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Risultati acquisiti
Neuroscienze sperimentali
Poiché una proteina considerata come agente etiologico dell’AD, il peptide
beta-amiloide (A-Beta), è stata descritta come attivatore dello stress del
reticolo endoplasmatico (ER-stress) e questa attivazione è stata proposta
come conditio sine qua non per l’esecuzione della risposta apoptotica, è stato
analizzato l’ER-stress in cellule con o senza apoptosoma. La risposta cellulare
all’ER-stress prevede in questo sistema l’incremento dell’espressione di alcuni
trasduttori del segnale quali GADD153 e Grp78 ed il rilascio del catione calcio
dall’ER stesso. A questi eventi fa seguito l’attivazione dell’apoptosoma. Vice
versa l’assunzione del calcio da parte del mitocondrio e l’attivazione della
caspasi 12, enzima a tutt’oggi considerato fattore chiave della risposta all’ERstress,
sono eventi trascurabili per la risposta apoptotica. I nostri risultati
implicano che la via apoptosomica sia l’itinerario principale delle NPCs verso
la morte mediata da ER-stress e che questa non sia dipendente dall’assunzione
del catione calcio da parte del mitocondrio e dall’attivazione della
caspasi 12. Poiché il peptide A-Beta, tipico dell’AD, sembra essere un induttore
di ER-stress, i dati sono rilevanti nell’ottica di un’approfondita analisi dei
percorsi metabolici dell’apoptosi in questa ed altre neurodegenerazioni.
Per quanto riguarda l’approccio in vivo, incroci fra le linee murine per la
sovraespressione condizionale di Apaf1 FC98/Trap-Cre, FC98/D6-Cre e
FC98/L7ag13 sono stati effettuati. Inoltre è stata generata la nuova linea
murina Apaf1-flox/flox, per la inattivazione condizionale del gene Apaf1.
In attesa dei risultati derivanti dall’incrocio di questa linea con la linea
murina Tg2576, da noi scelta come modello animale di AD, abbiamo caratterizzato
l’insorgenza dei tratti patologici molecolari ed istologici in cellule primarie
ippocampali derivate al primo giorno postnatale dalla linea Tg2576,
dissezionate e poste in cultura. Ad una prima analisi, esse mostrano alterazioni
morfologiche a livello dei processi neuritici che risultano tortuosi, frammentati
e di dimensioni ridotte. Dal punto di vista molecolare mostrano accumulo
di A-beta endocellulare, accumulo di tau fosforilata ed attivazione di
calpaine dopo 20 giorni di incubazione, nessun tratto tipico della morte cellulare
programmata e incremento della proteina di risposta allo shock termico
hsp70. L’analisi genetica per incrocio che stiamo conducendo ci rivelerà l’eventuale
coinvolgimento delle molecole poste a valle nel percorso di morte
cellulare mediato dal mitocondrio in processi di degradazione terminale dei
neuroni o in processi specifici di regolazione post-traduzionale coinvolti nell’ontogenesi
delle neurodegenerazioni.
C.2.8 – Strategie terapeutiche per la Corea di Huntington. Il ruolo
di c-AMP-responsive element (CREB) (Francesca Romana Fusco)
La comprensione dei meccanismi alla base della vulnerabilità o della
resistenza dei neuroni striatali ai fenomeni neurodegenerativi della corea di
Huntington (HD) è di importanza fondamentale per lo studio di strategie terapeutiche.
Per tale motivo il nostro laboratorio si è in precedenza dedicato a
studiare la presenza della proteina huntingtina nei principali sottotipi neuro-
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