Validazione di un algoritmo per la valutazione dei rischi da ...

G Ital Med Lav Erg 2007; 29:3 421
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Tabella I. Valori medi (± DS) degli indici di genotossicità nell’intero gruppo e rispettivamente
nei gruppi suddivisi in base ai livelli di esposizione personale TWA ai campi magnetici ELF.
La differenza tra i gruppi non è significativa (p> 0,01)
INTRODUZIONE
I campi elettromagnetici indotti dalla corrente elettrica (Extremely
Low Frequency -ELF-) sono stati sospettati di indurre vari effetti avversi
(WHO 2007). Tra gli aspetti affrontati in modo più intensivo dalla ricerca
vi sono i possibili effetti cancerogeni nella popolazione infantile ed il
rischio cancerogeno nell’adulto conseguente alle esposizioni ambientali
e/o occupazionali (WHO, 2007; IARC 2002).
In particolare, per quanto riguarda il possibile meccanismo patogenetico
esistono ancora discussioni sul possibile effetto genotossico diretto
ed anche se diversi dati sarebbero più a favore di un effetto epigenetico,
i dati, nel complesso, sono ancora largamente inconclusivi.
Su queste basi ci siamo proposti di studiare la genotossicità dei campi
magnetici ELF in 109 lavoratori esposti a vari livelli di ELF-MF.
MATERIALI E METODI
L’esposizione individuale ad ELF è stata misurata per due turni lavorativi
mediante dosimetri personali. I livelli di esposizione sono stati
calcolati come valori ponderati (TWA), espressi in microtesla (µT).
La proliferazione in vitro dei linfociti è stata indotta seguendo la
metodica convenzionale di stimolazione antigenica con Phythemagglutinin
(PHA-M), per un totale di 720 colture allestite(Rooney e Czepulowski,
1992).
In breve, le singole colture venivano allestite con 0.8 ml di sangue
periferico eparinato in 6 ml di Medium RPMI 1640, specifico per la coltura
dei linfociti, stabilizzato con tampone HEPES (25mM) ed arricchito
con siero fetale bovino (15%), L-Glutamina (200mM), gentamicina
(Gentalin 1,3 mg/ml) e Phythemagglutinin (PHA-M 7ug/ml), incubate
per 48h-72h.
Nei linfociti di sangue periferico sono stati determinati i seguenti indici
di genotossicità: a) aberrazioni cromosomiche (CA): gaps cromatidiche
e cromosomiche, rotture cromatidiche e cromosomiche, riarrangiamenti
tra cromatidi; b) scambi tra cromatidi fratelli (SCE); c) micronuclei
(MN).
La valutazione degli SCE è stata eseguita secondo la procedura
“FPG” (Fluorescence Plus Giemsa) (Perry e Wolffs, 1974) mentre l’analisi
dei MN è stata ottenuta inserendo nelle colture la Citocalasina B nella
concentrazione finale di 5 ug/ml (Fenech et al, 1986).
Il confronto delle medie nei gruppi di esposizione considerati è
stato effettuato tramite test t di Student. I dati sono stati analizzati anche
mediante studio della regressione multipla stepwise, considerando
ciascun biomarker esaminato come variabile dipendente, e esposizione,
età, sesso, abitudine tabagica ed alcolica come variabili indipendenti.
Tutte le analisi statistiche sono state effettuate con il software statistico
SPSS 12.0.
RISULTATI
L’esposizione mediana nell’intero gruppo è risultata 0,35 µT. Abbiamo
deciso di suddividere la casistica in due gruppi, “bassa esposizione”
(39 soggetti ≤ 0,2 µT) e “esposizione più elevata” (70 soggetti > 0,2 µT).
In quest’ultimo gruppo è stato poi selezionato un sottogruppo di “soggetti
con esposizione ≥ 1 µT” (31 soggetti).
La Tabella I presenta i principali risultati degli indici di danno genotossico
studiati nei gruppi a diffferente esposizione.
Né nell’intero gruppo a “esposizione
più elevata”, né nel sottogruppo dei
“soggetti con esposizione ≥ 1 µT” è stato
possibile evidenziare un aumento significativo
delle AC rispetto al gruppo
“bassa esposizione”. Il dato è valido
considerando sia i gaps che le rotture ed
i riarrangiamenti. Anche per l’analisi
degli SCE, valutati come media del numero
di scambi, non si è riscontrata alcuna
significativa differenza tra i gruppi,
ed il risultato è analogo per i MN,
considerati come media delle cellule binucleate
con MN, il rapporto tra cellule
micronuclei valutati sulle binucleate
esaminate ed infine come rapporto tra il
numero di cellule binucleate con MN/
cellule binucleate totali esaminate.
I dati sono stati confermati mediante analisi della regressione multipla
stepwise.
DISCUSSIONE
Osservata in alcuni studi ma non confermata in altri (IARC, 2002;
WHO, 2007), l’ipotesi di un effetto genotossico è stata rilanciata da alcuni
dati recenti, tra i quali quelli del Progetto Internazionale Reflex (Testa
et al, 2004). Anche un nostro recente studio ha rilevato un tendenziale aumento,
sebbene non significativo, degli Scambi tra Cromatidi Fratelli
(SCE) in linfociti di sangue periferico in lavoratori esposti a livelli di ELF
> 0,4 µT (Gobba et al, 2003).
La casistica esaminata in questo studio (n° 109 lavoratori) è relativamente
ampia rispetto a quelle esaminate in altri riportati in letteratura, e
comprende lavoratori con esposizioni abbastanza diversificate (95% dei
valori TWA: 0,02 - 4,67 µT). In questo modo è stato possibile una suddivisione
dei soggetti in gruppi a differenti livelli di esposizione(≤0,2; ≥ 0,2
e ≥ 1 µT).
Inoltre abbiamo utilizzato diversi biomarker citogenetici, in modo da
valutare il potenziale danno a carico del DNA a differenti punti della replicazione
cellulare.
I risultati non evidenziano differenze significative negli indicatori né
nel confronto tra i due gruppi a “bassa esposizione” vs “esposizione più
elevata”, né confrontando i dati del gruppo a bassa esposizione contro i
31 soggetti con esposizione ≥ 1 µT.
In conclusione, i risultati del nostro studio, condotto in una casistica relativamente
ampia di lavoratori esposti a livelli di ELF-MF ben diversificati,
ed utilizzando differenti indicatori di genotossicità in grado di rilevare
la mancata riparazione del danno, non forniscono alcun supporto all’ipotesi
che i campi magnetici ELF possano indurre un effetto genotossico.
BIBLIOGRAFIA
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Fratelli (SCE) e High- Frequency Cells in lavoratori professionalmente
esposti a campi magnetici a frequenza estremamente bassa
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7) Word Health Organization (WHO): Environmental Health Criteria -
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http://www.who.int/peh-emf/publications/elf_ehc/en/index.html