Vibrio Vibrionaceae – V. cholerae – V. mimicus – V ...

1
2
3
4
5
6
Vibrio
Taxonomie
• Familia Vibrionaceae
• Genul tip al familiei
– V. cholerae
– V. mimicus
– V. parahaemolyticus
– V. vulnificus
– V. fluvialis
– V. furnissii
– V. hollisae
– V. damsela
– V. alginolyticus
– V. metschnikovii
– V. cincinnatiensis
– V. harveyi
Descrierea genului
• bacili gram-negativi încurbaţi în virgulă, 0,5-0,8µm
• mobili
– flageli polari monotichi sau politrichi – medii lichide
– unele specii – numeroşi flageli laterali – medii solide
• nepretenţioşi nutritiv
– Creştere stimulată de Na +: NaCl 2-3%)
• facultativ anaerobi
• catalază +, oxidază +
• fermentează glucoza fără gaz
• reduc nitraţii la nitriţi
• cresc pe mediul TCBS (tiosulfat-citrat-săruri biliare-sucroză)
Habitat natural
• Specii acvatice
• Distribuţie dependentă de temperatură, concentraţia Na + , nutrienţi, prezenţa
plantelor, animalelor
• Ape marine şi estuarine, suprafaţa şi tractul intestinal al animalelor marine (fructe de
mare)
• Vibrioni nonhalofili – surse de apă proaspătă
• Vibrioni în stare dormantă (ocean) – VNC (viabili, non-cultivabili)
•
Semnificaţie clinică
• 12 specii Vibrio izolate de la om; cu excepţia V. furnissii, patogene pentru om
• Diaree/ infecţii extraintestinale; V. cholerae, ambele
• Frecvent izolate din sânge, plăgi (braţe, picioare), ochi, ureche, vezica biliară
• Rareori raportaţi la pacienţi cu meningită, pneumonie, infecţii tract urinar sau genital
Vibrio cholerae O:1 şi O:139
• Caractere microscopice
• Caractere de cultivare
– medii uzuale, pH 8
3/30/2012
1

5
6
7
8
9
Semnificaţie clinică
• 12 specii Vibrio izolate de la om; cu excepţia V. furnissii, patogene pentru om
• Diaree/ infecţii extraintestinale; V. cholerae, ambele
• Frecvent izolate din sânge, plăgi (braţe, picioare), ochi, ureche, vezica biliară
• Rareori raportaţi la pacienţi cu meningită, pneumonie, infecţii tract urinar sau genital
Vibrio cholerae O:1 şi O:139
• Caractere microscopice
• Caractere de cultivare
– medii uzuale, pH 8
– apă peptonată pH 9 (îmbogăţire) – 6-12 h, peliculă
– TCBS (selectiv)
• Caractere biochimice
– 2 biovaruri: clasic, El Tor
• Rezistenţa în mediul extern
– sensibili: lumina solară (10-12 h), pH acid (5,8), fierbere
• Structura antigenică
– O:1 – 3 serotipuri: Ogawa (AB), Inaba (AC), Hikojima (ABC)
– O:139
• Factori de virulenţă
– toxina holerică (enterotoxină termolabilă de tip A-B), cu mecanism de acţiune
identic cu enterotoxina TL a ECET
– mobilitate, neuraminidază/mucinază, adezine
Holera
• doză infectantă 10 8 organisme
• unele supravieţiuesc pH acid gastric
• colonizare masivă intestin intoxicaţie enterocite
• etape
– ingestia şi depăşirea barierei acide gastrice
– hidroliza mucusului protector şi colonizarea masivă
– enterotoxina holerică AMPc secreţia Cl - pierdere apă, electroliţi
diaree deshidratare e.cel. şoc hipovolemic, acidoză metabolică
• sdr. holeriform
• forme clinice
– hipertoxice
– moderate
– inaparente
• imunitate
– IgA secretori (2 ani)
Vibrio cholerae
• V. cholerae O1
– 7 pandemii de holeră: 1816-1817, 1829, 1852, 1863, 1881, 1889, 1961-prezent
• ”Cholera gravis” : diaree masivă, nedureroasă, fecale “apă de orez”(lichid clar
cu flocoane de mucus), ~ 1L/h → deshidratare severă, dezechilibrare
electrolitică, crampe musculare dureroase, pierderea elasticităţii cutanate,
anurie → deces prin deshidratare severă
• Diaree uşoară (ultima pandemie, biotip Eltor)
• Colonizare asimptomatică a intestinului
•
• V. cholerae O139 (Bengal)
– Emergentă în oct. 1992, Madras, India
– Nu aglutinează cu ser anti-O1 sau ser anti-O2-138
3/30/2012
2

