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420 G Ital Med Lav Erg 2007; 29:3 www.gimle.fsm.it BIBLIOGRAFIA 1) Turjanmaa K. Incidence of immediate allergy to latex gloves in hospital personnel. Contact Dermatitis 1987; 17: 270-5. 2) Vandenplas O, Delwiche J-P, Evrard G, Aimont P, Van Der Brempt X, Jamart J, et al. Prevalence of occupational asthma due to latex among hospital personnel. Am J Respir Crit Care Med 1995; 151:54-60. 3) Siracusa A, Desroisiers M, Marabini A. Epidemiology of occupational rhinitis: prevalence, aetiology and determinants. Clin Exp Allergy 2000; 30: 1519-34. 4) Fiorito A, Larese F, Molinari S, Negro C, Barbina P, Peresson M. Sensibilizzazione allergica e sintomi associati al lattice in un gruppo di lavoratori della sanità. Med Lav 1996; 87: 423-31. 5) Smedley J, Juri A, Bendall H, Frew A, Coggon D. Prevalence and risk factors for latex allergy: a cross sectional study in a United Kingdom hospital. Occup Environ med 1999; 56:833-6. 6) Vandenplas O, Beezhold D, Tarlo SM. Latex allergy. In: Bernstein IL, Chan-Yeung M, Malo J-1, Bernstein DI, editors. Asthma in the workplace and related conditions. 3 nd ed. New York: Taylor & Francis; 2006, 437-61. 7) Brugnami G, Marabini A, Polticchia MS, Stopponi R, Surano E, Siracusa A. Cutaneous and respiratory symptoms in hospital workers using latex gloves: an epidemiological study. Allergy 2000; 55, supplement 63:68. SESSIONE RADIOPROTEZIONE COM-01 VALUTAZIONE DELLA GENOTOSSICITÀ DEI CAMPI MAGNETICI A FREQUENZA ESTREMAMENTE BASSA (ELF- MF) IN LAVORATORI ESPOSTI PER RAGIONI PROFESSIONALI M. Scaringi1, 2 , P. Temperani3 , P. Rossi4, G. Bravo1,2 , F. Gobba1,2 1 Cattedra di Medicina del Lavoro, Dipartimento di Scienze di Sanità Pubblica; Università di Modena e Reggio Emilia, Modena 2 Dottorato di Ricerca in Sanità Pubblica, Dipartimento di Scienze di Sanità Pubblica; Università di Modena e Reggio Emilia, Modena 3 Laboratorio di Citogenetica Oncoematologica, Dipartimento Integrato Oncologia ed Ematologia, Università degli Studi di Modena e Reggio Emilia, Modena 4 Istituto Superiore per la Prevenzione e la Sicurezza del Lavoro (ISPESL) Corrispondenza: Meri SCARINGI, Dottorato di Ricerca in Sanità Pubblica, Dipartimento di Scienze di Sanità Pubblica, Università di Modena e Reggio Emilia, Via Campi 287 - 41100 Modena (MO) ITALY, Tel + 39 059 205 54 75, Fax + 39 059 205 54 83, e-mail: mscaringi@gmail.com RIASSUNTO. I campi ELF sono stati sospettati di indurre effetti avversi (WHO 2007). Esistono ancora discussioni sul possibile effetto genotossico diretto ed anche se diversi dati sarebbero più a favore di un effetto epigenetico, i dati, nel complesso, sono largamente inconclusivi. Su queste basi abbiamo deciso di studiare la genotossicità dei campi ELF in 109 lavoratori esposti a vari livelli di ELF-MF. Nei linfociti di sangue periferico sono state valutate le aberrazioni cromosomiche (CA); gli scambi tra cromatidi fratelli (SCE) e i micronuclei (MN). L’esposizione mediana nell’intero gruppo è risultata 0,35 µT. La casistica è stata suddivisa in due gruppi:“bassa esposizione” (39 soggetti ≤ 0,2 µT) e “esposizione più elevata” (70 soggetti > 0,2 µT). In quest’ultimo gruppo è stato poi selezionato un sottogruppo di “soggetti con esposizione ≥ 1 µT” (31 soggetti). I risultati non evidenziano differenze significative negli indicatori né nel confronto tra i due gruppi a “bassa esposizione” vs “esposizione più elevata”, né confrontando i dati del gruppo a bassa esposizione contro i 31 soggetti con esposizione ≥ 1 µT. I risultati dello studio, condotto in una casistica relativamente ampia di lavoratori esposti a livelli di ELF- MF ben diversificati, ed utilizzando differenti indicatori di genotossicità in grado di rilevare la mancata riparazione del danno, non forniscono supporto all’ipotesi che i campi ELF possano indurre un effetto genotossico. Parole chiave: ELF-MF; Genotossicità; Linfociti. EVALUATION OF THE GENOTOXICITY OF THE EXTREMELY LOW FREQUENCY - MAGNETIC FIELDS (ELF- MF) IN WORKERS EXPOSED FOR PROFESSIONAL REASONS ABSTRACT. Whether or not ELF-MF has genotoxic potential is a controversial issue. In the present study, we investigated the genotoxic effect using cytogenetic assays (CA - SCE - MN), in 109 workers exposed to ELF-MF. The mean value of occupational exposure in the whole group was 0.35 µT. According to the exposure level the workers were stratified in two different groups: low exposed (n. 39, TWA ≤ 0.2 µT) and higher exposed (n. 70; TWA > 0.2 µT): the groups did not significantly differ for the examined variables. Due to these results we decided to re-evaluate the effect only considering the highest exposed workers: we selected 31 workers exposed to TWA levels exceeding 1 µT, and compared vs. the low exposed subjects: again, the difference in the groups examined were not significant. At multivariate regression analysis was also applied: no correlation was observed with cytogenetic biomarkers. The results of this study does not support the hypothesis of any direct genotoxic effect of ELF-MF, at least at the environmental levels currently found in an occupational settings. Key words: ELF-MF, Genotoxicity, Lymphocytes.
