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tipizzazione e caratterizzazione di varietà precoci di patata ... - PbgLab

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TIPIzzAzIONE DELL’ORIGINE DI COLTIVAzIONE DELLA PATATA ONOFRI<br />

campione ibridato su un array, nella procedura onecolor,<br />

possono essere utilizzati per <strong>di</strong>versi tipi <strong>di</strong><br />

confronto, ed espressi come fold change del campione<br />

scelto come ‘test’ rispetto al campione scelto<br />

come reference; nel nostro lavoro sono stati considerati<br />

geni <strong>di</strong>fferenzialmente espressi quelli per<br />

cui il valore <strong>di</strong> fold change era maggiore <strong>di</strong> 2 (geni<br />

up-regolati) o minore <strong>di</strong> -2 (geni down-regolati).<br />

È applicato un filtro anche alla statistica B corretta<br />

per test multipli (>2). I risultati, quin<strong>di</strong>, non sono<br />

espressi come valore assoluto dell’espressione genica,<br />

ma sempre come espressione relativa, fra coppie<br />

<strong>di</strong> campioni a confronto.<br />

Risultati<br />

In primo luogo va sottolineato che tutte le informazioni<br />

ottenibili sulla regolazione dei geni nei <strong>di</strong>versi<br />

confronti si riferiscono all’espressione genica in<br />

tuberi maturi, e dormienti. Secondariamente è stato<br />

osservato che un numero variabile da 34524 a 39533<br />

sonde del chip davano segnali positivi e significativamente<br />

al <strong>di</strong> sopra della soglia del background, numeri<br />

che corrispondono rispettivamente al 75-85% delle<br />

feature presenti sul vetrino. La relativa costanza <strong>di</strong><br />

questa percentuale nelle varie ibridazioni, nel corso<br />

delle prove <strong>di</strong> entrambi gli anni e per tutti i confronti,<br />

permette <strong>di</strong> ritenere il numero <strong>di</strong> geni valutato come<br />

<strong>di</strong>fferenzialmente espresso come affidabile. In altre<br />

parole, le forti fluttuazioni osservate nel numero <strong>di</strong><br />

geni <strong>di</strong>fferenzialmente espressi nei vari confronti effettuati,<br />

non possono essere ascritte a <strong>di</strong>versità importanti<br />

nell’efficienza <strong>di</strong> ibridazione <strong>di</strong> ciascun RNA al<br />

suo array. Questa informazione permette <strong>di</strong> valutare<br />

comparativamente in maniera affidabile tutte le coppie<br />

<strong>di</strong> confronti <strong>di</strong> seguito considerate.<br />

Confronto fra i campioni del 2008<br />

Nella Tabella II sono sintetizzate le statistiche dei<br />

confronti effettuati sui campioni 2008 fra alcune coppie<br />

<strong>di</strong> località e/o <strong>varietà</strong>. L’obiettivo <strong>di</strong> questo confronto<br />

<strong>di</strong> tipo quantitativo era verificare quale dei tre<br />

fattori considerati (<strong>varietà</strong>, regione e località) avesse<br />

l’effetto maggiore nel modulare l’espressione genica<br />

genome-wide, come osservabile me<strong>di</strong>ante l’array<br />

POCI. Dai dati del 2008, e senza ancora considerare<br />

quali geni vengano modulati, emergono alcune informazioni<br />

preliminari. In primo luogo, il massimo<br />

numero <strong>di</strong> geni <strong>di</strong>fferenzialmente espressi più <strong>di</strong> 2<br />

volte (up- o down-regolati), è stato in questa prima<br />

Tabella II.

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