10
11
12
13
• ”Cholera gravis” : diaree masivă, nedureroasă, fecale “apă de orez”(lichid clar
cu flocoane de mucus), ~ 1L/h → deshidratare severă, dezechilibrare
electrolitică, crampe musculare dureroase, pierderea elasticităţii cutanate,
anurie → deces prin deshidratare severă
• Diaree uşoară (ultima pandemie, biotip Eltor)
• Colonizare asimptomatică a intestinului
•
• V. cholerae O139 (Bengal)
– Emergentă în oct. 1992, Madras, India
– Nu aglutinează cu ser anti-O1 sau ser anti-O2-138
– Produce capsulă
•
• V. cholerae Non-O1
– Sinonime: Vibrioni NAG (non-aglutinabili), vibrioni non-holerici, V. cholerae non-
O1, non-O139, V. cholerae non-O1,139
– Nu aglutinează cu seruri anti-O1, O139
– Caractere biochimice tipice
– Nu produc toxina holerică, dar pot produce alte toxine
– Diaree uşoară, infecţii extraintestinale
– Septicemie la pacienţi cu ciroză/ alte boli asociate
– Tulpini izolate din ureche, plăgi, tract respirator, urină
Recoltarea, transportul şi conservarea probelor
• Probe extraintestinale (sânge, plăgi) – nu ridică probleme
– Vibrio patogen unic
– Creştere bună pe agar McConkey, agar-sânge
• Fecale – în primele 24 ore de boală, înainte de debutul ABT
• Tampon rectal
• Purgativ
• Însămânţare imediată
– Viabilitate bună în scaun apos, “apă de orez”
– În scaun format?
– F. sensibili la desicare → mediu de transport Carry-Blair (menţine viabilitatea 4S)
– Apa peptonată alcalină (transport-îmbogăţire) → însămânţare în 12-24 ore
•
Diagnostic de laborator
• Examen microscopic
– Microscopie pe fond întunecat: dimensiune, formă caracteristică, mobilitate
– scaun, bulion de îmbogăţire
– Imobilizarea în ser anti-O1 → identificare microscopică directă a V. cholerae O1
•
• Detectare directă V. cholerae O1 (10 6 -10 8 /ml) – aglutinare (latex/S. aureus)
•
• Izolare
– Multe lab nu folosesc medii speciale sau metode specifice pentru vibrioni
– Informarea lab asupra suspiciunii de infecţie cu Vibrio
– mediu de îmbogăţire – apă peptonată alcalină (36C) → subcultivare pe TCBS
după 8, 16, 24 ore
– mediu selectiv TCBS
– Agar-sânge: β (V. cholerae non-O1, unele O1), α (V. vulnificus), non-hemolitic
– McConkey: lactozo-negativi
– Nu cresc pe medii mai selective pentru enterobacteriacee
Vibrio – agar McConkey
Diagnostic de laborator
3/30/2012
3