G Ital Med Lav Erg 2007; 29:3 421 www.gimle.fsm.it Tabella I. Valori medi (± DS) degli indici di genotossicità nell’intero gruppo e rispettivamente nei gruppi suddivisi in base ai livelli di esposizione personale TWA ai campi magnetici ELF. La differenza tra i gruppi non è significativa (p> 0,01) INTRODUZIONE I campi elettromagnetici indotti dalla corrente elettrica (Extremely Low Frequency -ELF-) sono stati sospettati di indurre vari effetti avversi (WHO 2007). Tra gli aspetti affrontati in modo più intensivo dalla ricerca vi sono i possibili effetti cancerogeni nella popolazione infantile ed il rischio cancerogeno nell’adulto conseguente alle esposizioni ambientali e/o occupazionali (WHO, 2007; IARC 2002). In particolare, per quanto riguarda il possibile meccanismo patogenetico esistono ancora discussioni sul possibile effetto genotossico diretto ed anche se diversi dati sarebbero più a favore di un effetto epigenetico, i dati, nel complesso, sono ancora largamente inconclusivi. Su queste basi ci siamo proposti di studiare la genotossicità dei campi magnetici ELF in 109 lavoratori esposti a vari livelli di ELF-MF. MATERIALI E METODI L’esposizione individuale ad ELF è stata misurata per due turni lavorativi mediante dosimetri personali. I livelli di esposizione sono stati calcolati come valori ponderati (TWA), espressi in microtesla (µT). La proliferazione in vitro dei linfociti è stata indotta seguendo la metodica convenzionale di stimolazione antigenica con Phythemagglutinin (PHA-M), per un totale di 720 colture allestite(Rooney e Czepulowski, 1992). In breve, le singole colture venivano allestite con 0.8 ml di sangue periferico eparinato in 6 ml di Medium RPMI 1640, specifico per la coltura dei linfociti, stabilizzato con tampone HEPES (25mM) ed arricchito con siero fetale bovino (15%), L-Glutamina (200mM), gentamicina (Gentalin 1,3 mg/ml) e Phythemagglutinin (PHA-M 7ug/ml), incubate per 48h-72h. Nei linfociti di sangue periferico sono stati determinati i seguenti indici di genotossicità: a) aberrazioni cromosomiche (CA): gaps cromatidiche e cromosomiche, rotture cromatidiche e cromosomiche, riarrangiamenti tra cromatidi; b) scambi tra cromatidi fratelli (SCE); c) micronuclei (MN). La valutazione degli SCE è stata eseguita secondo la procedura “FPG” (Fluorescence Plus Giemsa) (Perry e Wolffs, 1974) mentre l’analisi dei MN è stata ottenuta inserendo nelle colture la Citocalasina B nella concentrazione finale di 5 ug/ml (Fenech et al, 1986). Il confronto delle medie nei gruppi di esposizione considerati è stato effettuato tramite test t di Student. I dati sono stati analizzati anche mediante studio della regressione multipla stepwise, considerando ciascun biomarker esaminato come variabile dipendente, e esposizione, età, sesso, abitudine tabagica ed alcolica come variabili indipendenti. Tutte le analisi statistiche sono state effettuate con il software statistico SPSS 12.0. RISULTATI L’esposizione mediana nell’intero gruppo è risultata 0,35 µT. Abbiamo deciso di suddividere la casistica in due gruppi, “bassa esposizione” (39 soggetti ≤ 0,2 µT) e “esposizione più elevata” (70 soggetti > 0,2 µT). In quest’ultimo gruppo è stato poi selezionato un sottogruppo di “soggetti con esposizione ≥ 1 µT” (31 soggetti). La Tabella I presenta i principali risultati degli indici di danno genotossico studiati nei gruppi a diffferente esposizione. Né nell’intero gruppo a “esposizione più elevata”, né nel sottogruppo dei “soggetti con esposizione ≥ 1 µT” è stato possibile evidenziare un aumento significativo delle AC rispetto al gruppo “bassa esposizione”. Il dato è valido