tipizzazione e caratterizzazione di varietà precoci di patata ... - PbgLab

LEPORE STUDIO DEI METABOLITI SECONDARI DI VARIETà PRECOCI DI SolANUm tUBeroSUm
mg/Kg
1.800
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09-AR-S-A 09-AR-S-E
09-AR-S-G
Figura 1. — ESI (+) LC-MS di un estratto totale di tubero. Picchi:
(1) acido ascorbico; (2) tirosina; (3) caffeoil spermina, (4) triptofano,
(5) 3-O-caffeoil-5-O-feruloil acido chinico; (6) bis-diidrocaffeoil
spermina; (7) acido clorogenico, (8) rutina; (9) Tris(dihydrocaffeoyl)
spermidine; (10) α-chaconine; (11) α-solanina; (12) kaemferol- 3-Orutinoside;
(13) 3-OMe-Quercetina; (14) apigenina.
realizzato utilizzando tuberi raccolti in diversi siti di
coltivazione in Puglia e Sicilia. Le regioni dei siti
di raccolta del tubero di Solanum tuberosum rappresentano
le zone agricole dove si concentra la
maggior parte della produzione, commercializzazione
ed esportazione della patata novella in Italia. I
tuberi freschi sono stati congelati in azoto liquido,
mg/Kg
1.800
1.600
1400
1200
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600
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200
0
conservati al buio a -20 °C fino all’uso, l’estrazione è
stata effettuata in metanolo ed acido meta-fosforico
utilizzando gli ultrasuoni sul prodotto liofilizzato 7.
L’identificazione e la quantizzazione dei metaboliti
presenti negli estratti di tubero è stata ottenuta mediante
HPLC-DAD, l’analisi quantitativa è stata effettuata
attraverso curve di calibrazione da standard
puri. In tutti i tuberi analizzati i metaboliti più abbondanti
sono risultati acido clorogenico ed ascorbico.
La definitiva identificazione dei metaboliti secondari
e l’analisi quali-quantitava dei glicoalcaloidi
è stata ottenuta mediante LC-MS/MS (Figura 1) 8-10.
I risultati dello studio quali quantitativo sono mostrati
nelle Figure 2-4. Analizzando i risultati ottenuti
per i tuberi della cultivar Spunta un contenuto di
acido ascorbico e acido clorogenico superiore è stato
osservato per il campione 09-SP-P-A (1600 mg/
kg e 1200 mg/kg rispettivamente) rispetto a quanto
osservato per gli altri tuberi della stessa cultivar (acido
ascorbico 900-1200 mg/kg ed acido clorogenico
400-700 mg/kg, rispettivamente, Figura 3).
Il contenuto degli analiti identificati nei tuberi della
cultivar Arinda è risultato mediamente più basso
rispetto a quanto rilevato per i tuberi della varietà
Spunta, con l’eccezione di acido ascorbico, tirosina
ed acido clorogenico, che risultavano i metaboliti
più abbondanti (44%, 17% e 15%, rispettivamente).
I flavonoidi e i derivati poliamminici (caffeoil spermina,
bis-diidrocaffeoil spermina, tris diidrocaffeoil
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
09-SG-P-C 09-SG-P-D
09-SG-S-F 09-SG-P-C-COM
09-SG-S-I-GIARRE 09-SG-S-L-ISPICA 09-SG-S-H-MARSALA
Figura 2. — Metaboliti (mg/kg di droga secca) osservati nei tuberi della cultivar spunta: (1) acido ascorbico, (2) tirosina, (3) caffeoil spermina,
(4) triptofano, (5) acido 3-caffeoil-5-o- feruloil chinico, (6) bis-diidrocaffeoil spermina, (7) acido neoclorogenico, (8) acido clorogenico,
(9) ammide dell’acido ferulico, (10) bis-diidrocaffeoil spermidina, (11) tris-diidrocaffeoil spermidina, (12) flavonoidi,, (13) alcaloidi.
46 MINERVA BIOTECNOLOGICA Marzo 2012