12
13
14
15
16
– Informarea lab asupra suspiciunii de infecţie cu Vibrio
– mediu de îmbogăţire – apă peptonată alcalină (36C) → subcultivare pe TCBS
după 8, 16, 24 ore
– mediu selectiv TCBS
– Agar-sânge: β (V. cholerae non-O1, unele O1), α (V. vulnificus), non-hemolitic
– McConkey: lactozo-negativi
– Nu cresc pe medii mai selective pentru enterobacteriacee
Vibrio – agar McConkey
Diagnostic de laborator
•
• Identificare
– Oxidază +
– Biochimică (suspendare în SF, nu AD în sisteme comerciale)
• necesară în ţări în care holera este rară
• alte Vibrio spp.
– Antigenică: ser anti-O:1, ser anti-O:139
– Sisteme comerciale pentru detectarea toxinei holerice şi a hemolizinei directe
termostabile a V. parahemolyticus
•
• Testarea sensibilităţii la antibiotice
– Creştere bună pe agar/bulion MH a speciilor cu importanţă clinică; unele specii
marine au nevoie de concentraţii crescute de Na +
– Rezitsenţa la antibiotice rară comparativ cu Enterobactericeae-le
– Standard de interpretare CLSI pentru AM, TE, SXT, C, sulfonamide
– R la polimixine – V. cholerae biogrup Eltor sau V. vulnificus
Holera
•
• Tratament
– rehidratare (i.v. sau orală) → restaurează balanţa hidro-electrolitică şi previne
acidoza
– AB? (Te)
• Reduce perioada de excreţie
• Rezistenţă la tulpini circulante în ţări în curs de dezvoltare
Holera
• Epidemiologie
– rezervor de infecţie: bolnavi, purtători asimptomatici, fructe de mare
– transmitere: fecal-orală
– evoluţie endemică/ epidemică
– raportare imediată ASP
•
• Profilaxie
– regim internaţional de carantină
– igienă individuală şi colectivă
– vaccinare antiholerică – oral, fracţiuni Ag (IgA)
– chimioprofilaxia – sulfamide neresorbabile, nitrofurani, TE
Vibrioni halofili
• 2% NaCl
• crustacee, fructe de mare, peşti
• citotoxină termolabilă
• TIA, infecţii plăgi, arsuri
• rehidratare, TE
• prelucrare adecvată, refrigerare fructe de mare
3/30/2012
4

16
17
18
– chimioprofilaxia – sulfamide neresorbabile, nitrofurani, TE
Vibrioni halofili
• 2% NaCl
• crustacee, fructe de mare, peşti
• citotoxină termolabilă
• TIA, infecţii plăgi, arsuri
• rehidratare, TE
• prelucrare adecvată, refrigerare fructe de mare
Alţi vibrioni
• V. mimicus
– 1981
– Diaree, consum fructe de mare nepreparate termic (stridii)
– Dpdv clinic, epidemiologic, ecologic – similar V. cholerae non-O1
•
• V. parahaemolyticus
– 1950
– Gastroenterită – greţuri, vărsături, dureri abdominale, febră mică, frisoane, diaree
apoasă/hemoragică
– Autolimitată/fatală (7% la prima izbucnire epidemică)
– Rehidratare ± internare ± AB
– Peşte/fructe de mare crude /contaminate; contaminare după preparea termică
–
•
Alţi vibrioni
• V. vulnificus
– Sinonime: Vibrio L + , Vibrio Lac + , Beneckea vulnifica
– Specie Vibrio distinctă din 1976
– 2 sindroame:
• septicemie primară:
–pacienţi cu boli hepatice preexistente
–Mortalitate 50%
–Debut la câteva zile după ingestie de stridii crude
• infecţii ale plăgilor
–Post-traumatice sau după expunere la animale marine/mediu marin
– Hemoculturi, culturi plăgi pozitive
•
• V. vulnificus biogrupuri 2,3
– 1995 - V. vulnificus biogrup 2 izolat din infecţie plagă umană
– 1999 - V. vulnificus biogrup 3 izolat de la pacienţi cu infecţii ale plăgilor şi
bacteriemie
– Israel, expunere la peşte viu (tilapia) în crescătorie
•
• V. fluvialis
– Sinonime: vibrioni grup F, grup EF6
– 1981
– Cazuri sporadice de diaree în lume
•
• V. furnissii
– Sinonime: V. fluvialis biovar II, V. fluvialis aerogenic, V. fluvialis gaz +
– 1983
– Rar în produse patologice umane (fecale)
– Asociere clară cu diareea, implicare nedovedită
•
3/30/2012
5

