4005). In pratica, è probabile che dopamina endogena (su recettori D2,
vedi Stefani A., Spadoni F. et al. (2002b) Eur J Neurosci 15: 815-825), trasmissione
GABA-b e neurotensinergica riconoscano un target comune nel calcio
postsinaptico pallidale. Questi dati sono stati presentati a congressi internazionali
e verranno a breve sottoposti a riviste internazionali. È in corso una
più chiara disamina delle correlazioni fisio-morfologiche.
È altresì pienamente avviato lo studio relativo agli effetti della SP. Come è
noto, SP appartiene alla superfamiglia delle tachichinine, caratterizzate dalla
sequenza Phe-X-Gly-Leu-Met-NH2 (e includenti anche neurokinin A and neuromedin
K) (Warden M.K., Young W.S. (1988) J Comp Neurology 272: 90-113).
Recettori specifici per SP (in particolare NK1) sono largamente espressi tanto
nelle aree cosiddette limbiche (amigdala estesa) quanto nei gangli della base
(caudato-putamen e probabilmente substantia nigra). Che alterazioni della SP
endogena possano interferire con i programmi motori (e non solo sulle emozioni
e sull’ansia) è sospettato da tempo (si considerino ad esempio gli effetti
di agonisti NK in topi dopo intossicazione da MPTP; Chen L.W., Yung K.K.,
Chan Y.S. (2004) Curr Drug Targets 5: 197-206).
Poiché, ad oggi, non è mai stato investigato in che misura il release di SP
in striato, GP o nigra sia modificato dopo reserpinizzazione o 6-OHDA,
abbiamo inteso affrontare questo tema specifico, nuovamente mettendo in
campo approccio elettrofisiologico combinato con immunoistochimica. Dati
preliminari indicano che fibre SP innervano il GP di ratto, con prevalenza per
i settori medio-caudali; che, come rilevato dal microscopio confocale, i recettori
NK1 abbondano nella popolazione parv-positiva; che la microscopia elettronica
ne conferma la localizzazione sia somatica che dendritica (soprattutto
in tratti che ricevono input asimmetrici, ergo eccitatori). Altri risultati suggeriscono,
infine, che a 48 ore dalla lesione con 6-OHDA, si assiste a drammati-
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