Solo testo.pdf - Fondazione Santa Lucia

Sezione III: Linea di ricerca corrente C
sistematica che ci possa condurre ad individuare le specifiche variazioni delle
differenti isoforme di PDE prodotte dalla lesione della sostanza nera nei gangli
della base. La PDE1-B, -A e C, la PDE2, la PDE4, le PDE5 e la PDE10
saranno evidenziate con metodo immunoistochimico usando anticorpi monoclonali
nell’animale di controllo e dopo lesione della sostanza nera.
Inoltre con il metodo della doppia fluorescenza sarà determinata la colocalizzazione
delle differenti isoforme di PDE nelle popolazioni neuronali specifiche
che caratterizzano i circuiti striatali. Questo studio può portare ad una
migliore comprensione della fisiopatologia e può aprire nuove prospettive
terapeutiche dei sintomi parkinsoniani.
C.2.16 – Analisi della regolazione post-trascrizionale della espressione
genica nel differenziamento neuronale (Claudio Sette)
La regolazione post-trascrizionale della espressione genica assume una
rilevanza particolare in sistemi cellulari complessi quali i neuroni. Queste cellule
presentano un pattern di splicing alternativo peculiare di geni espressi
anche in altri tipi cellulari. Inoltre, la trascrizione e la traduzione di mRNA
possono diventare spazialmente separate nei neuroni, e gli mRNA sono trasportati
da proteine specifiche lungo i dendriti e gli assoni per essere tradotti
in proteine nella periferia della cellula. L’importanza della regolazione posttrascrizionale
della espressione genica nei neuroni è confermata dagli elevati
livelli di espressione di proteine leganti gli mRNA nel cervello e dalle patologie
indotte da mutazioni in alcuni dei geni codificanti per esse. Il nostro laboratorio
si occupa della proteina di legame all’RNA chiamata Sam68. Essa è fortemente
espressa nei neuroni ed è stato dimostrato che Sam68 viene indotta
durante il differenziamento di cellule staminali neuronali in neuroni maturi.
Recentemente, è stato anche dimostrato che Sam68 è espressa nei neuroni
ippocampali della corteccia e che la depolarizzazione di questi neuroni induce
la sua traslocazione in granuli dendritici suggerendo un ruolo regolatorio di
questa proteina nel metabolismo di specifici mRNA.
Esperimenti condotti in altri sistemi cellulari hanno dimostrato che
Sam68 partecipa a diversi aspetti del metabolismo cellulare degli mRNA,
quali lo splicing, l’esporto, ed il rilascio citoplasmatico di mRNA ed il
controllo trasduzionale. È stato proposto che Sam68 funzioni da sistema di
ricezione dei segnali di trasduzione di stimoli esterni alla cellula e modulando
l’utilizzo di RNA bersaglio. Infatti questa proteina è modificata posttrasduzionalmente
da eventi di fosforilazione, metilazione ed acetilazione che
ne modulano la capacità di legame degli RNA.
Il nostro laboratorio ha inoltre recentemente dimostrato che Sam68 associa
con i polisomi ingaggiati nella traduzione in risposta a segnali di progressione
del ciclo cellulare, suggerendo un ruolo di controllo trasduzionale per
questa proteina. Abbiamo anche identificato alcuni degli mRNA legati da
Sam68 e tra questi abbiamo osservato alcuni per proteine fondamentali per lo
sviluppo neuronale quali Neogenina, Mash1 e Tipin (Timeless interacting protein).
In questo progetto ci proponiamo di studiare la regolazione di questi
mRNA da parte di Sam68 in neuroni normali o sottosti a stress degenerativo.
478 2006