19
20
21
22
23
– Sinonime: vibrioni grup F, grup EF6
– 1981
– Cazuri sporadice de diaree în lume
•
• V. furnissii
– Sinonime: V. fluvialis biovar II, V. fluvialis aerogenic, V. fluvialis gaz +
– 1983
– Rar în produse patologice umane (fecale)
– Asociere clară cu diareea, implicare nedovedită
•
Alţi vibrioni
• V. hollisae
– Sinonime: grup EF13, Enteric Grup 42
– 1982
– Halofil
– Cazuri sporadice de diaree
– Gena tdh (hemolizină directă termostabilă) a V. parahaemolyticus apare la toate
tulpinile de V. hollisae
•
• V. damsela
– Sinonime: V. damselae, Photobacterium damsela, P. damsela subsp. damsela, P.
damselae, P. damselae susp. damselae, Lisonella damsela, L. damselae
– 1981
– Infecţii umane plăgi ± bacteriemie
•
• V. alginolyticus
– Infecţii ţesuturi moi, plăgi, ureche, ochi
Alţi vibrioni
• V. metschnikovii
– 1981 - peritonită & bacteriemie, pacient cu inflamaţie a vezicii biliare
– Bacteriemie, urină, ulcer picior, diaree (rol nedovedit)
•
• V. cincinnatiensis
– Pacient cu bacteriemie şi meningită
– Fecale, ureche, plagă picior
•
• V. harveyi
– 1989 – infecţie plagă umană după muşcătură de rechin
•
•
Aeromonas
Taxonomie
• Singurul gen al familiei Aeromonadaceae (1986), patogen pt om
• Complex A. hydrophila
• Complex A. caviae
• A. veronii (bv. sobria, bv. veronii)
•
•
Descrierea genului
• BGN (sau cocoizi), 1-3,5 µm
• Mobili (flageli polari monotrichi)
• facultativ anaerobi
3/30/2012
6

23
24
25
26
27
• Complex A. hydrophila
• Complex A. caviae
• A. veronii (bv. sobria, bv. veronii)
•
•
Descrierea genului
• BGN (sau cocoizi), 1-3,5 µm
• Mobili (flageli polari monotrichi)
• facultativ anaerobi
• nepretenţioşi nutritiv
• 10-42 C (tulpini umane, mezofile)
• Fermentativ ± gaz
• Catalază +
• oxidază + (≠Enterobacteriaceae)
• Reduc nitraţii la nitriţi
• Rezistenţi la agentul vibriostatic O/129
Habitat natural
• Habitează ecosisteme acvatice, în toată lumea
– Apă dulce
– Ape marine
• Carne proaspătă (vită, pui, porc)
• Produse lactate (lapte crud, îngheţată)
• A. sobria – simbiont în intestinul lipitorilor medicinale
Semnificaţie clinică
• A. caviae - gastroenterită
– diaree acută apoasă → sdr dizenteriform → diaree cronică
• Eritrocite şi leucocite fecale absente
• Dureri abdominale
• Febră
• Greţuri, vărsături
– Infecţii autolimitate
– Diareea apoasă cu Aeromonas la adult adeseori poate masca o malignitate a
intestinului
– Gena alt – enterotoxină citotonică termo-labilă (f uşoare)
– Gena ast – enterotoxină citotonică termo-stabilă (f mai severe)
• A. veronii bv. sobria - sdr. Holeriform
• Complicaţii – sdr hemolitic şi uremic, insuficienţă renală → transplant renal (A.
hydrophila, A. veronii bv. sobria)
• Septicemie (imunocompromişi: boli ficat, hemopatii maligne)
• Infecţii plăgi traumatice în contact cu apa (cazuri necomplicate → celulită → infecţii
mionecrotice)
• Tratament
– reechilibrare hidroelectrolitică
– ureidopeniciline, cefalosporine G2, G3, aminoglicozide, tetraciline, cloramfenicol,
cotrimoxazol
•
Recoltarea, transportul şi conservarea probelor
• Aeromonadele supravieţuiesc bine în produse patologice
• Orice mediu de transport este bun
• Preferabil fecale vs. tampon rectal
• Fecale recoltate în faza acută a îmbolnăvirii
•
Diagnostic de laborator
3/30/2012
7