considerando sia i gaps che le rotture ed i riarrangiamenti. Anche per l’analisi degli SCE, valutati come media del numero di scambi, non si è riscontrata alcuna significativa differenza tra i gruppi, ed il risultato è analogo per i MN, considerati come media delle cellule binucleate con MN, il rapporto tra cellule micronuclei valutati sulle binucleate esaminate ed infine come rapporto tra il numero di cellule binucleate con MN/ cellule binucleate totali esaminate. I dati sono stati confermati mediante analisi della regressione multipla stepwise. DISCUSSIONE Osservata in alcuni studi ma non confermata in altri (IARC, 2002; WHO, 2007), l’ipotesi di un effetto genotossico è stata rilanciata da alcuni dati recenti, tra i quali quelli del Progetto Internazionale Reflex (Testa et al, 2004). Anche un nostro recente studio ha rilevato un tendenziale aumento, sebbene non significativo, degli Scambi tra Cromatidi Fratelli (SCE) in linfociti di sangue periferico in lavoratori esposti a livelli di ELF > 0,4 µT (Gobba et al, 2003). La casistica esaminata in questo studio (n° 109 lavoratori) è relativamente ampia rispetto a quelle esaminate in altri riportati in letteratura, e comprende lavoratori con esposizioni abbastanza diversificate (95% dei valori TWA: 0,02 - 4,67 µT). In questo modo è stato possibile una suddivisione dei soggetti in gruppi a differenti livelli di esposizione(≤0,2; ≥ 0,2 e ≥ 1 µT). Inoltre abbiamo utilizzato diversi biomarker citogenetici, in modo da valutare il potenziale danno a carico del DNA a differenti punti della replicazione cellulare. I risultati non evidenziano differenze significative negli indicatori né nel confronto tra i due gruppi a “bassa esposizione” vs “esposizione più elevata”, né confrontando i dati del gruppo a bassa esposizione contro i 31 soggetti con esposizione ≥ 1 µT. In conclusione, i risultati del nostro studio, condotto in una casistica relativamente ampia di lavoratori esposti a livelli di ELF-MF ben diversificati, ed utilizzando differenti indicatori di genotossicità in grado di rilevare la mancata riparazione del danno, non forniscono alcun supporto all’ipotesi che i campi magnetici ELF possano indurre un effetto genotossico. BIBLIOGRAFIA 1) Gobba F, Roccatto L, Sinigaglia B, Temperani P. Scambi tra Cromatidi Fratelli (SCE) e High- Frequency Cells in lavoratori professionalmente esposti a campi magnetici a frequenza estremamente bassa (ELF). Med Lavoro 2003;94:450- 458. 2) IARC: IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans. Vol. 80. Non-ionizing radiation, Part 1: static and extremely low-frequency (ELF) electric and magnetic fields. International Agency for Research on Cancer, Lyon 2002. Available at the Internet site: http://monographs.iarc.fr/ 3) Perry P, Wolff S. New Giemsa method for the differential staining of sister chromatids. Nature 1974; 251:156-158. 4) Rooney DE, Czepulowski BH. Human Cytogenetics: a pratical approach. 1992 Oxford:IRL Press. 5) Fenech M, Morley A.A. Cytokinesis-block micronucleus method in human lymphocytes: effect of in vivo ageing and low-dose X-irradiation. Mutat. Res 1986; 161: 193-198. 6) Testa A, Cordelli E, Stronati L, Marino C, Lovisolo Ga, Fresegna Am, Conti D, Villani P. Evaluation of genotoxic effect of low level 50 hz magnetic fields on human blood cells using different cytogenetic assays. Bioelectromagnetics 2004; 25: 613-619. 7) Word Health Organization (WHO): Environmental Health Criteria - Monograph N° 238: Extremely Low Frequency Fields. 2007. http://www.who.int/peh-emf/publications/elf_ehc/en/index.html
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