26
27
28
29
30
•
– ureidopeniciline, cefalosporine G2, G3, aminoglicozide, tetraciline, cloramfenicol,
cotrimoxazol
Recoltarea, transportul şi conservarea probelor
• Aeromonadele supravieţuiesc bine în produse patologice
• Orice mediu de transport este bun
• Preferabil fecale vs. tampon rectal
• Fecale recoltate în faza acută a îmbolnăvirii
•
Diagnostic de laborator
• Izolarea
– Creştere bună pe medii dif/selective pentru enterobacterii
– Colonii L+/sucroză+ seamană cu enterobacterii non-patogene
– ASg cu 20 µg/ml AM → colonii β-hemolitice → oxidază+, indol+
– Agar CIN (cefsulodin, irgasan, novobiocin) modificat (4 în loc de 15 µg/ml
cefsulodin) → colonii cu centru roz, ce nu pot fi dif de Yersinia
– Mediu XGM (xiloză-galactozidază) – Aeromonas, Shigella, Salmonella, Yersinia
– TCBS este inhibitor pentru aeromonade
– Îmbogăţire în apă peptonată alcalină
– Raportare semicantitativă (câteva colonii/creştere moderată, organism
predominant) pentru interpretarea semnificaţiei clinice
•
• Identificarea
– ≠ Vibrio: R la agent vibriostatic O/129; inabilitatea de creştere în medii >6% Na +
– ≠ Plesiomonas: lizina, ornitina, arginina+, fermentare m-inozitol
•
• Sensibilitatea la antibiotice
– S: CIP, G, AK, TOB, IMI, SXT
– R: AM
– 3 beta-lactamaze beta-lactam-induse: cefalosporinază, penicilinază, metalo-betalactamază
(carbapenemază)
– ABG convenţională subestimează rezistenţa la carbapeneme
Plesiomonas
Plesiomonas
• Plesiomonas shigelloides inclus în familia Enterobacteriaceae (înrudire cu Proteus)
• BGN facultativ anaerobi (~ Enterobacteriaceae)
• Oxidază+, sensibil la agentul vibriostatic O/129 (≠ Enterobacteriaceae)
• ape dulci, estuarine contaminate fecal
• animale acvatice, mamifere, păsări
• poate coloniza tranzitoriu intestinul copiilor (promiscuitate)
• BDA
– Indivizi care trăiesc sau călătoresc în ţări tropicale
– Consum fructe mare
– Autolimitată
– Diaree apoasă/hemoragică, dureri abdominale, deshidratare, febră
– Sdr dizenteriform – hemolizină beta, invadare şi multiplicare în celule
gastrointestinale umane
– Sdr holeriform – toxine cholera-like, termostabile/termolabile, LPS
• Septicemii -
• Meningite (n.n.)
•
Diagnostic de laborator
• Agar sânge
3/30/2012
8

30
– Diaree apoasă/hemoragică, dureri abdominale, deshidratare, febră
– Sdr dizenteriform – hemolizină beta, invadare şi multiplicare în celule
gastrointestinale umane
– Sdr holeriform – toxine cholera-like, termostabile/termolabile, LPS
• Septicemii -
• Meningite (n.n.)
•
Diagnostic de laborator
• Agar sânge
• Lactoză-neg, sucroză-neg pe medii pt enterobacterii
• Nu creşte pe TCBS
• Creşte bine pe CIN (colonii opace, fără centru roz)
• LDC+, ODC+, ADH+
• Fermentează inozitol
3/30/2012
9